【摘要】：研究背景與目的高血壓是導(dǎo)致心肌纖維化發(fā)生的主要原因之一,高血壓引起持續(xù)的心臟壓力超負(fù)荷,導(dǎo)致心肌膠原纖維過度增殖和積聚,最終導(dǎo)致心肌纖維化。我們課題組前期研究表明血府逐瘀湯具有抗高血壓心肌纖維化的作用。但是血府逐瘀湯由11味中藥組成,成分復(fù)雜,不利于深入開展藥理研究和機(jī)制研究。基于此,本研究嘗試結(jié)合傳統(tǒng)中醫(yī)理論和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對血府逐瘀湯進(jìn)行拆方分析,以期減少藥味、精簡方劑但不降低療效,尋找方中有效藥物組合,并進(jìn)行體內(nèi)實驗驗證及闡述其作用機(jī)制。研究內(nèi)容和方法根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)理論,血府逐瘀湯可拆分為四組:化瘀組、行氣組、養(yǎng)血組和調(diào)和組。運(yùn)用BATMAN-TCM數(shù)據(jù)庫,構(gòu)建四組的“中藥活性成分-靶點-疾病”的網(wǎng)絡(luò)圖,對其進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析,預(yù)測化瘀組藥物可能是血府逐瘀湯發(fā)揮作用的有效藥物組合。高相液相色譜法建立化瘀方和血府逐瘀湯指紋圖譜。選用12周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR),同齡的Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作為正常對照,予低中高劑量化瘀方灌胃給藥12周。無創(chuàng)尾壓儀和超聲心動圖檢測大鼠心臟功能。組織學(xué)檢測心肌病理改變及心肌超微結(jié)構(gòu)改變。生化試劑盒檢測血清中心肌酶及肝腎功能相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)。中藥血清藥物化學(xué)分析法鑒定化瘀方入血成分。對SHR組和化瘀高劑量組大鼠心臟組織進(jìn)行基因測序,篩選差異基因并進(jìn)行生物信息分析。Western blot檢測心臟組織中PI3k、AKT、Erk1/2、p38和抗氧化酶的蛋白表達(dá)。同時,生化試劑盒檢測血清及心臟組織中各氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)。實驗結(jié)果與SHR組比較,化疲方增加射血分?jǐn)?shù)和短軸縮短率(P0.001),改善心臟功能;同時,化瘀方顯著降低血壓、心重/體重、左心室重/體重、肌酸激酶、肌酸激酶MB、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶、血肌酐和尿肌酐表達(dá)(P0.05)。HE染色、Masson染色和透射電鏡結(jié)果顯示化瘀方處理后能減少SHR大鼠心肌炎細(xì)胞浸潤、心肌纖維化和心肌損傷。Western blot結(jié)果顯示,與SHR比較,化瘀方增加了 p-PI3k和p-AKT的蛋白表達(dá)(P0.05),降低p-p38和p-Erk1/2的蛋白表達(dá)(P0.05)。此外,與SHR組比較,化瘀方增加抗氧化酶、總一氧化氮合酶、結(jié)構(gòu)型一氧化氮合酶和一氧化氮的表達(dá)(P0.05),降低丙二醛和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶的表達(dá)(P0.05)。實驗結(jié)論化瘀方是血府逐瘀湯發(fā)揮抗心肌纖維化作用的有效藥物組合,其效果與全方血府逐瘀湯無異。化vR方能顯著降低SHR大鼠血壓,改善心臟功能,且對肝腎無毒性。化瘀方逆轉(zhuǎn)心肌纖維化作用可能與激活PI3k/AKT信號通路、抑制MAPK信號通路和減輕氧化應(yīng)激有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5
【圖文】：

排列紊亂，并伴有心肌成纖維細(xì)胞的增生［９］。逡逑高血壓心肌纖維化的發(fā)病機(jī)制相對比較復(fù)雜，其發(fā)生與許多細(xì)胞因子密切相關(guān)逡逑（圖１－１）：①高血壓壓力超負(fù)荷引起心肌細(xì)胞損傷為起點，繼之有心肌細(xì)胞的逡逑炎癥、變性、壞死，導(dǎo)致心肌組織反應(yīng)性系統(tǒng)過度激活、金屬基質(zhì)蛋白酶／金屬逡逑基質(zhì)蛋白酶組織抑制劑（ＭＭＰｓ／ＴＩＭＰｓ）表達(dá)失衡、炎性細(xì)胞浸潤、炎性因子水逡逑平異常增高，激活靜息狀態(tài)的心肌成纖維細(xì)胞，使之轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞，肌逡逑成纖維細(xì)胞合成大量膠原等ＥＣＭ成分，同時ＥＣＭ降解減少，從而導(dǎo)致心肌纖逡逑維化［１（）］。②心肌纖維化的發(fā)展與大量氧自由基生成及脂質(zhì)過氧化反應(yīng)密切相關(guān)，逡逑在心臟中Ａｎｇｌｌ可以通過提高ＮＡＤＰＨ氧化酶的產(chǎn)生而增加ＲＯＳ的產(chǎn)生，造成逡逑ＲＯＳ的蓄積，從而導(dǎo)致心臟成纖維細(xì)胞的增殖及膠原代謝紊亂［１１］。③ＩＦＮ－ｙ誘逡逑導(dǎo)巨噬細(xì)胞導(dǎo)致誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）產(chǎn)生，促進(jìn)一氧化氮（ＮＯ）的逡逑合成；Ｎ？是一種有效的抗心肌纖維化因子

