從滇產(chǎn)兩面針的干燥根中分離得到12個(gè)化合物,通過其一維或二維核磁共振譜、質(zhì)譜和理化性質(zhì)的解析并結(jié)合文獻(xiàn)鑒定了它們的結(jié)構(gòu),分別為9-去甲氧基兩面針堿(1)、8-dehydroxyl-buesgenine(2)、6β-hydroxymenthyldihydronitidine(3)、花椒木精(4)、rhoifoline B(5)、兩面針堿(6)、白屈菜紅堿(7)、博落回堿(8)、白鮮堿(9)、γ-崖椒堿(10)、茵芋堿(11)和鵝掌楸堿(12)。其中,化合物1和2為新結(jié)構(gòu)化合物。通過MTT法,首次評價(jià)了化合物1～12對黑色素瘤細(xì)胞WM9增殖的抑制活性,并發(fā)現(xiàn)化合物3和6對WM9細(xì)胞的增殖表現(xiàn)出較強(qiáng)的活性,半數(shù)抑制濃度(IC_(50))值分別為1.936μM和0.880μM,研究結(jié)果為抗腫瘤藥物候選藥物分子的發(fā)現(xiàn)提供了科學(xué)依據(jù)。
【部分圖文】：

化合物1～12的結(jié)構(gòu)如圖1所示(*標(biāo)示的是新化合物)�；衔�1 橘黃色固體,ESI-MS:m/z 341 [M + Na]+;對改良碘化鉍鉀顯色劑呈陽性反應(yīng),推測為含氮生物堿類化合物。根據(jù)1H NMR、13C NMR和DEPT譜可知該化合物有16個(gè)氫信號,20個(gè)碳信號,分別為C×9,CH×8,OCH2O×1,NCH3×1以及OCH3×1,根據(jù)以上核磁數(shù)據(jù)并結(jié)合質(zhì)譜信息可確定其分子式為C20H16NO3。通過對其1H NMR(如表1所示)的分析,可見結(jié)構(gòu)中存在三個(gè)芳香質(zhì)子信號δ 8.12(1H,s,H-4),7.61(1H,d,J=1.2,H-7)和7.54(1H,s,H-1);兩對苯環(huán)鄰位耦合的質(zhì)子信號δ 8.20(1H,dd,J=8.9,1.2 Hz,H-9)和8.59(1H,d,J=8.9 Hz,H-10),8.51(1H,d,J=9.1 Hz,H-11)和7.99(1H,d,J=9.1 Hz,H-12);一個(gè)亞甲二氧基質(zhì)子信號δ 6.29(2H,s,H-13);一個(gè)氮甲基質(zhì)子信號δ 5.03(3H,s,-NCH3);一個(gè)甲氧基質(zhì)子信號δ 4.30(3H,s,8-OCH3);單峰的質(zhì)子信號δ 9.90(1H,s,H-6)。以上核磁數(shù)據(jù)顯示化合物1應(yīng)該是一個(gè)苯駢菲啶型生物堿[8]。

