背景:藥物性肝損傷(drug-induced liver injury,DILI)是指在藥物使用過程中,因藥物本身或其代謝產(chǎn)物或藥物引發(fā)的過敏反應(yīng)所導(dǎo)致的肝臟損傷,亦稱藥物性肝病(drug-induced liver disease,DILD)。臨床上可表現(xiàn)為各種急慢性肝病,重者可能危及生命,需積極搶救治療。作為一種臨床上廣泛應(yīng)用的解熱鎮(zhèn)痛藥,對乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)所造成的急性肝損傷占據(jù)了藥物性肝損傷相當(dāng)大的比例,目前APAP過量使用和濫用引起的嚴重肝毒性問題已日益引起人們的關(guān)注。APAP誘導(dǎo)的肝損傷機制非常復(fù)雜,許多細胞內(nèi)和細胞外事件都參與其病理生理過程,包括APAP代謝,線粒體氧化應(yīng)激,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,自噬,無菌性炎癥,微循環(huán)功能障礙和肝再生。甲基蓮心堿(neferine,Nef)是天然藥物蓮子心的非水溶性總堿提取物,屬雙芐基異喹啉生物堿,具有抗炎抗氧化、抗纖維化、擴血管降血壓、抑制血小板聚集、抗心率失常以及抗腫瘤等多重作用。基于前期研究,我們發(fā)現(xiàn)甲基蓮心堿對肝纖維化大鼠肝臟具有保護作用,然而,Nef干預(yù)是否對APAP致肝損傷有保護作用,尚無相關(guān)研究。因此本課題旨在探討Nef是否在APAP肝損傷中發(fā)揮作用并研究其作用的相關(guān)機制。方法:(1)APAP致死劑量實驗C57BL/6雄性小鼠40只,隨機分為以下4組:(1)APAP+NS組,NS灌胃0.4ml,每日一次,n=10;(2)APAP+Nef(5)組,Nef混懸液5mg/kg灌胃0.4ml,每日一次,n=10;(3)APAP+Nef(10)組,Nef混懸液10mg/kg灌胃0.4ml,每日一次,n=10;(4)APAP+Nef(20)組,Nef混懸液20mg/kg灌胃0.4ml,每日一次,n=10。對各組小鼠連續(xù)灌胃Nef混懸液14天,末次灌胃0.5小時后,各組小鼠腹腔注射2.5%的APAP溶液600mg/kg。(2)APAP亞致死劑量下實驗C57BL/6雄性小鼠30只,隨機分為以下5組:(1)生理鹽水對照組(NS control):NS灌胃0.4ml,每日一次,n=6;(2)APAP+NS組,NS灌胃0.4ml,每日一次,n=6;(3)APAP+Nef(5)組,Nef混懸液5mg/kg灌胃0.4ml,每日一次,n=6;(4)APAP+Nef(10)組,Nef混懸液10mg/kg灌胃0.4ml,每日一次,n=6;(5)APAP+Nef(20)組,Nef混懸液20mg/kg灌胃0.4ml,每日一次,n=6。對小鼠連續(xù)灌胃Nef混懸液14天,末次灌胃0.5小時后,除NS control組外,其余各組小鼠腹腔注射2.5%的APAP溶液400mg/kg。結(jié)果:(1)Nef提高APAP致肝損傷小鼠5天生存率,APAP+Nef(20)組小鼠5天存活率高于APAP+NS組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)Nef降低APAP致肝損傷小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶水平,與APAP+NS組相比,APAP+Nef(10)組和APAP+Nef(20)組ALT和AST水平降低,且APAP+Nef(20)組低于APAP+Nef(10)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(3)Nef減輕APAP致肝損傷小鼠組織病理改變,HE染色結(jié)果顯示與APAP+NS組相比,APAP+Nef(10)組和APAP+Nef(20)組的肝小葉壞死、脂肪浸潤及淋巴細胞浸潤程度明顯減輕,并且在APAP+Nef(20)組,上述各項改善比APAP+Nef(10)組更明顯,組織學(xué)評分結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(4)Nef抑制APAP致肝損傷小鼠炎癥因子的表達,與APAP+NS組相比,APAP+Nef(10)組和APAP+Nef(20)組TNF-α、IL-6表達降低,且APAP+Nef(20)組低于APAP+Nef(10)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(5)Nef抑制APAP致肝損傷小鼠肝細胞凋亡,與APAP+NS組相比,APAP+Nef(10)組和APAP+Nef(20)組肝細胞凋亡比例降低,且APAP+Nef(20)組低于APAP+Nef(10)組,凋亡細胞百分比結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(6)Nef降低APAP致肝損傷小鼠氧化應(yīng)激水平,Nef可以減少機體ROS的產(chǎn)生,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);Nef減輕了MDA對機體細胞的損傷,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);Nef提高了機體的抗氧自由基的能力,SOD、GSH、GSH-px的表達水平升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(7)Nef可以上調(diào)Nrf2/HO-1/NQO1通路蛋白表達,與APAP+NS組相比,APAP+Nef(10)組和APAP+Nef(20)組Nrf2、HO-1、NQO1的蛋白表達量均升高,而且APAP+Nef(20)組相比APAP+Nef(10)組蛋白表達升高的更明顯,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:研究結(jié)果表明Nef在APAP誘導(dǎo)的肝臟毒性損傷中起到了預(yù)防和治療的作用,這可能主要因為Nef強大的抗氧化能力,阻斷ROS進程,抑制氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化,上調(diào)Nrf2/HO-1/NQO1抗氧化通路蛋白的表達、減輕肝細胞壞死、減輕炎癥因子表達,從而發(fā)揮Nef對對乙酰氨基酚所致肝損傷的保護作用。本研究可為APAP肝損傷的治療提供新的策略,為Nef在APAP誘導(dǎo)的肝損傷中的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。
【學(xué)位單位】：陜西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

