基于AMPK/mTOR信號(hào)通路的木香油方抗氧糖剝奪致PC12細(xì)胞損傷的作用及機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2020-12-04 07:59
目的:采用整合藥理學(xué)方法揭示木香油方治療腦卒中的化學(xué)成分及作用靶點(diǎn);探討木香油方揮發(fā)油抗氧糖剝奪致PC12細(xì)胞損傷的作用及機(jī)制。方法:1.借助整合藥理學(xué)平臺(tái),收集木香、胡椒、細(xì)辛的化學(xué)成分和腦卒中的相關(guān)靶點(diǎn),構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用信息網(wǎng)絡(luò),再通過GO基因功能和KEGG通路分析木香油方揮發(fā)油治療腦卒中的相關(guān)靶點(diǎn)及通路。2.(1)將PC12細(xì)胞分為對(duì)照組,木香油方揮發(fā)油組(終濃度分別為32,16,8,4,2,1μg/mL)。采用CCK-8試劑盒檢測(cè)木香油方揮發(fā)油對(duì)PC12細(xì)胞毒性的影響。(2)建立PC12細(xì)胞氧糖剝奪2h再灌注24h損傷模型,分為對(duì)照組,氧糖剝奪再灌注組,陽性藥尼莫地平組(5μg/ml),氧糖剝奪再灌注+木香油方揮發(fā)油(1,2,4μg/ml)組。采用CCK-8試劑盒檢測(cè)細(xì)胞存活率、乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒檢測(cè)LDH漏出率、化學(xué)熒光染色法檢測(cè)鈣離子濃度變化、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)線粒體膜電位變化。3.(1)將PC12細(xì)胞分為對(duì)照組,氧糖剝奪再灌注組,氧糖剝奪再灌注+木香油方揮發(fā)油(4μg/ml)組,氧糖剝奪再灌注+自噬抑制劑3-MA(10μM)組,氧糖剝奪再灌注+3-MA+木香...
【文章來源】:寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
木香、胡椒和細(xì)辛治療腦卒中的候選靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)紅色代表候選藥物靶標(biāo);黃色代表已知疾病靶標(biāo);綠色代表普遍疾病靶標(biāo);灰色代表其他
寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 論文正文卒中至關(guān)重要,并提示我們?cè)谶M(jìn)行復(fù)方研究時(shí),抓住這些成分聚焦的核心通路,來進(jìn)行腦卒中發(fā)病機(jī)制研究。如圖 2 所示,與腦卒中發(fā)病相關(guān)的通路主要有神經(jīng)退行性疾病、雌激素信號(hào)通路、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子信號(hào)通路、GnRH 信號(hào)通路、細(xì)胞生長(zhǎng)和死亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子、神經(jīng)系統(tǒng)、甲狀腺激素信號(hào)傳導(dǎo)通路,內(nèi)分泌系統(tǒng)等。
圖 3 木香油方揮發(fā)油對(duì) PC12 細(xì)胞毒性的影響香油方揮發(fā)油對(duì) OGD/R 致 PC12 細(xì)胞損傷細(xì)胞存活率的影響CK-8 法檢測(cè)細(xì)胞存活率結(jié)果如圖 4,表 8 所示:與正常對(duì)照組比較,PC12 細(xì)胞存活率顯著降低;與模型組比較,木香油方揮發(fā)油(1,2組和尼莫地平組中細(xì)胞存活率顯著升高(p<0.01),且尼莫地平組與μg/mL)相當(dāng)。 8 木香油方揮發(fā)油對(duì) OGD/R 致 PC12 細(xì)胞存活率的影響( ±s,n=組別 濃度/μg/ml 存活率/%正常對(duì)照組 — 100±2.85模型組 — 47.18±0.19##尼莫地平組 5 81.34±8.85**木香油方揮發(fā)油組 4 93.42±7.23**2 81.50±3.47**
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]線粒體自噬在腦缺血再灌注損傷中的研究進(jìn)展[J]. 顏思陽,陳瑤,周德生,郭純,劉利娟. 醫(yī)學(xué)綜述. 2019(04)
