目的:青刺果油具有悠久的藥用歷史,摩梭人最早將青刺果油從青刺果中提取并用于保健和食用[1]。青刺果油又稱為“青娜曼安”或“青娜油”,摩梭人認(rèn)為長期食用青刺果油能給他們帶來健康、長壽和美麗[2]。由此可見,青刺果油具有較高的藥用保健價(jià)值,青刺果已在云南地區(qū)有大量的種植,但是由于對(duì)其保健功能和制劑研究較少,目前青刺果在醫(yī)療保健領(lǐng)域具有較大的開發(fā)潛力。本文就青刺果油的藥理作用和制劑研究進(jìn)行探討,為青刺果油的產(chǎn)業(yè)化提供研究基礎(chǔ)。本文通過以下幾個(gè)方面開展研究:(1)檢測青刺果油的理化指標(biāo)及進(jìn)行成分分析,建立GC內(nèi)標(biāo)法測定青刺果油中4種脂肪酸的含量,測定不同提取時(shí)段的脂肪酸含量差異;(2)研究青刺果油體外抑制多種腫瘤細(xì)胞的增殖作用及基于斑馬魚模型的發(fā)育毒性試驗(yàn);(3)以阿拉伯膠和麥芽糊精為包埋壁材,噴霧干燥法制備青刺果油微囊,通過單因素及正交試驗(yàn)優(yōu)化微囊的制備工藝,對(duì)最佳制備工藝的青刺果油微囊進(jìn)行表征;(4)初步考察青刺果油及其微囊的穩(wěn)定性。方法:(1)通過超臨界CO2流體萃取法提取青刺果油,以2015年《中國藥典》0713通則和0622通則的方法檢測青刺果油的理化指標(biāo),包括碘值、酸值、過氧化值、皂化值以及折光指數(shù),考察青刺果油的品質(zhì)。此外,采用GC/MS法分析青刺果油的脂肪酸和不皂化物組成,以此為基礎(chǔ),建立GC內(nèi)標(biāo)法同時(shí)測定超臨界CO2流體不同萃取時(shí)段青刺果油中硬脂酸、棕櫚酸、油酸和亞油酸的含量。(2)通過MTT比色法考察青刺果油對(duì)結(jié)腸癌SW480細(xì)胞、乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7細(xì)胞、膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞、肝癌Hep G2細(xì)胞、前列腺癌PC-3細(xì)胞的抑制作用;此外,以斑馬魚為模型,考察青刺果油對(duì)斑馬魚胚胎的體內(nèi)發(fā)育毒性試驗(yàn)。(3)為了提高青刺果油的穩(wěn)定性,以麥芽糊精和阿拉伯膠作為壁材,將青刺果油通過高速剪切分散機(jī)和高壓均質(zhì)機(jī)制備成穩(wěn)定均一的乳狀液,最后噴霧干燥成為微囊。以包埋率為考察指標(biāo),采用單因素及正交試驗(yàn)優(yōu)化噴霧干燥的制備工藝。對(duì)青刺果油微囊進(jìn)行感官評(píng)價(jià)、紅外光譜掃描分析、光學(xué)顯微鏡和掃描電鏡觀察,并測定其松密度和振實(shí)密度、休止角、水分含量、粒徑大小,評(píng)價(jià)青刺果油微囊的質(zhì)量。(4)最后,考察了青刺果油微囊的影響因素試驗(yàn),加速穩(wěn)定性試驗(yàn)和長期穩(wěn)定性試驗(yàn)。結(jié)果:(1)采用超臨界CO2流體萃取法提取青刺果油,得油率為31.13%。檢測其各項(xiàng)理化指標(biāo)如下:酸值為0.86 mg KOH/g,碘值為101.7 g I/100g,皂化值為190.3 mg KOH/g,折光指數(shù)為1.4630,過氧化值為2.20 g/100g。GC/MS法分析青刺果油中的脂肪酸組成,面積歸一化法測得的脂肪酸種類及相對(duì)含量分別為:棕櫚酸16.24%,棕櫚油酸0.30%,硬脂酸8.60%,順-油酸38.34%,順-亞油酸34.73%,花生酸0.63%,順-亞麻酸1.16%,反式脂肪酸0.10%。GC/MS法分析青刺果油中的不皂化物,面積歸一化法測得的不皂化物種類及相對(duì)含量分別為:β-谷甾醇為53.19%,巖藻甾醇為14.43%,環(huán)阿屯醇為10.46%,2,4-亞甲基環(huán)阿屯醇為8.63%,豆甾醇為8.03%,菜油甾醇為3.71%,角鯊烯為1.55%。超臨界CO2流體萃取法所提取的青刺果油品質(zhì)良好,不飽和脂肪酸含量較高,提取效率高,提取方法綠色友好、不產(chǎn)生有機(jī)試劑廢棄物。