【目的】觀察消癖顆粒單藥及聯(lián)合他莫昔芬對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖、遷移、克隆、凋亡及細(xì)胞內(nèi)DNA損傷程度的影響,探討消癖顆粒與他莫昔芬的協(xié)同抗癌作用�！痉椒ā窟x取雌激素受體(ER)+、孕激素受體(PR)+人源乳腺癌細(xì)胞MCF-7和T47D,將消癖顆粒、他莫昔芬單藥或聯(lián)合用藥加入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MCF-7和T47D細(xì)胞中,以不加藥同期培養(yǎng)的細(xì)胞作為空白組。分別采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法、乳酸脫氫酶(LDH)實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)、劃痕實(shí)驗(yàn)、球囊形成實(shí)驗(yàn)、平板克隆實(shí)驗(yàn)及原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)標(biāo)記法(TUNEL)和Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)雙染色法檢測(cè)干預(yù)后乳腺癌細(xì)胞MCF-7和T47D的生物學(xué)表現(xiàn)�！窘Y(jié)果】消癖顆粒、他莫昔芬單藥或聯(lián)合用藥均有抑制乳腺癌細(xì)胞MCF-7和T47D增殖的作用,呈濃度依賴(lài)性,且聯(lián)合用藥組抑制率高于單藥組(P0.05)。與消癖顆粒、他莫昔芬單藥比較,聯(lián)合用藥顯著抑制乳腺癌細(xì)胞MCF-7和T47D球囊形成、克隆及遷移能力(P0.05),且能促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)8-OHdG生成增多(P0.05),導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)DNA氧化損傷,最后誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡。消癖顆粒和他莫昔芬單藥或聯(lián)合用藥均可顯著增加MCF-7和T47D細(xì)胞凋亡率,且聯(lián)合用藥組凋亡細(xì)胞率明顯高于單藥組(P0.05)�！窘Y(jié)論】消癖顆粒和他莫昔芬單藥或聯(lián)合用藥可抑制MCF-7和T47D細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡,且聯(lián)合用藥可增強(qiáng)癌細(xì)胞對(duì)他莫昔芬的敏感性,效果優(yōu)于單藥作用。
【部分圖文】：

圖9結(jié)果顯示，相同的劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)，空白組的劃痕空間隨著細(xì)胞的生長(zhǎng)距離逐漸變短，而消癖顆粒組、他莫昔芬組、聯(lián)合用藥組細(xì)胞向劃痕空間的生長(zhǎng)速度顯著低于空白組，距離相較于空白組稍寬（P<0.05），其中，聯(lián)合用藥組細(xì)胞遷移能力明顯減弱（P<0.05）。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，消癖顆粒對(duì)乳腺癌MCF-7和T47D細(xì)胞的遷移侵襲能力有顯著影響，并且可以顯著提高他莫昔芬對(duì)乳腺癌細(xì)胞遷移侵襲能力的抑制作用。2.6 消癖顆粒、他莫昔芬單藥及聯(lián)合用藥對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7和T47D克隆能力的影響

將消癖顆粒聯(lián)合他莫昔芬（10μmol/L）干預(yù)細(xì)胞。從圖2結(jié)果可知，聯(lián)合用藥組細(xì)胞增殖抑制率優(yōu)于消癖顆粒單藥組，各組間細(xì)胞增殖抑制率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。消癖顆粒聯(lián)合用藥的最佳濃度中：MCF-7,800μg/m L;T47D,600μg/m L。消癖顆粒組、他莫昔芬組、聯(lián)合用藥組24 h的細(xì)胞存活率較空白組明顯降低（P<0.05），且聯(lián)合用藥組細(xì)胞存活率低于他莫昔芬組和消癖顆粒組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），消癖顆粒組和他莫昔芬組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。提示消癖顆粒與他莫昔芬聯(lián)合用藥對(duì)乳腺癌細(xì)胞的抑制作用明顯優(yōu)于消癖顆�；蛩舴覇斡谩D2 消癖顆粒聯(lián)合他莫昔芬對(duì)MCF-7和T47D細(xì)胞存活率的影響（±s,n=3)

圖4結(jié)果顯示：與空白組比較，消癖顆粒組、他莫昔芬組、聯(lián)合用藥組細(xì)胞內(nèi)8-OHd G的含量均明顯升高（P<0.05），分別上升至空白組的2.40倍、2.80倍和3.60倍。表明消癖顆粒和他莫昔芬均能促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞MCF-7和T47D中8-OHd G的含量增加，增加氧化損傷誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，且消癖顆粒能增強(qiáng)他莫昔芬誘導(dǎo)氧化損傷的作用。2.3 消癖顆粒、他莫昔芬單藥及聯(lián)合用藥對(duì)乳腺癌細(xì)胞球囊形成的影響
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