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miR-330通路對LI-22誘導下角質(zhì)形成細胞作用及竹黃顆粒對該通路的干預

發(fā)布時間:2020-06-26 19:33
【摘要】:目的:研究竹黃顆粒通過miR-330/CNTTB1/CyclinD1通路調(diào)控角質(zhì)形成細胞。方法:1.用qPCR檢測銀屑病患者與健康人皮膚中CTNNB1的mRNA表達差異;2.測定在IL-22有無下HaCaT細胞和HKC中CTNNB1的mRNA與蛋白質(zhì)水平;3.使用蛋白質(zhì)印跡測定確定響應于共處理IL-22和miR-330抑制的CTNNB1蛋白水平;4.通過搜索miRBase,構(gòu)建了在預測的miR-330結(jié)合位點含有5bp突變的野生型和突變CTNNB1(mut-CTNNB1)熒光素酶報告基因載體;5.使用雙熒光素酶測定法測定miR-330與CTNNB1是否能靶向結(jié)合;6.用LV-miR-330感染HaCaT細胞和HKCs,使用蛋白質(zhì)印跡測定法測定HaCaT細胞和HKC中的細胞周期蛋白D1和Axin2的蛋白質(zhì)水平;7.檢測竹黃顆粒介導下miR-330/CNTTB1/CyclinD1通路中的蛋白及細胞水平。結(jié)論:1.銀屑病患者皮損中CTNNB1的mRNA表達呈下降趨勢;2.IL-22增加角質(zhì)形成細胞中CTNNB1的mRNA與蛋白質(zhì)的表達;miR-330可以抑制IL-22誘導增加的CTNNB1蛋白;3.miR-330可以直接靶向調(diào)節(jié)CTNNB1的表達;4.miR-330/CTNNB1/CyclinD1通路可以調(diào)節(jié)角質(zhì)形成細胞;5.竹黃顆粒可通過miR-330/CTNNB1/CyclinD1通路調(diào)節(jié)角質(zhì)形成細胞。
【學位授予單位】:湖南中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:R285.5
【圖文】:

擴增曲線


擴增曲線

溶解曲線,角質(zhì),課題


圖 2 溶解曲線.CTNNB1 被 IL-22 和 miR-330 調(diào)節(jié)后的蛋白水平在本課題之前的試驗中我們發(fā)現(xiàn)miR-330可以抑制IL-22誘導的角質(zhì)形成細

【參考文獻】

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本文編號:2730792

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