[2]黃芪甲苷調(diào)控LC3/mTOR自噬通路在大鼠腦缺血再灌注損傷中的作用[J]. 史楠,張燕,李晉峰,金磊,張蔚,趙梅珍,羅崢,趙玫. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床. 2018(22)
[3]抑制大鼠腦缺血再灌注損傷中GSK-3β活性對(duì)自噬的影響及可能機(jī)制[J]. 汪悅婷,張?chǎng)?趙敬. 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(05)
[4]自噬參與氧糖剝奪對(duì)N2a細(xì)胞的損傷[J]. 諶雯琦,謝明. 中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志. 2018(05)
[5]氧化應(yīng)激、炎癥和自噬在腦缺血損傷中作用機(jī)制及治療策略[J]. 張思然,李成檀,楊怡,張麗慧. 中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2018(08)
[6]缺血/再灌注損傷的病理生理機(jī)制[J]. 刁長(zhǎng)會(huì),劉修恒. 醫(yī)學(xué)綜述. 2018(12)
[7]Puerarin protects rat brain against ischemia/reperfusion injury by suppressing autophagy via the AMPK-mT OR-ULK1 signaling pathway[J]. Jin-Feng Wang,Zhi-Gang Mei,Yang Fu,Song-Bai Yang,Shi-Zhong Zhang,Wei-Feng Huang,Li Xiong,Hua-Jun Zhou,Wei Tao,Zhi-Tao Feng. Neural Regeneration Research. 2018(06)
[8]腦缺血再灌注損傷后自噬機(jī)制及自噬相關(guān)信號(hào)通路的研究進(jìn)展[J]. 李燕則,郭永清,衛(wèi)建峰,鄭李娜. 中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥. 2018(12)
[9]mTOR信號(hào)介導(dǎo)的自噬在褪黑素減輕心臟缺血/再灌注損傷中的作用[J]. 徐臣年,呂濤,李聰葉,尉遲,閆浩東,林晨,孫冬冬,郭文怡. 心臟雜志. 2018(03)
[10]基于整合藥理學(xué)的中藥現(xiàn)代研究進(jìn)展[J]. 王萍,唐仕歡,蘇瑾,張佳琪,崔如意,許海玉,楊洪軍. 中國(guó)中藥雜志. 2018(07)
碩士論文
[1]淫羊藿次苷Ⅱ抗腦缺血再灌注損傷的作用及其機(jī)制研究[D]. 龍隆.遵義醫(yī)學(xué)院 2018
[2]白藜蘆醇通過增強(qiáng)Sirt-1誘導(dǎo)的自噬活性抑制NLRP3炎性復(fù)合體活化減輕腦缺血再灌注損傷[D]. 何琪.重慶醫(yī)科大學(xué) 2018
本文編號(hào):2897253
【文章來源】:寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
木香、胡椒和細(xì)辛治療腦卒中的候選靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)紅色代表候選藥物靶標(biāo);黃色代表已知疾病靶標(biāo);綠色代表普遍疾病靶標(biāo);灰色代表其他
寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 論文正文卒中至關(guān)重要,并提示我們?cè)谶M(jìn)行復(fù)方研究時(shí),抓住這些成分聚焦的核心通路,來進(jìn)行腦卒中發(fā)病機(jī)制研究。如圖 2 所示,與腦卒中發(fā)病相關(guān)的通路主要有神經(jīng)退行性疾病、雌激素信號(hào)通路、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子信號(hào)通路、GnRH 信號(hào)通路、細(xì)胞生長(zhǎng)和死亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子、神經(jīng)系統(tǒng)、甲狀腺激素信號(hào)傳導(dǎo)通路,內(nèi)分泌系統(tǒng)等。
