目的(1)觀察人參皂苷Rb1對(duì)單純性肥胖的作用;(2)探索人參皂苷Rb1在分化成熟3T3-L1脂肪細(xì)胞中對(duì)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的作用(3)明確人參皂苷Rb1是否通過PPARγ/AQP7途徑發(fā)揮改善肥胖的作用。方法體內(nèi)實(shí)驗(yàn),采用4-5周齡的C57BL/6雄性小鼠給予高脂飲食(脂肪含量60%)喂養(yǎng),構(gòu)建單純性肥胖模型構(gòu),進(jìn)行相應(yīng)藥物(人參皂苷Rb1、PPARγ抑制劑GW9662、DMSO)處理,檢測(cè)小鼠體質(zhì)量、體脂量、脂肪細(xì)胞大小,糖耐量試驗(yàn),血清學(xué)檢測(cè)血脂、血糖、肝功能變化。免疫組化分析脂肪組織內(nèi)AQP7、PPARγ的定位表達(dá),Western-blot測(cè)定脂肪組織中AQP7、PPARγ、p-PPARγ的表達(dá)量。體外實(shí)驗(yàn),采用3T3-L1細(xì)胞誘導(dǎo)成為成熟的脂肪細(xì)胞,不同濃度的Rb1處理篩選出最適濃度,其后將細(xì)胞分為空白對(duì)照組、Rb1組、GW9662+Rb1組、DMSO+Rb1組。油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴大小及其含量,ELISA試劑盒檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)基中游離三酯甘油、瘦素、脂聯(lián)素表達(dá)量,Western-blot測(cè)定脂肪組織中AQP7、PPARγ、p-PPARγ的表達(dá)量。結(jié)果1.與普食對(duì)照組小鼠體質(zhì)量比較,高脂飲食小鼠體質(zhì)量約為普食組小鼠體質(zhì)量的1-1.5倍,單純性肥胖小鼠模型造模成功。2.與對(duì)照組相比較,人參皂苷Rb1處理組(HFD+Rb1)的肥胖小鼠體質(zhì)量和體脂率降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),比較HFD+Rb1組與HFD+GW9662+Rb1組肥胖小鼠體質(zhì)量以及體脂率,給予肥胖小鼠PPARγ特異性抑制劑GW9662處理后可部分逆轉(zhuǎn)Rb1減輕體質(zhì)量以及體脂率的作用。3.IPGTT法檢測(cè)肥胖小鼠糖耐量,與對(duì)照組比較,HFD+Rb1組肥胖小鼠血糖調(diào)節(jié)能力較強(qiáng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);而HFD+GW9662+Rb1組肥胖小鼠的血糖調(diào)節(jié)能力較HFD+Rb1組弱,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)4.HFD+Rb1組肥胖小鼠血清中游離脂肪酸水平明顯低于其他組,但TG、LDL-C、HDL-C、CHO以及血糖水平無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。5.與對(duì)照組相比,HFD+Rb1組肥胖小鼠血清中AST和ALT水平較低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),HFD+Rb1組肥胖小鼠血清AST水平低于HFD+GW9662+Rb1組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而ALT水平未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異6.Rb1處理組肥胖小鼠的脂肪細(xì)胞直徑明顯較對(duì)照組以及HFD+GW9662+Rb1組小,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),HFD+DMSO+Rb1組肥胖小鼠脂肪細(xì)胞直徑明顯小于HFD+GW9662+Rb1組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。7.HFD+Rb1組肥胖小鼠脂肪總蛋白中AQP7、PPARγ、p-PPARγ蛋白表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組(P0.05)以及HFD+GW9662+Rb1組(P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HFD+DMSO+Rb1組中上述蛋白表達(dá)水平均高于HFD+GW9662+Rb1組,但四組肥胖小鼠脂肪蛋白中p-PPARγ(ser112)/PPARγ水平未見明顯差異。8.體外實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)不同濃度刺激分化成熟3T3-L1細(xì)胞,篩選出最適Rb1作用濃度為40umol/L。9.體外實(shí)驗(yàn)中,人參皂苷Rb1處理組以及DMSO+Rb1處理組的分化成熟3T3-L1細(xì)胞中脂滴大小明顯較對(duì)照組以及GW9662+Rb1組小,且Rb1組與DMSO+Rb1組培養(yǎng)基中游離三酯甘油水平較其他兩組高。10.與對(duì)照組相比,人參皂苷Rb1處理組促進(jìn)分化成熟3T3-L1脂肪細(xì)胞脂聯(lián)素的分泌(P0.05),抑制瘦素的分泌(P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。11.體外實(shí)驗(yàn)中,人參皂苷Rb1處理組的分化成熟3T3-L1脂肪細(xì)胞蛋白中AQP7、PPARγ、p-PPARγ表達(dá)水平明顯較對(duì)照組高,且DMSO+Rb1組上述蛋白表達(dá)水平高于GW9662+Rb1組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),但四個(gè)組p-PPARγ(ser112)/PARγ表達(dá)水平未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論1.人參皂苷Rb1明顯減輕肥胖小鼠的體質(zhì)量、降低體脂重量,減小脂肪細(xì)胞大小,降低肥胖小鼠血清中游離脂肪酸水平,且有保護(hù)肥胖小鼠肝功能的作用;2.人參皂苷Rb1促進(jìn)分化成熟3T3-L1脂肪細(xì)胞內(nèi)三酯甘油的排出,改善分化成熟3T3-L1脂肪細(xì)胞內(nèi)分泌功能,促進(jìn)脂聯(lián)素分泌,減少瘦素分泌;3.人參皂苷Rb1通過PPARγ影響AQP7表達(dá),最終發(fā)揮調(diào)節(jié)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的作用。
【學(xué)位單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

