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從提取環(huán)節(jié)控制清開靈注射液大分子雜質(zhì)的方法學(xué)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-05-21 23:04
【摘要】:目的:探索不同提取溫度對(duì)清開靈注射液中三種植物性藥材的內(nèi)源性雜質(zhì)和活性成分的影響,以篩選出最佳提取溫度。方法:(1)采用五種不同的溫度提取三種植物性藥材,然后按《中華人民共和國藥典》制備清開靈注射液。(2)利用分子篩原理,用10K超濾管對(duì)五種不同溫度的三種植物性藥材中的大分子含量進(jìn)行檢測(cè)。(3)按照《中華人民共和國藥典》的操作規(guī)范對(duì)五種不同溫度提取的三種植物性藥材及自制的清開靈注射液中的內(nèi)毒素進(jìn)行檢查。(4)利用指紋圖譜對(duì)比方法,比較五種不同溫度提取的板藍(lán)根和梔子最終提取液主要峰和物質(zhì)峰的差別。(5)利用組織學(xué)微觀圖片,比較觀察五種不同溫度提取的板藍(lán)根和金銀花藥材的組織學(xué)差異(6)對(duì)三種植物性藥材的洗滌液進(jìn)行檢測(cè),得到最佳洗滌時(shí)間。結(jié)果:(1)不同溫度的板藍(lán)根提取液,得到大分子最少的沸騰溫度,小分子最多的80℃,考慮小分子/大分子,沸騰溫度提取較好。(2)不同溫度的金銀花提取液,得到大分子最少的是90℃提取法,小分子最多的是80℃,考慮小分子/大分子,90℃提取較好。(3)不同溫度的梔子提取液,得到大分子最少的是沸騰溫度,得到小分子最多的70℃,考慮小分子/大分子,沸騰溫度下提取較好。(4)不同溫度的自制清開靈注射液,得到大分子最少的是90℃提取法,小分子最多的是80℃提取法,考慮小分子/大分子,90℃提取較好,其次是沸騰溫度。(5)內(nèi)毒素檢查發(fā)現(xiàn)三種植物的初提取階段脂多糖含量較高,但是經(jīng)過無水乙醇沉淀后,脂多糖已被去除大部分,最終的自制清開靈注射液中,脂多糖含量已很少。(6)指紋圖譜檢測(cè)發(fā)現(xiàn),小分子較多的提取溫度,峰面積較大。(7)對(duì)三種藥材進(jìn)行洗滌,發(fā)現(xiàn)板藍(lán)根的最佳洗滌時(shí)間為6分鐘;金銀花的最佳洗滌時(shí)間為15分鐘;梔子的最佳洗滌時(shí)間為20分鐘。結(jié)論:結(jié)合提取過程中的大小分子檢測(cè),綜合來看90℃為最佳提取溫度,其次是沸騰溫度;而從單味藥來看,板藍(lán)根和梔子沸騰溫度提取較好,而金銀花則是90℃提取較好。
【圖文】:

板藍(lán)根,洗滌液,脂多糖,藥材


圖 1 板藍(lán)根洗滌液脂多糖限量檢查陽性結(jié)果染性雜質(zhì),用定量鱟試劑盒檢查藥材洗滌液的洗脫曲線。板藍(lán)根藥材在處理到第 6 分鐘35 分鐘左右無明顯變化,,說明此刻內(nèi)源性和從這個(gè)結(jié)果可以看出,板藍(lán)根藥材預(yù)處理的藥材的指紋圖譜檢測(cè)

脂多糖,洗滌液,金銀花


表 5 金銀花洗滌液脂多糖限量檢查陽性結(jié)果時(shí)間 陽性結(jié)果 時(shí)間 陽性結(jié)果J0 22(+) J20 25(+)J1 22(+) J25 26(+)J2 22(+) J30 27(+)J4 22(+) J35 27(+)J6 23(+) J40 27(+)J8 23(+) J45 27(+)J10 24(+) J50 27(+)J15 25(+) J60 27(+)
【學(xué)位授予單位】:云南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R286.0

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本文編號(hào):2675045


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