目的1通過(guò)比較膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(CIA)小鼠關(guān)節(jié)炎臨床積分、組織病理學(xué)、骨微結(jié)構(gòu)、血清學(xué)指標(biāo)變化,評(píng)估麝香烏龍丸治療CIA小鼠的療效。2通過(guò)比較麝香烏龍丸對(duì)CIA小鼠膝關(guān)節(jié)滑膜微血管數(shù)量及血管內(nèi)皮鈣黏蛋白(VEcadherin)和閉鎖小帶蛋白-1(ZO-1)表達(dá)的影響,探析麝香烏龍丸治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)的可能機(jī)制。方法1將45只DBA/1小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組15只和造模組30只。造模組小鼠尾根部皮內(nèi)注射0.1ml CII乳劑(牛II型膠原乙酸溶液與弗氏完全佐劑等量混合)進(jìn)行首次免疫和第21天再次免疫,構(gòu)建CIA模型,并將出現(xiàn)繼發(fā)關(guān)節(jié)炎癥狀的小鼠視為造模成功小鼠。2加強(qiáng)免疫后,將造模成功的30只小鼠隨機(jī)分為模型組和治療組各15只。治療組第22天起給予麝香烏龍丸水溶劑灌胃,對(duì)照組和模型組灌胃等體積生理鹽水。連續(xù)治療21天,于第43天取材。3療效評(píng)價(jià):從第1天起,每7天稱(chēng)量并記錄小鼠體重;第21天起,每3天進(jìn)行一次關(guān)節(jié)炎臨床積分評(píng)定;采用HE、番紅O-固綠及缺氧探針免疫組化染色評(píng)估膝關(guān)節(jié)組織病理學(xué)變化;采用微型電腦斷層掃描系統(tǒng)(micro-CT)評(píng)估膝關(guān)節(jié)骨微結(jié)構(gòu)變化;采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(Elisa)測(cè)定小鼠血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)及干擾素-γ(IFN-γ)的濃度,以評(píng)估小鼠炎癥水平。4微血管數(shù)量及細(xì)胞連接評(píng)價(jià):免疫組織化學(xué)染色和蛋白免疫印跡試驗(yàn)(Western Blot)測(cè)定小鼠膝關(guān)節(jié)滑膜組織CD34的表達(dá)水平;免疫組織化學(xué)染色觀(guān)測(cè)小鼠膝關(guān)節(jié)滑膜組織VEcadherin和ZO-1兩種細(xì)胞連接的表達(dá)水平。結(jié)果1與對(duì)照組相比,CIA模型組小鼠體重明顯降低,而治療組小鼠體重顯著高于CIA模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2自第21天起,CIA模型組關(guān)節(jié)炎臨床積分高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);第33天起,CIA模型組關(guān)節(jié)炎臨床積分持續(xù)升高,而治療組開(kāi)始下降,治療組關(guān)節(jié)炎臨床積分顯著低于CIA模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3 HE染色結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,CIA模型組小鼠滑膜細(xì)胞過(guò)度增生,形態(tài)異常,排列紊亂,有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),形成血管翳;麝香烏龍丸治療后滑膜增生及炎癥明顯改善。4番紅O-固綠染色結(jié)果顯示,與對(duì)照組比較,CIA模型小鼠軟骨層較薄,表面粗糙,軟骨細(xì)胞計(jì)數(shù)減少,基質(zhì)重度失染,潮線(xiàn)被破壞,軟骨結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重,Mankin評(píng)分顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);經(jīng)麝香烏龍丸治療后,與CIA模型組相比,軟骨損傷程度明顯減輕,Mankin評(píng)分顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5與對(duì)照組相比,CIA模型組小鼠缺氧面積大,陽(yáng)性染色深,缺氧區(qū)域平均光密度值顯著高于對(duì)照組(P0.05);經(jīng)麝香烏龍丸治療后,CIA小鼠膝關(guān)節(jié)滑膜缺氧面積明顯減少,陽(yáng)性染色變淺,缺氧區(qū)域平均光密度值顯著降低(P0.05);6 MicroCT結(jié)果顯示對(duì)照組膝關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)完整,骨表面光滑,而關(guān)節(jié)炎小鼠骨嚴(yán)重侵蝕,有骨質(zhì)疏松的跡象,麝香烏龍丸治療顯著降低了關(guān)節(jié)損傷程度。與對(duì)照組相比,CIA模型組小鼠骨體積分?jǐn)?shù)(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、數(shù)目(Tb.N)、骨密度(BMD)明顯降低,骨小梁分離度(Tb.Sp)和結(jié)構(gòu)模式指數(shù)(SMI)顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);麝香烏龍丸治療后,這些參數(shù)顯著改善(P0.05)。7與對(duì)照組相比,CIA模型組小鼠血清中TNF-α、IL-6及IFN-γ的濃度明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);治療組小鼠血清中TNF-α、IL-6及IFN-γ的濃度與CIA模型組相比顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。8免疫組化和Western Blot結(jié)果顯示,CIA模型組滑膜組織CD34蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯高于對(duì)照組,差異有顯著意義(P0.05);經(jīng)麝香烏龍丸治療后,CIA小鼠滑膜組織CD34蛋白表達(dá)明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。9免疫組化結(jié)果顯示,CIA模型組滑膜組織VE-cadherin和ZO-1的陽(yáng)性表達(dá)和平均光密度值明顯少于對(duì)照組(P0.05);經(jīng)麝香烏龍丸治療后,CIA小鼠滑膜組織VE-cadherin和ZO-1的陽(yáng)性表達(dá)和平均光密度值顯著增加(P0.05)。結(jié)論1麝香烏龍丸能夠有效緩解CIA小鼠的關(guān)節(jié)腫脹度,降低關(guān)節(jié)炎指數(shù),抑制滑膜組織增生,減輕炎性細(xì)胞浸潤(rùn),緩解滑膜缺氧狀態(tài),延緩軟骨及骨破壞。2麝香烏龍丸能夠減少膝關(guān)節(jié)滑膜微血管數(shù)量,其抗血管新生的機(jī)制與上調(diào)血管內(nèi)皮連接蛋白VE-cadherin和ZO-1的表達(dá)有關(guān)。圖12幅;表2個(gè);參139篇。
【學(xué)位單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類(lèi)】：R285.5
【部分圖文】：

