發(fā)布時(shí)間：2020-11-05 22:07

　　 目的觀察活血通督湯對(duì)大鼠急性脊髓損傷后肢功能的恢復(fù)及檢測(cè)損傷區(qū)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)和膠質(zhì)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)表達(dá)的影響,以探討該方的作用機(jī)制。方法將96只成年雌性SD大鼠按隨機(jī)數(shù)字法分為假手術(shù)組、模型組和活血通督湯組,每組32只,每組中再分為術(shù)后1d、3d、5d、7d四個(gè)亞組,每個(gè)亞組8只,造模前、后7d連續(xù)灌胃,活血通督湯組灌服活血通督湯,余兩組灌服等量生理鹽水,一日2次,假手術(shù)組只切開椎板顯露脊髓,余兩組采用改良Allen' s法制備脊髓損傷模型,術(shù)后8h、1d、3d、5d、7d行為學(xué)評(píng)分后,處死大鼠取材,采用尼氏染色法觀察脊髓及神經(jīng)元形態(tài)改變、免疫熒光法檢測(cè)脊髓損傷區(qū)BDNF、NGF和GFAP陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)、Western blot法和PCR法檢測(cè)損傷區(qū)BDNF、NGF和GFAP的表達(dá)情況。結(jié)果1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行為學(xué)評(píng)分:脊髓損傷后模型組和活血通督湯組感覺和運(yùn)動(dòng)功能較假手術(shù)組差(P0.01),與模型組比較,術(shù)后5-7d,活血通督湯組感覺及運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)較好(P0.05 或 P0.01);2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物形態(tài)學(xué)觀察:假手術(shù)組脊髓結(jié)構(gòu)完整,灰白質(zhì)界限清楚呈蝴蝶狀,神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)可見虎斑樣尼氏體,與模型組比較,活血通督湯組脊髓瘀血灶小,神經(jīng)細(xì)胞腫脹較輕,神經(jīng)元形態(tài)較好,未見空泡樣改變;3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)結(jié)果:①與假手術(shù)組比較,模型組和活血通督湯組免疫熒光檢測(cè)BDNF、NGF和GFAP表達(dá)較高(P0.01),與模型組比較,活血通督湯組BDNF、NGF陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)表達(dá)較高(P0.01),GFAP陽(yáng)性表達(dá)較低(P0.01);②脊髓損傷后BDNF、NGF和GFAP蛋白均有不同程度表達(dá),在相同時(shí)間點(diǎn),術(shù)后3-7d,模型組和活血通督湯組表達(dá)量較假手術(shù)組高(P0.01),與模型組比較,活血通督湯組BDNF、NGF蛋白表達(dá)較高(P0.05或P0.01),而GFAP蛋白表達(dá)較模型組低(P0.01);③PCR結(jié)果顯示,脊髓損傷后,BDNF mRNA、NGF mRNA和GFAP mRNA相對(duì)表達(dá)量均有不同程度升高,在相同時(shí)間點(diǎn),術(shù)后3-7d,其表達(dá)量較假手術(shù)組高(P0.05或P0.01),與模型組比較,活血通督湯組GFAPmRNA相對(duì)表達(dá)量較低(P0.05或P0.01),余兩個(gè)指標(biāo)表達(dá)量較高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。結(jié)論1、活血通督湯能促進(jìn)急性脊髓損傷早期后肢感覺及運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù);2、活血通督湯通過促進(jìn)NGF、BDNF的分泌、抑制GFAP的表達(dá),減少膠質(zhì)瘢痕形成,從而有利于急性脊髓損傷的修復(fù)。
【學(xué)位單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

２實(shí)驗(yàn)結(jié)果??２．?１感覺Ｒｅｕｔｅｒ評(píng)分和運(yùn)動(dòng)ＢＢＢ評(píng)分??脊髓損傷后的行為學(xué)評(píng)分方法包括運(yùn)動(dòng)ＢＢＢ評(píng)分法、斜板實(shí)驗(yàn)評(píng)分法、感覺功能??Ｒｅｕｔｅｒ評(píng)分法、改良Ｔａｒｌｏｖ評(píng)分法以及聯(lián)合評(píng)分法，其中感覺Ｒｅｕｔｅｒ評(píng)分和運(yùn)動(dòng)ＢＢＢ??評(píng)分是研究脊髓損傷后常用的評(píng)分方法，國(guó)內(nèi)外學(xué)者多采用該方法對(duì)脊髓損傷后功能恢??復(fù)進(jìn)行評(píng)估，可初步觀察到受傷雌性大鼠功能恢復(fù)的一般狀況。成年雌性實(shí)驗(yàn)大鼠急性??脊髓損傷后，因假手術(shù)組只摘除椎板，脊髓未受打擊損傷，其后肢感覺及運(yùn)動(dòng)功能正常，??基本不受手術(shù)創(chuàng)傷影響，而其余兩組實(shí)驗(yàn)大鼠后肢均出現(xiàn)不同程度的感覺和運(yùn)動(dòng)功能障??礙；在脊髓損傷后的相同時(shí)間點(diǎn)與假手術(shù)組比較，模型組和活血通督湯組大鼠后肢感覺??及運(yùn)動(dòng)功能障礙差異明顯（Ｐ＜０．０１），與模型組比較，術(shù)后５ｄ和術(shù)后７ｄ活血通督湯組??感覺及運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)較為明顯（Ｐ＜〇．〇５或Ｐ＜０．０１），詳見下表。??Ｉ??

成空泡樣結(jié)構(gòu)，而用活血通督湯進(jìn)行灌胃治療后，該組的脊髓橫斷面內(nèi)表現(xiàn)為瘀血面積??較小、神經(jīng)元水腫較輕以及神經(jīng)元形態(tài)較好、未見空泡樣改變等特點(diǎn)，而在脊髓神經(jīng)細(xì)??胞受損修復(fù)過程中，仍可見部分脊髓神經(jīng)細(xì)胞核腫大以及核仁消失等表現(xiàn)。（見圖２）??１５??

少（Ｐ＜０．０１），與實(shí)驗(yàn)大鼠中的模型組比較，用活血通督湯治療組腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子??和神經(jīng)生長(zhǎng)因子陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)表達(dá)高于模型組，在數(shù)目上有明顯差異（Ｐ＜０．０１），但活血??通督湯組膠質(zhì)纖維酸性蛋白陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)數(shù)量比模型組低（Ｐ＜〇．〇ｌ）。（詳見下圖３、圖??４）??１６??
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本文編號(hào)：2872252