圖 1 人參皂苷 Rb1 減輕肥胖小鼠體質(zhì)量。A 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處理時(shí)間軸；B 每周小鼠體質(zhì)量變化。*P<0.05 vs Chow，**P<0.01 vs Chow，#P<0.05 vs HFD+Rb12.人參皂苷 Rb1 對(duì)肥胖小鼠脂肪組織中 AQP7、PPARγ 表達(dá)的作用觀察到人參皂苷 Rb1 能夠改善小鼠的肥胖狀態(tài)，為了檢測(cè) Rb1 是否影響三酯甘油的運(yùn)輸?shù)鞍�，我們檢測(cè)高脂飲食小鼠脂肪組織中 AQP7 以及 PPARγ的表達(dá)量，與高脂對(duì)照組(Control)相比,高脂+Rb1 組的 AQP7 以及 PPARγ 表達(dá)量明顯增加。

37圖 3 人參皂苷 Rb1 能減輕肥胖小鼠體質(zhì)量，且此作用與 PPARγ 途徑密切相關(guān)。A 為四個(gè)肥胖小鼠大體圖；B 為藥物處理后肥胖小鼠體質(zhì)量變化，藥物處理起始時(shí)間為圖 3B 箭頭所指時(shí)間。*P<0.05 vs HFD+Rb1，#P<0.05(HFD+Rb1 vs HFD+GW9662+Rb1)4.人參皂苷 Rb1 對(duì)肥胖小鼠體脂率的影響肥胖是一定程度的體質(zhì)量過重和脂肪層過厚的一種狀態(tài)，除了體質(zhì)量外，全身脂肪的含量的多少來衡量肥胖更為直接，即為體脂量。而體脂率=體脂/體質(zhì)量，反映了脂肪占據(jù)體質(zhì)量的百分比，是反應(yīng)肥胖的一個(gè)重要參數(shù)，比體

質(zhì)量更能體現(xiàn)肥胖中脂肪的含量且更符合肥胖的定義。所以我們檢測(cè)了脂肪組織的重量，并計(jì)算體脂率，圖 4A 為四組小鼠兩側(cè)皮下脂肪大體圖，圖中可見高脂喂養(yǎng)小鼠中 Rb1 組與 DMSO+Rb1 組肥胖小鼠附睪脂肪明顯較其他兩組小，圖 4B 結(jié)果顯示：與對(duì)照組(Control)相比，高脂+Rb1 組(Rb1)體脂率明顯降低；與 Rb1 組相比較，高脂+GW9662+Rb1 組(GW9662+Rb1)體脂率明顯增加 ， 及 Rb1 減 少 體 脂 率 的 作 用 部 分 被 GW9662 逆 轉(zhuǎn) ； 而 高 脂+DMSO+Rb1(DMSO+Rb1)組對(duì)比高脂+GW9662+Rb1 組(GW9662+Rb1)的體脂率也是明顯降低的，及 DMSO 溶劑不影響脂肪組織重量；且 Rb1+GW9662組比較 Control 組以及 Rb1 組比較 Rb1+DMSO 組的體脂率都未見明顯差異，排除了 DMSO 溶劑對(duì)脂肪組織重量的影響。
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 Yu-Meng Li;Hai-Bin Wang;Jin-Guang Zheng;Xiao-Dong Bai;Zeng-Kai Zhao;Jing-Yuan Li;Sen Hu;;Dimethyl sulfoxide inhibits zymosan-induced intestinal inflammation and barrier dysfunction[J];World Journal of Gastroenterology;2015年38期

2 郭瑩瑩;邊云飛;肖傳實(shí);;脂聯(lián)素在代謝綜合征及心血管疾病中的研究進(jìn)展[J];中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志;2015年05期

3 吳光雨;李華婷;賈偉平;;脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2聯(lián)系肥胖和心血管疾病的臨床證據(jù)和分子機(jī)制[J];醫(yī)學(xué)綜述;2014年20期

4 宋揚(yáng);吳榮;;PPARγ磷酸化與非磷酸化的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2014年03期

5 尚文斌;于希忠;王國(guó)強(qiáng);趙娟;;人參皂苷Rb_1改善高脂喂養(yǎng)肥胖小鼠胰島素抵抗和脂肪異位沉積[J];中國(guó)中藥雜志;2013年23期

6 陳麗;蘭珍;張丹;;不同肥胖標(biāo)準(zhǔn)在評(píng)估多囊卵巢綜合征胰島素抵抗中的價(jià)值[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年06期

7 魏丹;徐志鵬;薛耀明;;人類棕色脂肪的分布、影響因素及生理學(xué)作用[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2013年17期

8 于佳雪;徐亞偉;肖丹;陳清勇;毛春莉;;游離脂肪酸與心血管疾病[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年10期

9 齊美玲;趙越;;PPARγ輔調(diào)節(jié)因子與脂代謝關(guān)系的研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2012年10期

10 崔秋英;霍麗靜;賈敏;趙曉云;;高脂飲食中不同脂肪酸類型與胰島素敏感性的相關(guān)性研究[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2013年09期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 陳露婷;水通道蛋白7介導(dǎo)的卵泡刺激素對(duì)脂肪細(xì)胞成脂作用機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 陳一梅;北京市社區(qū)人群糖代謝及肥胖指標(biāo)與動(dòng)脈硬化的相關(guān)性研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2014年

2 袁嬋;二甲基亞砜（DMSO）對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的毒性作用及其機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

本文編號(hào)：2836528