靶點和疾病）由不同的節(jié)點形狀和顏色來呈現(xiàn)，以幫助對網(wǎng)絡(luò)元素進(jìn)行逡逑可視化。在ＢＡＴＭＡＮ－ＴＣＭ的幫助下，我們構(gòu)建了血府逐瘀湯中四組的“中藥逡逑活性成分－靶點－疾病”的網(wǎng)絡(luò)圖，結(jié)果顯示，與行氣組（圖２－２）、養(yǎng)血組（圖逡逑２－３）、和調(diào)和組（圖２４）相比，化癖組（圖２－１）的網(wǎng)絡(luò)圖節(jié)點和連接最多；逡逑同時對四組的網(wǎng)絡(luò)圖進(jìn)行分析（表２－２、２－３、２－４、２－５），發(fā)現(xiàn)四組均可以用于逡逑治療高血壓、心衰等，但是化瘀組的活性成分及作用靶點數(shù)最多。因此，我們逡逑預(yù)測化瘀組藥物可能是血府逐瘀湯發(fā)揮作用的有效藥物組合。逡逑１０逡逑

邋＊邋？逡逑Ｅｃ＾ｓｔｅｒｏｎ＊－３－０－ＢｔＵ－Ｄ－Ｇｉｕｃｏｐ，ｆａｎｏｓｉ＜３ｅ逡逑S緬義賢跡玻旎鱟榛钚猿煞鄭饔冒械悖膊⊥繽煎義希疲椋紓澹玻歟澹桑睿紓潁澹洌椋澹睿簦簦幔潁紓澹簦穡幔簦瑁鰨幔洌椋螅澹幔螅邋澹幔螅螅錚悖椋幔簦椋錚鑠澹睿澹簦鰨錚潁脲澹椋鑠澹齲酰幔伲蹂澹紓潁錚酰穡澹校酰潁穡歟邋義希潁澹穡潁澹螅澹睿簦簀澹悖錚恚穡錚螅椋簦椋觶邋澹悖錚恚穡錚酰睿洌澹猓歟酰邋澹潁澹穡潁澹螅澹睿簦簀澹裕茫停В簀澹椋睿紓潁澹洌椋澹睿簦�，邋ｔａ}紓澹簦螅澹澹歟歟錚麇澹潁澹穡潁澹螅澹睿簦簀義希猓椋錚歟錚紓椋悖幔戾澹穡幔簦瑁鰨幔�，邋}澹溴澹潁澹穡潁澹螅澹睿簦簀澹希停桑灣澹洌椋螅澹幔螅邋澹幔睿溴澹紓潁澹澹鑠澹潁澹穡潁澹螅澹睿簦簀澹裕裕膩澹洌椋螅澹幔螅澹義媳恚玻旎鱟櫚某煞幀⒆饔冒械愫拖喙丶膊″義希裕幔猓歟邋澹玻戾澹桑睿紓潁澹洌椋澹睿簦�，邋ｔａ}紓澹簦簀澹幔睿溴澹洌椋螅澹幔螅澹簀澹椋鑠澹停酰幔伲蹂澹紓潁錚酰穡義希齲酰幔伲蹂澹紓潁錚酰皰澹危酰恚猓澹蟈危校潁澹洌椋悖簦澹溴義希攏澹簦幔牛歟澹恚悖睿澹誨澹玻矗牛簦瑁歟椋洌悖睿沐澹蹋錚穡瑁悖睿錚歟誨澹校澹睿簦幔洌澹悖幔睿錚歟誨澹歟齲澹幔洌澹悖澹睿澹誨義希桑睿紓潁澹洌椋澹睿簦簀危玻罰板義希齲澹幔洌澹悖幔睿錚歟誨澹危澹錚悖澹恚猓潁澹睿澹誨澹粒歟穡瑁幔校椋睿澹睿澹誨澹蹋椋恚錚睿澹睿邋義希粒睿幔歟紓澹螅椋悖螅誨澹茫幔潁洌椋錚觶幔螅悖酰歟幔蟈澹洌椋螅澹幔螅澹澹酰睿螅穡澹悖椋媯椋澹洌誨澹齲穡澹潁簦澹睿螅椋錚睿誨義希模椋

本文編號：2750261