圖 1 小鼠體重的變化Fig.1 Changes of body weight in mice節(jié)炎臨床積分評(píng)定圖 2）關(guān)節(jié)炎臨床積分評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，由小鼠關(guān)節(jié)炎臨床積分

a-0 分；b-1 分；c-2 分；d-3 分；e-4 分圖 2 CIA 小鼠關(guān)節(jié)炎臨床積分評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)Fig.2 Evaluation criteria of CIA clinical arthritis scores

由小鼠關(guān)節(jié)炎臨床積分變化可知（圖3），從 d21 天觀(guān)察起，CIA 模型組小鼠關(guān)節(jié)炎臨床積分一直顯著高于對(duì)照組，差異有顯著意義（P＜0.05）。從 d21 至 d30 天，與 CIA 模型組相比，治療組關(guān)節(jié)炎臨床積分略低，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。從 d33 至 d42 天，CIA 模型組小鼠關(guān)節(jié)炎臨床積分持續(xù)升高，治療組小鼠關(guān)節(jié)炎臨床積分下降，與 CIA 模型組相比
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張莉;高峰;滕鳳猛;楊學(xué)文;;雷公藤多甙對(duì)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜組織微血管新生的影響[J];臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2015年21期

2 郭麗紅;劉長(zhǎng)信;田貴花;任麗娜;張瑞;殷媛;馬文珠;;電針對(duì)RA模型大鼠VEFG影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];中醫(yī)藥學(xué)報(bào);2015年05期

3 張國(guó)建;;從“絡(luò)”辨治類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎[J];北京中醫(yī)藥;2015年07期

4 翁金清;彭昊;周建林;方洪松;劉豐;鄧爽;楊驍;;HIF-1α、VEGF及CD34在大鼠骨關(guān)節(jié)炎模型軟骨中的表達(dá)及意義[J];生物醫(yī)學(xué)工程與臨床;2015年04期

5 郭麗紅;劉長(zhǎng)信;田貴花;任麗娜;張瑞;殷媛;周明亮;馬文珠;;電針對(duì)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠血清及膝關(guān)節(jié)白介素-17和白介素-23的影響[J];針刺研究;2015年02期

6 靖衛(wèi)霞;朱躍蘭;;從絡(luò)治痹理論探討[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2014年12期

7 吳青云;熊雪婷;許碧蓮;陳文雙;崔燎;吳鐵;張新樂(lè);;潑尼松對(duì)Ⅱ型膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠股骨微結(jié)構(gòu)及生物力學(xué)的影響[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2014年07期

8 張?zhí)m坤;過(guò)偉峰;肖婧;盛蕾;;從葉天士“絡(luò)以通為用”學(xué)說(shuō)談通絡(luò)藥物的臨床應(yīng)用[J];中醫(yī)雜志;2014年09期

9 夏坤偉;陳禮剛;;血管內(nèi)皮細(xì)胞鈣粘素研究進(jìn)展[J];西南軍醫(yī);2014年02期

10 劉瑞敏;王明麗;朱詩(shī)白;白慧玲;馬遠(yuǎn)方;;DBA/1小鼠膠原誘發(fā)關(guān)節(jié)炎模型的特征[J];河南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年04期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 盧軍;斷藤益母湯及其組方藥物對(duì)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠骨代謝的影響及其機(jī)制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2016年

2 夏玉坤;RLX/RXFP1、MMP9/MMP13和RANKL/OPG在關(guān)節(jié)炎軟骨和骨破壞及中藥治療中的作用[D];華中科技大學(xué);2012年

3 侯麗萍;從臨床研究探討類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的病因病機(jī)[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 彭麒;艾灸“腎俞”、“足三里”對(duì)RA大鼠血清IL-6、VEGF影響的研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 吳翩;血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子密度梯度對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞遷移行為的調(diào)控[D];重慶大學(xué);2015年

本文編號(hào)：2869948