藥物性肝損傷的機制示意圖

圖 1-2 藥物與 HLA 分子相互作用導(dǎo)致適應(yīng)性免疫反應(yīng)（Kullak-Ublick et al.Gut, 2017, 66(6): 1154-64.）1.3 中醫(yī)對藥物性肝損傷的認識藥物性肝損傷歸屬于中醫(yī)學(xué)“脅痛”“黃疸”“積聚”“藥物毒”等范疇。在大量應(yīng)用天然藥物的經(jīng)驗積累中，中醫(yī)在臨床實踐中積累了豐富的藥物性損傷的經(jīng)驗，并提出了應(yīng)對損傷的方法�！墩f文》有云：毒，厚也，害人之草，往往而生。其意本為草中某些對人體有害的化學(xué)成份。而《廣韻·沃韻》中又作引申：毒者，害也。從文字上的梳理不難得出先民對“毒”字的引證與理解。自此毒由本意擴展為一切對人體有害之物�！渡袝分小八幉活ㄑ�，厥劑弗廖”的記述，反映了我國先民對天然藥物毒性反應(yīng)與安全劑量的認識與記錄。而在中醫(yī)四大經(jīng)典名著《金匱要略》中，仲景錦心素手的于全書最后另附一章專篇討論誤食毒性食物、藥物后的解救方法。在方劑的配伍應(yīng)用上，高明醫(yī)家常配伍佐、使之藥，用來減輕某些藥物的毒副作用。藥物本為救人所用，但是當(dāng)劑量超出病患所能承受的范圍時則往往出現(xiàn)中醫(yī)所謂的“瞑眩反應(yīng)”。因天然藥物各有

圖2-1 APAP代謝及影響其毒性的潛在因素(Bunchorntavakul, C. et.al. Clinics in Liver Disease, 2013. 17(4): p. 587-607)2.2 對乙酰氨基酚的發(fā)病機制關(guān)于 APAP 肝毒性的機制研究始于 1973 年，Mitchell 等人發(fā)現(xiàn) APAP 在肝細胞內(nèi)被代謝為一種物質(zhì)，該物質(zhì)能夠消耗 GSH 并可與細胞內(nèi)其他重要蛋白共價結(jié)合進而造成細胞損傷，這種物質(zhì)后來被人們鑒定出來即為 N-乙酰-對-苯醌亞胺 NAPQI[25]。同時隨著對細胞色素氧化酶(P450)研究的不斷深入，人們發(fā)現(xiàn) P450 活化的過程有大量活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)和活性氮簇(reactive nitrogen species，RNS)的大量釋放，于是有學(xué)者提出可能是 APAP 代謝過程中產(chǎn)生的大量 ROS 和 RNS 造成了脂質(zhì)過氧化而引發(fā)了細胞損傷。近年來，炎性因子、多種信號通路的激活等更多的機制被提出[24]，現(xiàn)作一簡單的歸納總結(jié)（圖 2-2）。
【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃蓓;;國家藥監(jiān)局發(fā)文指導(dǎo)中藥肝損傷評價[J];中醫(yī)藥導(dǎo)報;2018年14期

2 ;中藥藥源性肝損傷臨床評價技術(shù)指導(dǎo)原則[J];臨床肝膽病雜志;2018年07期

3 肖小河;唐健元;茅益民;李秀惠;王伽伯;劉成海;孫克偉;葉永安;鄒正升;彭成;楊凌;郭玉明;柏兆方;何婷婷;景婧;李豐衣;安娜;;中藥藥源性肝損傷臨床評價技術(shù)指導(dǎo)原則[J];藥學(xué)學(xué)報;2018年11期

