發(fā)布時(shí)間：2020-11-05 09:28

　　 歷代本草對(duì)胡蘆巴的功效都進(jìn)行了詳盡的記載,在補(bǔ)腎壯陽(yáng)、降血糖等方面具有很好的藥用價(jià)值。其中半乳甘露聚糖、皂苷和黃酮作為含量最高的降血糖活性成分備受關(guān)注,3種組分的分離純化工藝及作用機(jī)制已得到深入研究,但制備工藝復(fù)雜、耗時(shí)耗力。本文為簡(jiǎn)化工藝,節(jié)約成本,選擇以胡蘆巴提取物為研究對(duì)象開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。首先利用正交試驗(yàn),確定最佳乙醇提取工藝;其次明確乙醇提取物與水提取物在胡蘆巴活性成分產(chǎn)率及提取組分化學(xué)成分上的區(qū)別,并進(jìn)一步對(duì)兩種提取工藝所制備的提取組分進(jìn)行體外體內(nèi)藥效活性研究,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定最佳提取工藝,最后開(kāi)展了胡蘆巴膠囊的制備及含量測(cè)定。研究?jī)?nèi)容主要分為以下4個(gè)方面:1.胡蘆巴降血糖組分提取工藝的研究以黃酮和皂苷產(chǎn)率為指標(biāo),利用正交試驗(yàn),優(yōu)化胡蘆巴活性成分的乙醇提取工藝條件,最終確定最優(yōu)乙醇提取工藝為:液料比1:10,乙醇濃度70%,提取2 h,3次。對(duì)比醇提法和水提法活性成分的產(chǎn)率,結(jié)果顯示,水提取黃酮、皂苷、多糖產(chǎn)率分別為0.49%、7.18%、10.61%,乙醇提取黃酮和皂苷產(chǎn)率分別為1.06%、8.24%。2.胡蘆巴提取物成分分析實(shí)驗(yàn)采用UPLC-Q-TOF-MS,對(duì)提取物直接進(jìn)行主要成分分析,以對(duì)比水提物及乙醇提取物在化學(xué)成分結(jié)構(gòu)上的區(qū)別。結(jié)果表明:水提物和乙醇提取物總離子流圖相似,主成分種類相同,共鑒定出36種化合物,其中黃酮類化合物12種,皂苷類化合物24種。3.胡蘆巴組分輔助降血糖活性研究進(jìn)一步對(duì)水提組分和乙醇提取組分開(kāi)展活性研究。結(jié)果表明:胡蘆巴水提組分及乙醇提取組分均具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性,IC50分別為5.83、7.27mg/mL,水提組分α-葡萄糖苷酶抑制活性較強(qiáng);HepG2胰島素抵抗實(shí)驗(yàn)表明,水提組分給藥細(xì)胞糖消耗量為2.32 mM,乙醇提取組分給藥細(xì)胞糖消耗量為2.23mM,水提組分和乙醇提取組分改善胰島素抵抗能力相當(dāng);對(duì)四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病小鼠模型,水提組分和乙醇提取組分均具有改善實(shí)驗(yàn)動(dòng)物存活率、降低空腹血糖水平、提高糖耐量、升高血清胰島素水平、促進(jìn)肝糖原及肌糖原合成的藥效,只是在不同的考察指標(biāo)方面所表現(xiàn)出的活性不同。結(jié)合工藝生產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)可行性,最終確定水提組分為膠囊制備工藝的研究對(duì)象。4.胡蘆巴輔助降糖膠囊成型工藝的研究及含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)選擇濕法制粒,通過(guò)對(duì)賦形劑最小用量和種類、軟材軟硬度、成型性、顆粒外觀等方面的考察,確定最終制粒方法為:按浸膏:輔料1:1.5的比例向濃浸膏(密度在1.30-1.40之間)中加入輔料(淀粉)制軟材,軟材過(guò)14目篩制粒,65°C干燥2 h,整粒。含量測(cè)定結(jié)果表明:膠囊中黃酮、皂苷、總糖及多糖含量分別為0.16%、2.48%、6.47%、1.78%。綜上所述,本研究最終確立了胡蘆巴水提組分為研究對(duì)象,明確了其在降血糖方面的藥理活性,且水提取工藝操作簡(jiǎn)便、節(jié)省原材料、可行性強(qiáng),為胡蘆巴提取物降血糖保健品的開(kāi)發(fā)和利用提供了理論基礎(chǔ)。
【學(xué)位單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R283;R285
【部分圖文】：

4 樣品測(cè)定供試品溶液適量，平行三份，加水至 2 mL 后，按照 2.1.7.3 操作步驟，吸光度。結(jié)果及討論 胡蘆巴水提液中總黃酮的測(cè)定結(jié)果1 標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)曲線，如圖 2.1 所示，線性回歸方程 y=6.2872x+0.0068(R2=0.9992)，在 0.0288~0.1152 mg/mL 的范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

圖 2.2 薯蕷皂苷與吸光度的關(guān)系曲線.2.2.2 胡蘆巴水提液中總皂苷測(cè)定結(jié)果平行制備三份胡蘆巴水提液，按照皂苷測(cè)定方法，測(cè)定樣品吸光度，計(jì)算產(chǎn)率，結(jié)果如表 2.3 所示。表 2.3 水提原料藥總皂苷測(cè)定結(jié)果表 2.3 可見(jiàn)，胡蘆巴水提液中總皂苷的產(chǎn)率可達(dá) 7.18 %。水平 吸光度 產(chǎn)率(%)1 0.303 7.082 0.312 7.283 0.307 7.17均值 0.307 7.18

表 2.6 乙醇提取工藝驗(yàn)證結(jié)果水平 黃酮產(chǎn)率(%) 皂苷產(chǎn)率(%)1 1.06 8.132 1.05 8.333 1.06 8.27均值 1.06 8.242.2.6 胡蘆巴水提物中糖的測(cè)定結(jié)果2.2.6.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖 2.3 所示，線性回歸方程 y=3.6932x-0.0115(R2=0.9996)，表明樣品在 0.0063~0.0238 mg/mL 的范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2871445