經(jīng)文獻(xiàn)報(bào)道發(fā)現(xiàn),化合物1與文獻(xiàn) [11]報(bào)道的化合物6(兩面針堿)的核磁數(shù)據(jù)差別不大,主要的區(qū)別在于化合物1中C-9位的碳信號δC為131.8 ppm時(shí),化合物6的C-9位的碳信號δC是127.8 ppm,并且化合物1比化合物6少一個(gè)甲氧基,而其他位置的碳信號基本一致。根據(jù)HSQC譜進(jìn)一步分析可知,δH(8.20,dd,J=8.9,1.2,H-9)與δC(131.8,C-9)相關(guān),表明C-9位含有一個(gè)氫質(zhì)子,另外由HMBC相關(guān)譜(如圖2所示)可知,H-9(δH 8.20)與C-7(δC 126.9)和C-10a(δC 120.8)相關(guān),H-10(δH 8.59)與C-9(δC 131.8)相關(guān),由此可確定少的甲氧基在C-9位上;H-7(δH 7.61)與C-6(δC 150.2)和C-10a(δC 120.8)相關(guān),H-6(δH 9.90)與C-6a(δC 129.2),C-7(δC 126.9)和N-CH3(δC 62.3)相關(guān),由此可知C-7位不含甲氧基。綜上所述可鑒定化合物1為9-去甲氧基兩面針堿,經(jīng)查Scifinder數(shù)據(jù)庫確認(rèn)該化合物為一個(gè)新結(jié)構(gòu)化合物�；衔�2 紅色粉末,ESI-MS:m/z 336 [M + H]+;對改良碘化鉍鉀顯色劑呈陽性反應(yīng),推測為含氮生物堿類化合物。1H NMR、13C NMR和DEPT譜可知該化合物有17個(gè)氫信號,20個(gè)碳信號,分別為C×9,CH×8,OCH2O×1,NCH3×1以及OCH3×1,根據(jù)以上核磁數(shù)據(jù)可以確定其分子式為C20H17NO4。由1H NMR(如表2所示)譜分析,可見三個(gè)芳香質(zhì)子信號δ 7.12(1H,s,H-1),7.68(1H,s,H-4)和7.43(1H,d,J=4.9 Hz,H-8);兩對苯環(huán)鄰位耦合的質(zhì)子信號δ 7.74(1H,d,J=8.6 Hz,H-11)和7.47(1H,d,J=8.6 Hz,H-12),7.04(1H,d,J=8.5 Hz,H-9)和7.55(1H,d,J=8.5 Hz,H-10);一個(gè)亞甲二氧基質(zhì)子信號δ 6.07(2H,s,H-13);一個(gè)甲氧基質(zhì)子信號δ 3.96(3H,s,7-OCH3);氮甲基質(zhì)子信號δ 2.76(3H,s,N-CH3);一個(gè)單峰的質(zhì)子信號δ 5.52(1H,s,H-6)。以上核磁數(shù)據(jù)顯示化合物2應(yīng)該是二氫苯駢菲啶型生物堿[9]。

根據(jù)1H NMR和13C NMR(如表2所示)數(shù)據(jù)分析,化合物2(圖3)和文獻(xiàn)[10]中的已知化合物2′(buesgenine)相似(見圖3),除了C-8,C-9的碳信號不同外,其他碳信號基本一致。由1H NMR數(shù)據(jù)可知化合物2比化合物2′多了一個(gè)芳香質(zhì)子信號δH(7.43,d,J=4.9 Hz,H-8),分子量少了16,推測可能少一個(gè)酚羥基。根據(jù)HMBC相關(guān)譜(如圖3所示)進(jìn)一步分析可知,H-8(δH 7.43)與C-6a(δC 144.9),C-10a(δC 122.4)和C-7(δC 148.9)相關(guān),由此可推測C-8位上沒有取代基。另外,由于C-8缺少一個(gè)羥基,導(dǎo)致化合物2中C-9(δC 117.0)位的碳信號向高場偏移3個(gè)化學(xué)位移值。綜上所述可鑒定化合物2為8-dehydroxyl-buesgenine,經(jīng)查Scifinder數(shù)據(jù)庫確認(rèn)該化合物為一個(gè)新結(jié)構(gòu)化合物�；衔�1和2的詳細(xì)結(jié)構(gòu)鑒定數(shù)據(jù)原始圖譜可從本刊官網(wǎng)免費(fèi)下載(www.trcw.ac.cn)�；衔�3 淡黃色粉末(CHCl3);ESI-MS:m/z 380 [M + H]+。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ:7.69(1H,d,J=6.8 Hz,H-11),7.64(1H,s,H-4),7.52(1H,d,J=6.8 Hz,H-12),7.34(1H,s,H-10),7.13(1H,s,H-1),6.80(1H,s,H-7),6.06(2H,s,H-13),4.14(1H,m,H-6),4.00(3H,s,8-OCH3),3.96(3H,s,9-OCH3),3.45(1H,m,H14-a),3.15(1H,m,H14-b),2.74(3H,s,N-CH3);13C NMR(100 MHz,CDCl3)δ:149.0(C-8),149.0(C-9),148.5(C-3),147.5(C-2),137.8(C-4b),131.0(C-12a),127.0(C-4a),124.3(C-10a),124.3(C-12),124.0(C-6a),123.4(C-10b),119.5(C-11),110.5(C-7),106.3(C-10),104.6(C-1),101.1(C-13),99.8(C-4),65.3(C-6),62.8(C-14),56.1(8-OCH3),56.0(9-OCH3),42.7(N-CH3)。以上數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)報(bào)道一致[11],故鑒定化合物3為6β-hydroxymenthyldihydronitidine。
【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：2889342