【摘要】：連翹Forsythia suspense(Thunb.)Vahl.為木犀科連翹屬植物。連翹以野生為主,受搶青和氣候因素的影響,藥材質(zhì)量無法保證,栽培是解決連翹藥材質(zhì)量的最佳方法,高質(zhì)量的種子是連翹規(guī)范化栽培的前提。目前,大量連翹成熟種子被棄出,造成了資源浪費(fèi)。本文考察了連翹種子的質(zhì)量檢驗(yàn)方法,并制定出連翹種子質(zhì)量分級標(biāo)準(zhǔn)。通過HPLC分別進(jìn)行連翹種子(即為連翹籽)和果殼中有效成分的含量測定,采用GC-MS分析連翹種子脂肪油各成分的相對含量,并對連翹種子、果殼以及連翹籽油的抗炎、抗病毒、抗氧化的活性進(jìn)行了研究,為連翹籽的綜合利用提供依據(jù)。研究結(jié)果如下:1.連翹種子質(zhì)量檢驗(yàn)方法的研究表明,檢驗(yàn)前連翹種子應(yīng)過14目篩,去除雜質(zhì)和癟粒。扦樣量應(yīng)不少于12.2 g,凈度分析是將凈種子與雜質(zhì)分開并稱重計(jì)算凈度,千粒重可采用百粒法測定,高恒溫粉碎(130±2)℃烘干5 h法測定水分含量,0.2%TTC溶液(35±1)℃避光染色5 h測定生命活力,連翹種子萌發(fā)不需要層積,發(fā)芽率測定時(shí)可直接用25℃恒溫光照雙層濾紙床進(jìn)行。2.依據(jù)K-聚類結(jié)果,并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐,選取凈度、含水量、千粒重、胚率及發(fā)芽率等5項(xiàng)指標(biāo)作為分級標(biāo)準(zhǔn)。連翹種子可以分為三級:一等連翹種子凈度≥90%,胚率≥90%,含水量≤10%,千粒重≥3.9 g,發(fā)芽率≥85%;二等連翹種子凈度≥80%,胚率83%~89%,含水量≤10%,千粒重3.2 g~3.8 g,發(fā)芽率74%~84%;三等連翹種子凈度≥70%,胚率≥72%,含水量≤10%,千粒重≥3.1 g,發(fā)芽率≥54%。3.采用HPLC分別對13批不同產(chǎn)地的連翹籽、果殼中的連翹酯苷A和3種木脂素類成分(松脂醇-β-D-葡萄糖苷、連翹苷、連翹酯素)進(jìn)行含量測定,結(jié)果表明連翹果殼中的連翹苷含量大多未達(dá)到藥典標(biāo)準(zhǔn),且連翹籽中3種木脂素的含量均低于果殼。但連翹籽中連翹酯苷A的含量明顯高于果殼,加入連翹籽可明顯提高老翹中連翹酯苷A含量。4.測定連翹籽油的理化性質(zhì),發(fā)現(xiàn)其相對密度為0.95 g/cm~3,酸值為1.08 mgKOH/g,過氧化值為0.12%,皂化值是121.74 KOH/g,碘值是160.20 g/100g。連翹籽油通過GC-MS測定分析,其主要成分為亞油酸(60.583%),油酸(24.160%),乙酸松油(5.600%),硬脂酸(1.867%),α-萜品烯(0.606%),D-檸檬酸(1.244%)以及松油烯-4-醇(1.430%)等,脂肪酸為連翹籽油的主要成分。5.本研究以小鼠RAW264.7細(xì)胞為模型細(xì)胞,LPS誘導(dǎo)活化并建立體外炎癥模型,MTT法檢測細(xì)胞毒性,連翹籽、果殼提取物及連翹籽油在濃度為1.6~16.6μg/mL范圍內(nèi)對小鼠RAW264.7細(xì)胞無毒副作用;ELISA法檢測IL-1β、TNF-α炎癥因子水平,連翹籽、果殼提取物及連翹籽油在濃度1~5μg/mL范圍內(nèi)有抗炎效果并呈劑量依賴性,且連翹籽抗炎效果較顯著;神經(jīng)氨酸酶抑制劑篩選試劑盒檢測連翹籽、果殼以及連翹籽油的抗流感病毒活性,得出連翹籽、果殼提取物的NA抑制效果較好;DPPH法和超氧陰離子自由基清除實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,三者均有抗氧化活性,為綜合分析和利用連翹籽資源提供理論依據(jù)。
【圖文】：

圖 2-1 表面特征圖Fig 2-1 Surface features（2） 分子鑒定圖 2-2 連翹種子 DNA 提取物凝膠電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果Fig 2-2 Results of DNAgel electrophoresis of Forsythia suspensa

-2 連翹種子 DNA 提取物凝膠電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果 Results of DNAgel electrophoresis of Forsythia s圖 2-3 ITS 序列 PCR 產(chǎn)物凝膠電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果esults of gel electrophoresis of PCR product for IT
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R282.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2659952