目的研究石榴皮原花青素對(duì)變異鏈球菌UA159生物膜的形成及相關(guān)毒力基因表達(dá)的影響。方法選取變異鏈球菌UA159為實(shí)驗(yàn)菌株,分為石榴皮原花青素組、氯已定組和空白對(duì)照組。石榴皮原花青素組分別加入40,20,10,5,2.5 mg/ml的石榴皮原花青素培養(yǎng)48 h;氯已定組分別加入10,5,2.5,1.25,0.625 mg/ml的氯已定培養(yǎng)48 h;空白對(duì)照組不加任何處理培養(yǎng)48 h。采用甲基四氮鹽(XTT)減低法測(cè)定變異鏈球菌UA159的最小抑菌濃度(MIC)。瓊脂糖孔穴法測(cè)定變異鏈球菌UA159的抑菌環(huán)外徑。qP CR檢測(cè)變異鏈球菌UA159毒力基因luxS,gtfB,gbpD,brpA和ftf的mRNA表達(dá)。結(jié)果石榴皮原花青素對(duì)變異鏈球菌UA159的MIC值為10 mg/ml。石榴皮原花青素和氯己定的抑菌環(huán)外徑明顯大于空白對(duì)照組。10 mg/ml石榴皮原花青素能明顯抑制變異鏈球菌毒力基因luxS,gtfB,gbpD,brpA和ftf轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)(P 0.01)。10 mg/ml石榴皮原花青素和2.5 mg/ml氯己定對(duì)毒力基因luxS,gtfB,gbpD,brpA和ftf的抑制作用相當(dāng)。結(jié)論石榴皮原花青素能有效抑制變異鏈球菌UA159生物膜的形成和其毒力基因luxS,gtfB,gbpD,brpA和ftf轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)。
【部分圖文】：

隨著石榴皮原花青素和CHX藥物濃度的增加，吸光度值A(chǔ)值減小(見(jiàn)圖1)。10 mg/ml石榴皮原花青素和2.5 mg/ml CHX的吸光度A值都顯著減小，其抑制率顯著增強(qiáng)(見(jiàn)圖1)。石榴皮原花青素對(duì)變異鏈球菌的MIC為10 mg/ml，抑制率為91.9%;CHX對(duì)變異鏈球菌的MIC為2.5 mg/ml，抑制率為90.9%(見(jiàn)表2)。2.2 瓊脂糖孔穴擴(kuò)散法測(cè)定抑菌活性

根據(jù)石榴皮原花青素和CHX對(duì)變異鏈球菌UA159的MIC結(jié)果，選取5 mg/ml石榴皮原花青素、10 mg/ml石榴皮原花青素及2.5 mg/ml CHX分別作用變異鏈球菌UA159，檢測(cè)變異鏈球菌UA159毒力基因lux S,gtf B,gbp D,brp A和ftf的mRNA表達(dá)水平，10 mg/ml石榴皮原花青素和2.5 mg/ml CHX分別作用于變異鏈球菌UA159后，各毒力基因mR-NA的表達(dá)水平與空白對(duì)照組相比均顯著下調(diào)(P<0.01)。10 mg/ml石榴皮原花青素和2.5 mg/ml CHX對(duì)變異鏈球菌UA159毒力基因的mRNA表達(dá)水平無(wú)顯著差異(見(jiàn)圖3)。圖3 石榴皮原花青素和CHX對(duì)變異鏈球菌UA159毒力基因mRNA表達(dá)水平的影響

石榴皮原花青素和CHX對(duì)變異鏈球菌UA159毒力基因mRNA表達(dá)水平的影響
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