4 劉昌孝;;中草藥肝損傷的科學(xué)認知和評價[J];藥學(xué)學(xué)報;2017年07期

5 郭代紅;蘇暢;王嘯宇;朱曼;田曉燕;胡鵬洲;賈王平;趙粟裕;寇煒;;住院患者藥源性肝損傷的信息化自動監(jiān)測研究與實踐[J];中國醫(yī)院用藥評價與分析;2017年08期

6 石振東;;中草藥相關(guān)肝損傷的發(fā)病機制、臨床特點和防治策略[J];中國現(xiàn)代醫(yī)藥雜志;2017年10期

7 趙國榮;陳研焰;毛婭男;王志明;戴玉微;崔玉暉;;肝脾理論與腸源性內(nèi)毒素血癥肝損傷的相關(guān)性[J];中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志;2016年02期

8 楊友生;瞿祥春;尚兵;胡松;;103例創(chuàng)傷性肝損傷患者的臨床分析、診斷與治療體會[J];肝膽外科雜志;2015年04期

9 張林林;;熊脫氧膽酸對實驗性肝損傷模型的研究進展[J];現(xiàn)代養(yǎng)生;2016年24期

10 ;仙靈骨葆口服制劑或致肝損傷[J];家庭醫(yī)藥.就醫(yī)選藥;2017年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王陽陽;小檗堿對刀豆蛋白A誘導(dǎo)的肝損傷的保護作用及其分子機制的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2018年

2 王華峰;脂聯(lián)素活性肽ADP355與中藥單體Embelin的肝損傷保護研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

3 屈蒙蒙;肝損傷過程中骨髓來源間充質(zhì)干細胞對NK細胞的免疫調(diào)節(jié)作用[D];武漢大學(xué);2017年

4 賈文俊;肝臟特異性Ggps1敲除通過激活FXR介導(dǎo)膽汁酸排泄改善梗阻性黃疸肝損傷[D];南京大學(xué);2017年

5 何婷婷;基于整合證據(jù)鏈的中草藥相關(guān)肝損傷診斷方法的應(yīng)用評價[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2017年

6 馬齊襄;實時檢測藥物肝損傷過程中氧化應(yīng)激反應(yīng)的可視化小鼠模型的建立[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2018年

7 歐莉;基于不同腎虛證候的何首烏致肝損傷機制研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2016年

8 林艷萍;應(yīng)用基于質(zhì)譜技術(shù)的代謝組學(xué)研究肝損傷標(biāo)志物[D];天津大學(xué);2009年

9 吳宇;藥物性肝損傷體外篩選模型和何首烏致肝損傷的初步研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

10 萬小華;銅過量導(dǎo)致的肝損傷及姜黃素的保護作用[D];華中科技大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 凌蕾;羅格列酮誘導(dǎo)小鼠肝臟損傷機制的代謝組學(xué)研究[D];遵義醫(yī)科大學(xué);2019年

2 李世月;基于Nrf2抗氧化信號通路探討金釵石斛總生物堿對CCl_4致肝損傷的保護作用及其機制[D];遵義醫(yī)科大學(xué);2019年

3 周欣;基于何首烏炮制“時-效-毒”變化規(guī)律的肝損傷機制及物質(zhì)基礎(chǔ)研究[D];陜西中醫(yī)藥大學(xué);2019年

4 馮陽;甲基蓮心堿對對乙酰氨基酚所致肝損傷的保護作用及機制研究[D];陜西中醫(yī)藥大學(xué);2019年

5 盧曉華;TNF家族分子LIGHT在TLR3誘導(dǎo)的肝損傷中的作用及其分子機制[D];西北師范大學(xué);2016年

6 廉桂芳;魷魚肝臟魚油抗衰老及預(yù)防肝損傷功能評價[D];西南大學(xué);2018年

7 羅亞娟;蜂王漿干預(yù)CCl_4誘導(dǎo)的肝損傷大鼠模型的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2015年

8 葉翠萍;藏藥渣馴對小鼠實驗性肝損傷的保護作用及機制研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2017年

9 劉陽;地鱉肽提取純化及對肝損傷小鼠的保護作用及機理的研究[D];北京農(nóng)學(xué)院;2018年

10 蔣秀慧;回顧性分析61例膿毒癥肝損傷患者的臨床特點及預(yù)后[D];中國醫(yī)科大學(xué);2018年

本文編號：2886354