發(fā)布時(shí)間：2020-05-25 11:20

【摘要】：目的:研究大蒜素聯(lián)合5-FU誘導(dǎo)黏液表皮樣癌MEC-1細(xì)胞的凋亡相關(guān)機(jī)制作用及對(duì)Bax、Bcl-2參與凋亡途徑蛋白表達(dá)的影響,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)及臨床藥物應(yīng)用提供相應(yīng)依據(jù)。方法:對(duì)照組為含有0.1%DMSO的PBS組,實(shí)驗(yàn)組為大蒜素組、5-FU組、大蒜素聯(lián)合5-FU組。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(1)用CCK8法檢測(cè)不同濃度(0、25、50、75、100mg/L)大蒜素、5-FU及大蒜素聯(lián)合5-FU作用于MEC-1細(xì)胞一定時(shí)間(24、48、72h)后細(xì)胞增殖抑制率。(2)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同濃度(0、25、50、75mg/L)大蒜素、5-FU及大蒜素聯(lián)合5-FU作用于MEC-1細(xì)胞一定時(shí)間(12、24h)后細(xì)胞凋亡率。(3)使用Western blot檢測(cè)IC50濃度的大蒜素、IC50濃度5-FU單獨(dú)及聯(lián)合作用于MEC-1細(xì)胞24h后,測(cè)定Bax、Bcl-2蛋白表達(dá)量。結(jié)果:(1)在相同時(shí)間下,隨藥物濃度的增加,各實(shí)驗(yàn)組對(duì)MEC-1細(xì)胞活性抑制率增加,大蒜素組、5-FU組分別與聯(lián)合用藥組的抑制率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P_(組間)0.01)。(2)大蒜素組、5-FU組、聯(lián)合用藥組對(duì)MEC-1增殖抑制率增長(zhǎng)趨勢(shì)隨著時(shí)間或濃度增加而增大,聯(lián)合用藥組與單獨(dú)用藥組的抑制率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P_(組間)0.01)。(3)三個(gè)藥物實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比均能誘導(dǎo)MEC-1細(xì)胞凋亡。且三個(gè)實(shí)驗(yàn)組誘導(dǎo)MEC-1細(xì)胞凋亡作用強(qiáng)度隨著濃度和時(shí)間增大而增強(qiáng)。聯(lián)合用藥組分別與大蒜素組、5-FU組比較對(duì)MEC-1細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P組間0.05),75mg/L聯(lián)合用藥組誘導(dǎo)MEC-1細(xì)胞凋亡作用最強(qiáng)。(4)大蒜素與5-FU單獨(dú)及聯(lián)合使用均可以下調(diào)Bcl-2蛋白和上調(diào)Bax蛋白表達(dá)量,且聯(lián)合用藥組Bax/Bcl-2比值最大(P0.05)。結(jié)論:(1)大蒜素和5-FU單獨(dú)及聯(lián)合使用均對(duì)MEC-1細(xì)胞具有增殖抑制作用和誘導(dǎo)凋亡作用,作用強(qiáng)度隨時(shí)間或濃度增大而增強(qiáng),且大蒜素增強(qiáng)了5-FU對(duì)MEC-1細(xì)胞的凋亡作用。(2)大蒜素和5-FU單獨(dú)及聯(lián)合使用誘導(dǎo)MEC-1凋亡機(jī)制可能與細(xì)胞線粒體途徑的凋亡相關(guān)。
【圖文】：

圖 1 藥物干預(yù) 24 小時(shí)后 MEC-1 細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率表 2 藥物干預(yù) 48 小時(shí)后 MEC-1 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率（ ±S,n=5,%）藥物濃度（mg/L）細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率大蒜素組 5-FU 組 聯(lián)合藥物組25 17.267±1.107 18.156±1.612 29.074±2.002▲ 50 34.068±1.063#30.094±5.321#42.405±1.681#▲ 75 44.312±4.022#*45.369±3.328#*61.237±1.479#*▲ 100 57.132±1.892#*★55.227±1.250#*★70.337±2.523#*★▲ 與 25mg/L 組比較，，#p<0.01;與 50mg/L 組對(duì)比，*p<0.01；與 75mg/L 濃度組對(duì)比，★p<0.01；與同濃度的比，▲p<0.01;與同濃度的 5-FU 組比， p<0.01.

圖 1 藥物干預(yù) 24 小時(shí)后 MEC-1 細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率表 2 藥物干預(yù) 48 小時(shí)后 MEC-1 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率（ ±S,n=5,%）藥物濃度（mg/L）細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率大蒜素組 5-FU 組 聯(lián)合藥物組25 17.267±1.107 18.156±1.612 29.074±2.002▲ 50 34.068±1.063#30.094±5.321#42.405±1.681#▲ 75 44.312±4.022#*45.369±3.328#*61.237±1.479#*▲ 100 57.132±1.892#*★55.227±1.250#*★70.337±2.523#*★▲ 25mg/L 組比較，#p<0.01;與 50mg/L 組對(duì)比，*p<0.01；與 75mg/L 濃度組對(duì)比，★p<0.01；與同濃度，▲p<0.01;與同濃度的 5-FU 組比， p<0.01.
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：2680076