【摘要】：目的:通過觀察升降散對自身免疫性腦脊髓炎大鼠臨床癥狀、病理改變、以及免疫炎性因子和Nogo-A水平的影響,來探討它對該病的抗炎效果和神經(jīng)保護作用,從而為多發(fā)性硬化的治療提供實驗依據(jù)。方法:將32只WWistar雌性大鼠分成正常組、模型組、激素組、中藥組,利用豚鼠脊髓勻漿作為大鼠致敏抗原,制成EAE模型。正常組、模型組以生理鹽水灌胃,激素組以及中藥組分別予醋酸潑尼松、升降散灌胃。用藥從造模當天開始,并每天給大鼠稱重、進行神經(jīng)功能評分。用藥16天后將大鼠處死并收集血清及腦脊髓組織。ELISA法測定血清中IL-33和IL-35含量,QPCR法檢測腦和脊髓中TLR-4的表達,免疫組化法觀察脊髓組織中Nogo-A含量,進行HE組織染色觀察組織炎性浸潤程度。結(jié)果:神經(jīng)功能評分:正常組大鼠神經(jīng)功能評分始終為0,其余三組大鼠的神經(jīng)功能評分在實驗前期先逐漸下降,其后有出現(xiàn)緩慢回升的趨勢。相比于正常組,三個EAE組的大鼠評分更高,各組間差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。相比于模型組,治療組的神經(jīng)功能評分更低,組間差異也有統(tǒng)計學意義(P0.05)。而中藥組評分相對較激素組更低(P0.05)。潛伏期:相比于模型組,治療組大鼠的潛伏期明顯更短,組間差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。而中藥組則明顯較激素組更短(P0.05)。高峰期:各組大鼠發(fā)病的高峰期在統(tǒng)計學上卻無明顯差異(P0.05)。體重:正常組大鼠的體重一直持續(xù)增長,其余三組大鼠體重均在前期出現(xiàn)下降,在后期則緩慢回升。體重下降值:激素組與模型組比較,大鼠體重下降的差異并不明顯(P0.05),而中藥組下降的數(shù)值則明顯較模型組少,且兩者差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。IL-33:與正常組作對比,三個EAE組大鼠的IL-33含量均升高,其差異都有統(tǒng)計學意義(P0.05)。而兩個治療組與模型組比較,各自的含量均明顯更低,差異也有統(tǒng)計學意義(P0.05)。但兩個治療組之間比較卻無明顯差異。IL-35:與正常組作對比,三組EAE大鼠的IL-35含量明顯降低,其組間差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。而兩個治療組與模型組比較,治療組的含量更高,組間差異亦有統(tǒng)計學意義(P0.05)。但兩個治療組之間比較卻無明顯差異。TLR-4:與正常組作對比,三組EAE大鼠的TLR-4含量明顯升高,其差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。兩個治療組的含量明顯低于模型組,其差異也有統(tǒng)計學意義(P0.05)。然而兩個治療組之間比較卻無明顯差異。Nogo-A:與正常組比較,三組EAE大鼠的Nogo-A含量明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。相比于模型組,我們發(fā)現(xiàn)兩個治療組的含量相對較低,組間差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。然而兩個治療組之間比較卻無明顯差異。HE染色:三組EAE大鼠組織切片中均出現(xiàn)了不同程度的炎細胞浸潤及髓鞘脫失。與正常組比較,三組EAE大鼠的病理評分明顯更高,其差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。兩個治療組與模型組比較,其HE評分均明顯更低,各者之間差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。然而中藥組與激素組之間則無明顯差異。結(jié)論:升降散可以延遲EAE大鼠的發(fā)病及減輕疾病的嚴重程度,此外還能降低EAE大鼠IL-33的含量,減少神經(jīng)組織中TLR4和Nogo-A的表達,并同時提升IL-35的含量。上述結(jié)果均說明升降散具有減輕EAE的炎癥反應和保護中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損傷的作用,這提示升降散具備治療多發(fā)性硬化的潛力。
【學位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

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本文編號：2738092