發(fā)布時(shí)間：2020-10-23 22:29

　　 【目的】探討丹皮酚對(duì)卵巢癌細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制�！痉椒ā坑貌煌瑒┝�(0、1、2、3、4、5、6、7、8 mmol/L)丹皮酚處理人正常卵巢表面上皮細(xì)胞HOSEpiC和人類卵巢癌細(xì)胞SKOV3。應(yīng)用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒8(CCK8)測(cè)定丹皮酚對(duì)HOSEpiC和SKOV3細(xì)胞的毒副作用,選擇低劑量丹皮酚(1、2、5 mmol/L)進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。用丹皮酚(1、2、5 mmol/L)處理SKOV3細(xì)胞,溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)染色法觀察SKOV3細(xì)胞的增殖能力,蛋白免疫印跡(Western Blot)法檢測(cè)SKOV3細(xì)胞Ki67、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、Bcl-2、Bax、葡萄糖調(diào)控蛋白78(GRP78)、CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白(C/EBP)同源(CHOP)、cleaved Caspase-12、cleaved Caspase-3、細(xì)胞色素c(Cyto-c)、細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)、細(xì)胞色素c氧化酶4(COX IV)、cleaved Caspase-9的表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞SKOV3凋亡和Ca2+水平�！窘Y(jié)果】丹皮酚(2、5 mmol/L)對(duì)正常細(xì)胞無(wú)害,可劑量依賴性地降低SKOV3細(xì)胞存活率。丹皮酚(2、5 mmol/L)抑制SKOV3細(xì)胞增殖,促進(jìn)SKOV3細(xì)胞凋亡。與空白對(duì)照組比較,丹皮酚(2、5 mmol/L)均升高內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)的凋亡通路蛋白GRP78、CHOP、cleaved Caspase-12、cleaved Caspase-3表達(dá)水平及Ca~(2+)含量(均P 0.05)。與空白對(duì)照組比較,丹皮酚2、5 mmol/L均降低線粒體損傷相關(guān)的凋亡通路Cyto-c、AIF(線粒體內(nèi))水平,升高Cyto-c、AIF(胞質(zhì))的表達(dá)水平,升高cleaved Caspase-9表達(dá)水平,下調(diào)Bcl-2及上調(diào)Bax表達(dá)水平(均P 0.05),且呈劑量依賴性�！窘Y(jié)論】丹皮酚劑量依賴性地調(diào)控SKOV3細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和線粒體損傷相關(guān)的凋亡通路蛋白,可促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞凋亡。
【部分圖文】：

圖1結(jié)果顯示：高劑量（6～8 mmol/L）丹皮酚處理后，HOSEpi C細(xì)胞存活率劑量依賴性地下降（P<0.05）。低劑量（2～5 mmol/L）丹皮酚處理后，SKOV3細(xì)胞存活率劑量依賴性地下降（P<0.05）。表明丹皮酚2～5 mmol/L對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒性，且劑量依賴性地抑制SKOV3細(xì)胞的存活，因此選擇丹皮酚1～5 mmol/L進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。2.2 丹皮酚抑制SKOV3細(xì)胞增殖

本研究進(jìn)一步觀察丹皮酚促進(jìn)SKOV3細(xì)胞凋亡潛在的分子機(jī)制。Western Blot法檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)的凋亡通路蛋白GRP78、CHOP、cleaved Caspase-12、cleaved Caspase-3表達(dá)的結(jié)果顯示：與空白對(duì)照組比較，丹皮酚1、2、5 mmol/L均升高GRP78、CHOP、cleaved Caspase-12、cleaved Caspase-3的蛋白表達(dá)水平（P<0.05），其中丹皮酚2、5 mmol/L的升高效果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且呈劑量依賴性。進(jìn)一步用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量，結(jié)果顯示：與空白對(duì)照組比較，丹皮酚1、2、5 mmol/L均升高Ca2+含量（P<0.05），其中丹皮酚2、5 mmol/L的升高效果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且呈劑量依賴性。具體結(jié)果見圖4。表明丹皮酚可通過(guò)促進(jìn)Ca2+從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)釋放到細(xì)胞質(zhì)中激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)的凋亡通路，促進(jìn)SKOV3細(xì)胞凋亡。圖3 丹皮酚促進(jìn)SKOV3細(xì)胞凋亡

丹皮酚促進(jìn)SKOV3細(xì)胞凋亡
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6 劉磊;王宏英;方艷秋;譚巖;趙雪儉;;人參二醇組皂苷增強(qiáng)紫杉醇對(duì)人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3細(xì)胞凋亡的研究[J];中國(guó)婦幼保健;2014年35期

7 王曉光;康健;;丹皮酚誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2008年19期

8 黃昕玥;龍凱花;;丹皮酚的臨床應(yīng)用[J];科技視界;2017年22期

9 李娜;金平;張春潔;;冬凌草甲素誘導(dǎo)人卵巢癌SKOV3細(xì)胞凋亡及其機(jī)制[J];腫瘤防治研究;2013年01期

10 池余剛;鐘玲;伍霞;王勇;;原花青素對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2008年23期

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