(2)以苯甲酸苯酯作為內(nèi)標(biāo)物,建立了GC內(nèi)標(biāo)法同時(shí)測定青刺果油中棕櫚酸、硬脂酸、油酸和亞油酸的含有量,方法學(xué)考察表明該方法操作簡便、可行。此外,考察超臨界CO2流體萃取不同時(shí)段提取的青刺果油中脂肪酸含量的差異,在1.0~1.5 h收集的青刺果油,脂肪酸含量最高的是亞油酸348.05 mg·g-1;在1.5~2.0 h收集的青刺果油,脂肪酸含量最高的是油酸341.79 mg·g-1;在2.0~2.5 h收集的青刺果油,油酸和亞油酸含量均低于其他時(shí)段。(3)采用MTT比色法評(píng)價(jià)青刺果油對(duì)SW480結(jié)腸癌細(xì)胞的抑制效果,得到IC50為238.7μg/m L。此外,以斑馬魚模型評(píng)價(jià)青刺果油的體內(nèi)發(fā)育毒性,當(dāng)給藥濃度小于600μg/m L時(shí),青刺果油對(duì)斑馬魚胚胎具有低致畸性、低致死性及良好的孵化率。(4)通過正交試驗(yàn),得到最佳的青刺果油微囊制備工藝:復(fù)合壁材/青刺果油比例為2/1,進(jìn)樣速度為4 g/min,進(jìn)風(fēng)溫度為170℃,霧化壓力為5×103 KPa,固形物含量為5%,剪切速度為6000 rpm。最佳制備工藝的青刺果油微囊包埋率為微囊包埋率為90.85±1.42%,對(duì)青刺果油微囊進(jìn)行表征,微囊為無特殊氣味且具有良好水分散性的淡黃色固體粉末;松密度和振實(shí)密度分別為0.283g/m L和0.417 g/m L,休止角為40.2°。光學(xué)顯微鏡下的青刺果油微囊,粒徑為2μm~4μm;掃描電鏡下的青刺果油微囊具有球體結(jié)構(gòu),顆粒較為飽滿且囊壁表面光滑,無明顯裂縫和孔洞,但壁材有少量的粘附結(jié)塊。激光粒度分析微囊的平均粒徑為0.949μm,PDI=0.274,D90=2.063μm,傅里葉紅外光譜分析初步確定青刺果油微囊的形成。(5)青刺果油在高溫試驗(yàn)10天后過氧化值升至1.734 g/100g,約為高溫試驗(yàn)前青刺果油過氧化值的62倍;而微囊在高溫試驗(yàn)10天后過氧化值升至0.613 g/100g,約為高溫試驗(yàn)前微囊過氧化值的13倍。青刺果油在強(qiáng)光照10天后過氧化值升至0.304 g/100g,約為光照試驗(yàn)前青刺果油過氧化值的11倍;而微囊在強(qiáng)光照10天后過氧化值升至0.103 g/100g,約為光照試驗(yàn)前青刺果油過氧化值的2倍。青刺果油在高濕環(huán)境10天后過氧化值幾乎不變;而微囊在高濕環(huán)境10天后吸濕增重6.50%,并凝結(jié)成塊狀,由淡黃色變深黃色,過氧化值約為高濕試驗(yàn)前微囊過氧化值的3倍。加速穩(wěn)定性試驗(yàn)3個(gè)月后,微囊的外觀性狀均無明顯變化,過氧化值最大值為0.288 g/100g,與試驗(yàn)前微囊的過氧化值相比有所上升;長期穩(wěn)定性試驗(yàn)6個(gè)月后,微囊的外觀性狀均無明顯變化,過氧化值最大值為0.138 g/100g,約為試驗(yàn)前微囊過氧化值的2.8倍。結(jié)論:本研究基于超臨界CO2流體萃取的青刺果油,研究了其理化性質(zhì)、脂肪酸和不皂化物的組分分析,建立了GC內(nèi)標(biāo)法同時(shí)測定青刺果油4種主要脂肪酸的含量,方法學(xué)研究表明該方法穩(wěn)定準(zhǔn)確,為控制青刺果油提供更完善的質(zhì)量控制方法。通過考察體外的抗腫瘤活性考察和斑馬魚體內(nèi)的發(fā)育毒性試驗(yàn),為青刺果油的進(jìn)一步開發(fā)提供研究基礎(chǔ)。最后,通過噴霧干燥法優(yōu)化制備青刺果油微囊,提高了青刺果油在貯藏和運(yùn)輸?shù)姆�(wěn)定性,拓寬青刺果油的產(chǎn)品開發(fā)路線。
【學(xué)位單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R284;R283.6
【部分圖文】：

