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溫腎固疏方調(diào)節(jié)組織蛋白酶K表達(dá)影響絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-11-13 07:03
   目的:觀察溫腎固疏方對去卵巢大鼠破骨細(xì)胞Cath K表達(dá)及骨組織C0l I的影響,探討溫腎固疏方治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的作用機(jī)制。方法:通過切除大鼠雙側(cè)卵巢建立絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松大鼠模型。造模后,將30只SD大鼠隨機(jī)分為模型組、雌激素組、溫腎固疏方高、中、低劑量組,每組6只。假手術(shù)組僅切除卵巢旁脂肪組織。溫腎固疏方高劑量組:[21.21g生藥/(kg·d)];中劑量組:[l0.605g生藥/(kg·d)];低劑量組:[5.3025 g生藥/(kg·d)]。雌激素組:戊酸雌二醇[10 μ g/(kg·d)]。模型組和假手術(shù)組均給予生理鹽水0.5 ml/100g灌胃。各組均連續(xù)干預(yù)2個(gè)月。HE染色觀察骨組織形態(tài);ELISA法測定血清PICP、ICTP、CTX、NTX的含量;免疫組化法測定骨組織ColI、Cath K表達(dá)率的變化。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,模型組大鼠骨小梁稀疏、斷裂,符合骨質(zhì)形態(tài)學(xué)破壞表現(xiàn)。各干預(yù)組大鼠骨小梁結(jié)構(gòu)有所恢復(fù),對抗骨質(zhì)破壞效果顯著,且中藥組療效與劑量相關(guān),高劑量組療效優(yōu)于中、低劑量組。與假手術(shù)組相比較,模型組血清ICTP、NTX、CTX明顯升高(P0.01),而PICP含量雖降低,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與模型組相比較,雌激素組血清ICTP、NTX、CTX明顯降低(P0.01),PICP含量升高,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;溫腎固疏方低劑量組血清ICTP、NTX含量降低(P0.01),CTX含量降低(P=0.05),PICP含量升高,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;中藥溫腎固疏方高、中劑量組血清ICTP、NTX、CTX顯著降低(P0.01),PICP含量明顯升高(P0.01)。假手術(shù)組相比,模型組大鼠骨組織中ColI表達(dá)降低(P0.01),Cath K蛋白表達(dá)明顯增多(P0.01);與模型組相比,中藥溫腎固疏方組和雌激素組骨組織ColI蛋白表達(dá)升高(P0.01),Cath K蛋白表達(dá)顯著減少(P0.01)。結(jié)論:1.溫腎固疏方可以從形態(tài)學(xué)方面有效地改善PMOP模型大鼠的骨質(zhì)疏松狀態(tài)。2.溫腎固疏方治療PMOP可能是通過下調(diào)破骨細(xì)胞Cath K表達(dá),抑制骨組織ColⅠ分解而實(shí)現(xiàn)的。
【學(xué)位單位】:南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:R285.5
【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一部分 理論研究
    1. 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對PMOP的認(rèn)識
        1.1 PMOP的病因及發(fā)病機(jī)制
        1.2 PMOP的西藥治療
    2. 中醫(yī)學(xué)對PMOP的認(rèn)識
        2.1 中醫(yī)病名
        2.2 病因病機(jī)
        2.3 中醫(yī)治療
    3. Cath K與骨質(zhì)疏松癥
        3.1 Cath K是治療PMOP的新靶點(diǎn)
        3.2 抑制Cath K的過度表達(dá)治療PMOP
    4. 溫腎固疏方治療PMOP的內(nèi)涵
第二部分 實(shí)驗(yàn)研究
    1. 實(shí)驗(yàn)材料及儀器
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 藥物及試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 動(dòng)物造模
        2.2 分組及干預(yù)
        2.3 動(dòng)物處理及標(biāo)本采集
        2.4 指標(biāo)檢測
    3. 數(shù)據(jù)處理
    4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 骨組織形態(tài)學(xué)觀察
        4.2 血清骨轉(zhuǎn)化指標(biāo)PICP、ICTP、NTX和CTX的測定
        4.3 溫腎固疏方對Col I蛋白表達(dá)的影響
        4.4 溫腎固疏方對Cath K蛋白表達(dá)的影響
第三部分 討論與分析
    1. 動(dòng)物模型選擇
    2. 觀察指標(biāo)的選擇
    3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
        3.1 溫腎固疏方對骨組織形態(tài)的影響
        3.2 溫腎固疏方對血清骨轉(zhuǎn)化指標(biāo)PICP、ICTP、NTX和CTX的影響
        3.3 溫腎固疏方對Col I蛋白表達(dá)的影響
        3.4 溫腎固疏方對Cath K蛋白表達(dá)的影響
    4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)論
第四部分 結(jié)語
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果
致謝

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本文編號:2881893

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