目的:研究清腦益元湯對大鼠胚胎神經(jīng)干細胞(NSCs)增殖和分化的影響及其機制。方法:由廣西醫(yī)科大學動物實驗中心購入健康清潔級SD大鼠共30只,其中雄性20只,雌性10只,大鼠鼠齡為10-12周,體重250±50g,其中隨機取10只雄性SD大鼠分為兩組:正常血清組和清腦益元湯血清組,每組5只,每天分別于上午9點及下午5點灌胃蒸餾水或清腦益元湯藥劑兩次,在第28d將大鼠行舌下靜脈采血,分別制備正常血清與清腦益元湯血清,-20℃凍存?zhèn)溆谩ＪＳ嘈坌許D大鼠10只,體重250±50g,與10只雌性大鼠隨機合籠讓其交配,觀察是否有白色精栓形成,若有則記為0.5d,至孕12d取胎鼠,脫臼處死,分離制備大鼠胚胎神經(jīng)干細胞。建立神經(jīng)干細胞低糖低氧的體外模型,并給予清腦益元湯治療,通過免疫組化法檢測各組中VEGF、BDNF及Western blot法檢測各組中bFGF的表達量以及用免疫熒光雙標法觀察早期神經(jīng)干細胞陽性細胞克隆的增殖分化情況,初步探明清腦益元湯對神經(jīng)干細胞的增殖與分化的影響及可能的作用機制。結果:1、與空白組相比,缺氧模型組的神經(jīng)干細胞增殖數(shù)目降低,差異有統(tǒng)計學意義(P﹤0.05),VEGF表達增多,BDNF以及bFGF表達升高,差異均有統(tǒng)計學意義(p﹤0.05)。2、與缺氧模型組相比,正常血清組神經(jīng)干細胞增殖數(shù)目增多,差異均有統(tǒng)計學意義(P﹤0.05)。VEGF表達增多,BDNF以及bFGF表達降低,差異均有統(tǒng)計學意義(p﹤0.05)。3、與正常血清組比較,清腦益元湯組神經(jīng)干細胞數(shù)目明顯增多,差異有統(tǒng)計學意義(P﹤0.05),VEGF表達增多,BDNF以及bFGF表達降低,差異均有統(tǒng)計學意義(p﹤0.05)。結論:清腦益元湯對低糖低氧環(huán)境下的大鼠胚胎神經(jīng)干細胞的增殖分化具有促進作用,其作用機制可能是清腦益元湯對促進神經(jīng)干細胞生長的相關因子具有保護性表達的影響。
【學位單位】：廣西中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【文章目錄】：
中文摘要
abstract
引言
1.材料與方法
    1.1 實驗動物選擇
    1.2 動物飼養(yǎng)條件
    1.3 實驗研究
    1.4 主要試劑及儀器
    1.5 實驗動物分組及給藥情況
2.實驗方法
    2.1 NSCs的培養(yǎng)與傳代
    2.2 低糖低氧損傷模型的建立
3 指標檢測
    3.1 免疫組化法檢測VEGF、BDNF
    3.2 免疫印跡法（western-blot）檢測VEGF、bFGF
4 統(tǒng)計學處理
5、實驗結果
    5.1 各組VEGF表達的水平
    5.2 免疫組化法檢測各組BDNF的表達
    5.3 免疫印跡法檢測各組bFGF的表達
    5.4 各組每代陽性細胞克隆球數(shù)比較
6 討論
    6.1 腦中風的歷史沿革與發(fā)展
    6.2 五臟與缺血性腦中風的關系概述
    6.3 治療缺血性腦中風的思路方法
    6.4 現(xiàn)代醫(yī)學對腦缺血損傷及神經(jīng)干細胞增殖分化的研究
    6.5 中醫(yī)藥誘導缺血性神經(jīng)干細胞增殖分化的機理研究
    6.6 應用神經(jīng)干細胞治療腦缺血損傷的臨床研究策略
    6.7 清腦益元湯對缺血性腦中風的防治作用機制
    6.8 清腦益元湯誘導體外神經(jīng)干細胞分化的作用機制探究
7 實驗分析
    7.1 實驗方法討論
    7.2 相關因子對腦缺血后神經(jīng)干細胞增殖分化的影響
8 不足及展望
結論
參考文獻
附錄
主要縮略詞表
綜述
    參考文獻
致謝
個人簡歷及攻讀碩士期間的科研、教學成果

【參考文獻】

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本文編號：2859469