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文第一章 前言概述Prinsepia utilis Royle）屬薔薇科(Rosaecae)扁核木屬(Prin南部（云南、貴州、四川等省區(qū)）和印度[3,4]，如圖 1-1 ：“青刺果性微寒，味苦。功一切瘡毒癰疽，有膿出頭，無用酒服”[5]。文獻(xiàn)報(bào)道青刺果油在中國和印度的民間醫(yī)學(xué)麻風(fēng)病、關(guān)節(jié)炎和其它骨骼疾病等[6]。

2-1 青刺果油脂肪酸的總離子流圖：(1)棕櫚酸；（2）棕櫚油酸；(3)硬脂酸；(4)順?biāo)幔?5)順-亞油酸；(6)花生酸；(7)順-亞麻酸ig.2-1 TIC profile of fatty acid composition in Prinsepia utilis Royle oil: (1) Palmitic acid)Palmitoleic acid, (3)Octadecanoic acid, (4)Cis-oleic acid, (5)Cis-linoleic acid, (6)Arachacid；（7）Cis-linolenic acid表 2-2 青刺果油的脂肪酸組成及相對(duì)含量Tab. 2-2 Fatty acid composition and relative content of Prinsepia utilis Royle oil留時(shí)間/min 中文名稱 英文名稱 簡稱 相對(duì)含量/%11.501 棕櫚酸 Palmitic acid C16:0 16.2412.023 棕櫚油酸 Palmitoleic acid C16:1 0.3013.020 硬脂酸 Stearic acid C18:0 8.6013.598 順-油酸 Cis-oleic acid C18:1 38.3414.482 順-亞油酸 Cis-linoleic acid C18:2 34.7314.910 花生酸 Arachidic acid C20:0 0.6315.625 順-亞麻酸 Cis-linolenic acid C18:3 1.16

圖 2-2 青刺果油不皂化物的總離子流圖：（1）角鯊烯；（2）菜油甾醇；（3）豆甾醇；（4β-谷甾醇；（5）巖藻甾醇；（6）環(huán)阿屯醇；（7）2,4-亞甲基環(huán)阿屯醇Fig.2-2 TIC profile of unsaponifiable matter composition in Prinsepia utilis Royle oil:(1)Squalene,(2) Campesterol,(3) Stigmasterol,(4) β-Sitosterol，(5) Fucosterol，(6) Cycloarten（7）2；4-methylenecycloartenol表 2-3 青刺果油的植物甾醇組成及相對(duì)含量Tab.2-3 Composition and relative content of unsaponifiable matter of Prinsepia utilis Royle oi保留時(shí)間/min 不皂化物名稱 相對(duì)含量/%10.41 角鯊烯 1.5514.51 菜油甾醇 3.7114.91 豆甾醇 8.0315.75β-谷甾醇 53.1916.00 巖藻甾醇 14.4317.00 環(huán)阿屯醇 10.4618.09 2,4-亞甲基環(huán)阿屯醇 8.63
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 和麗媛;王玲;呂俊梅;;青刺果油研究進(jìn)展[J];糧食科技與經(jīng)濟(jì);2019年07期

2 溫文忠;黃燦;藍(lán)藝珺;陶宇;周戟;;影響青刺果油過氧化值因素的研究[J];日用化學(xué)工業(yè);2015年03期

3 張蕾;;青刺果油的保濕性研究[J];日用化學(xué)品科學(xué);2008年10期

4 張曉鵬,林曉明;青刺果油調(diào)節(jié)血脂及對(duì)人血小板體外聚集作用的影響[J];衛(wèi)生研究;2005年01期

5 端木凡林,陰景喜,閆開明,李林開,梁煜東;天然青刺果油低溫萃取及其保健功能[J];糧食與油脂;2001年06期

6 端木凡林,王紅梅,常煥平,李林開,梁煜東;天然青刺果油的低溫萃取及其營養(yǎng)價(jià)值[J];西部糧油科技;2001年06期

7 夏海梅;何鵬飛;李艷萍;劉因華;趙遠(yuǎn);周志宏;;青刺果油生物活性及應(yīng)用研究概況[J];云南中醫(yī)中藥雜志;2018年12期

8 楊金;楊澤偉;易平;黃篤樹;閔勇;劉衛(wèi);;青刺果油中脂肪酸的組成分析[J];紅河學(xué)院學(xué)報(bào);2012年04期

9 張春筍;古松;張榮先;宋昭彬;孫群;;青刺果油對(duì)大鼠脂代謝的藥理研究[J];食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào);2006年05期

10 何佳玲;劉招娣;王犇;徐娟;;青刺果油脂肪酸組成及儲(chǔ)存穩(wěn)定性研究[J];糧食與油脂;2017年11期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前6條

1 彭炳新;青刺果油的成分分析及其微囊化的研究[D];廣東藥科大學(xué);2019年

2 羅程佳;青刺果油體外抑制前列腺癌細(xì)胞增殖的初步研究[D];廣東藥科大學(xué);2016年

3 張春筍;復(fù)方鱉甲軟肝針劑對(duì)肝硬化預(yù)防和治療作用及青刺果油降脂作用的研究[D];四川大學(xué);2007年

4 劉付華;含馬齒莧、青刺果油、透明質(zhì)酸復(fù)合劑對(duì)特應(yīng)性皮炎作用的實(shí)驗(yàn)和臨床研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2013年

5 陳姍;以冬凌草提取物為主成分的局部抗菌外用藥的研究[D];河南科技大學(xué);2013年

6 陳鵬;四種植物油及其生物柴油脂肪酸組成性質(zhì)的比較研究[D];四川大學(xué);2007年

本文編號(hào)：2875618