圖 3 木香油方揮發(fā)油對(duì) PC12 細(xì)胞毒性的影響香油方揮發(fā)油對(duì) OGD/R 致 PC12 細(xì)胞損傷細(xì)胞存活率的影響CK-8 法檢測(cè)細(xì)胞存活率結(jié)果如圖 4,表 8 所示:與正常對(duì)照組比較,PC12 細(xì)胞存活率顯著降低;與模型組比較,木香油方揮發(fā)油(1,2組和尼莫地平組中細(xì)胞存活率顯著升高(p<0.01),且尼莫地平組與μg/mL)相當(dāng)。 8 木香油方揮發(fā)油對(duì) OGD/R 致 PC12 細(xì)胞存活率的影響( ±s,n=組別 濃度/μg/ml 存活率/%正常對(duì)照組 — 100±2.85模型組 — 47.18±0.19##尼莫地平組 5 81.34±8.85**木香油方揮發(fā)油組 4 93.42±7.23**2 81.50±3.47**
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]線粒體自噬在腦缺血再灌注損傷中的研究進(jìn)展[J]. 顏思陽,陳瑤,周德生,郭純,劉利娟. 醫(yī)學(xué)綜述. 2019(04)
[2]黃芪甲苷調(diào)控LC3/mTOR自噬通路在大鼠腦缺血再灌注損傷中的作用[J]. 史楠,張燕,李晉峰,金磊,張蔚,趙梅珍,羅崢,趙玫. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床. 2018(22)
[3]抑制大鼠腦缺血再灌注損傷中GSK-3β活性對(duì)自噬的影響及可能機(jī)制[J]. 汪悅婷,張?chǎng)?趙敬. 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(05)
[4]自噬參與氧糖剝奪對(duì)N2a細(xì)胞的損傷[J]. 諶雯琦,謝明. 中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志. 2018(05)
[5]氧化應(yīng)激、炎癥和自噬在腦缺血損傷中作用機(jī)制及治療策略[J]. 張思然,李成檀,楊怡,張麗慧. 中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2018(08)
[6]缺血/再灌注損傷的病理生理機(jī)制[J]. 刁長(zhǎng)會(huì),劉修恒. 醫(yī)學(xué)綜述. 2018(12)
[7]Puerarin protects rat brain against ischemia/reperfusion injury by suppressing autophagy via the AMPK-mT OR-ULK1 signaling pathway[J]. Jin-Feng Wang,Zhi-Gang Mei,Yang Fu,Song-Bai Yang,Shi-Zhong Zhang,Wei-Feng Huang,Li Xiong,Hua-Jun Zhou,Wei Tao,Zhi-Tao Feng. Neural Regeneration Research. 2018(06)
[8]腦缺血再灌注損傷后自噬機(jī)制及自噬相關(guān)信號(hào)通路的研究進(jìn)展[J]. 李燕則,郭永清,衛(wèi)建峰,鄭李娜. 中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥. 2018(12)
[9]mTOR信號(hào)介導(dǎo)的自噬在褪黑素減輕心臟缺血/再灌注損傷中的作用[J]. 徐臣年,呂濤,李聰葉,尉遲,閆浩東,林晨,孫冬冬,郭文怡. 心臟雜志. 2018(03)
[10]基于整合藥理學(xué)的中藥現(xiàn)代研究進(jìn)展[J]. 王萍,唐仕歡,蘇瑾,張佳琪,崔如意,許海玉,楊洪軍. 中國(guó)中藥雜志. 2018(07)
碩士論文
[1]淫羊藿次苷Ⅱ抗腦缺血再灌注損傷的作用及其機(jī)制研究[D]. 龍隆.遵義醫(yī)學(xué)院 2018
[2]白藜蘆醇通過增強(qiáng)Sirt-1誘導(dǎo)的自噬活性抑制NLRP3炎性復(fù)合體活化減輕腦缺血再灌注損傷[D]. 何琪.重慶醫(yī)科大學(xué) 2018
本文編號(hào):2897253
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