發(fā)布時(shí)間：2020-04-20 06:09

【摘要】：抑郁癥是一種廣泛流行的精神性疾病,確切病因尚不清晰,缺乏有效的治療手段,因此尋找有效的治療策略具有十分重要的科學(xué)意義。逍遙散方作為中國(guó)治療抑郁的經(jīng)典復(fù)方,有一千多年治療抑郁癥等疾病的歷史,但其活性成分復(fù)雜,作用機(jī)理還不明確。近年來研究顯示,腸道菌群在抑郁癥的發(fā)生和治療中發(fā)揮著重要作用,已成為預(yù)防和治療該疾病的新靶點(diǎn)。此外,越來越多的證據(jù)證明多種中草藥復(fù)方可能是通過影響或重塑腸道菌群發(fā)揮其功效。因此,綜合國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展,我們猜測(cè)以逍遙散為基礎(chǔ)的復(fù)方中草藥可能是通過調(diào)節(jié)腸道菌群的多樣性、結(jié)構(gòu)、功能及特定分類群的豐度,進(jìn)而發(fā)揮其抗抑郁功效。為驗(yàn)證該假說,本課題采用慢性溫和不可預(yù)知性應(yīng)激刺激(Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS)聯(lián)合孤養(yǎng)的方法構(gòu)建抑郁大鼠模型,借助16S rRNA V4-V5區(qū)擴(kuò)增子測(cè)序、液相色譜和質(zhì)譜(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry,LC-MS)聯(lián)合技術(shù)及宏基因組測(cè)序技術(shù),以大鼠糞便及腦組織樣本為研究對(duì)象,基于腸道菌群探究以逍遙散方為基礎(chǔ)的復(fù)方中草藥對(duì)模型大鼠抑郁癥狀改善的作用機(jī)理。具體研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:1)采用糖水偏好實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)和明暗穿梭實(shí)驗(yàn)評(píng)估復(fù)方中草藥干預(yù)前后模型大鼠抑郁行為的變化情況。結(jié)果顯示,復(fù)方中草藥干預(yù)前,相比于健康對(duì)照組(Healthy Control,HC),模型組(CUMS)大鼠的糖水偏好率和曠場(chǎng)得分顯著降低、在暗箱中所處時(shí)間顯著增長(zhǎng);復(fù)方中草藥干預(yù)6周后,相比于CUMS組,各劑量復(fù)方中草藥干預(yù)組(Traditional Chinese Medicine,TCM)大鼠的糖水偏好率和曠場(chǎng)得分均顯著升高,且在暗箱中所處時(shí)間顯著縮短。2)采用Illumina HiSeq高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)糞便細(xì)菌16S rRNA V4-V5區(qū)進(jìn)行系統(tǒng)分析,揭示復(fù)方中草藥干預(yù)前后糞便菌群α多樣性、結(jié)構(gòu)和各分類群豐度的變化情況。結(jié)果顯示,慢性壓力不僅顯著降低了大鼠糞便菌群的α多樣性,而且顯著調(diào)整了糞便菌群的結(jié)構(gòu)及特定分類群的豐度;復(fù)方中草藥干預(yù)后,TCM組大鼠糞便菌群的結(jié)構(gòu)和特定分類群的豐度得到顯著調(diào)節(jié),尤其是顯著調(diào)節(jié)了慢性壓力誘導(dǎo)的Ruminococcus_2和Roseburia等菌屬豐度的變化。3)基于LC-MS聯(lián)合技術(shù)對(duì)復(fù)方中草藥干預(yù)后各組大鼠腦部神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)(五羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、五吲哚乙酸(5-hydroxyindole acetic acid,5-HIAA)、伽馬氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid,GABA)、乙酰膽堿(Acetylcholine,Ach))進(jìn)行靶向定量,揭示復(fù)方中草藥對(duì)CUMS抑郁模型大鼠腦部神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)的影響。靶向代謝結(jié)果顯示,相比于CUMS組,TCM組中5-HT、5-HIAA、GABA和Ach的水平顯著增加。另外,斯皮爾曼(Spearman)相關(guān)性分析結(jié)果顯示,腦部各神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)與糞便各菌屬間存在著顯著相關(guān)性,如毛螺旋菌科UCG-006菌屬、未分類的柔嫩菌綱-RF9菌屬、胃瘤球菌科UCG-004菌屬與5-HIAA呈正相關(guān),而乳酸菌屬、Blautia菌屬及Ruminococcus_2與其呈負(fù)相關(guān);毛螺旋菌科UCG-006菌屬和產(chǎn)甾醇類的真菌屬與GABA呈正相關(guān);Blautia菌屬與Ach呈負(fù)相關(guān),而毛螺旋菌科UCG-006菌屬與其呈正相關(guān)。4)基于宏基因組測(cè)序技術(shù)探究復(fù)方中草藥干預(yù)后抑郁模型大鼠糞便微生物功能的變化情況,揭示復(fù)方中草藥對(duì)抑郁模型大鼠糞便菌群功能的影響。結(jié)果顯示,慢性壓力不僅誘導(dǎo)大鼠糞便菌群功能基因的豐度發(fā)生顯著改變(相比于HC組,CUMS組中COG0582、COG1674、COG4646、ENOG411221R、ENOG410Y01Z、ENOG4112DF3、ENOG410XQ4N、K03205、K03497、K06941、K04763、K03581、K03310、M00202、GH13_3、CBM60、PL17_1、ZP_04049838、ZP_02429913、YP_001896735和P78218的豐度顯著降低,而COG5433、M00535、M00502和AA2的豐度顯著升高),而且擾亂了氨基酸代謝功能、顯著提高了膽汁酸的生物合成功能;復(fù)方中草藥不僅顯著緩解了慢性壓力誘導(dǎo)的部分功能基因豐度的改變(相比于CUMS組,TCM組中COG0582、ENOG411221R、ENOG410Y01Z、ENOG4112DF3、ENOG410XQ4N、COG5433、K03205、K033110、M00202的豐度顯著升高,而M00535和M00502的豐度顯著降低),而且顯著提高了糞便菌群半胱氨酸和蛋氨酸的代謝水平。綜上可知,慢性壓力不僅成功誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生抑郁行為,而且擾亂了大鼠糞便菌群的穩(wěn)態(tài)。另外,復(fù)方中草藥干預(yù)可緩解慢性壓力誘導(dǎo)的抑郁行為,推測(cè)可能與其調(diào)節(jié)慢性壓力誘導(dǎo)的腸道菌群及腦部神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)失調(diào)有關(guān)。這一發(fā)現(xiàn)不僅為進(jìn)一步揭示復(fù)方中草藥、宿主反應(yīng)、腸道菌群失調(diào)與腦神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)水平之間的因果關(guān)系奠定了基礎(chǔ),而且為科學(xué)地解釋該復(fù)方的抗抑郁效果提供了理論依據(jù)。
【圖文】：

圖 1-1 腸道菌群在中草藥消化中的作用[54]Fig.1-1 The role of the gut microflora in the digest of the herbal medicine由圖 1-1 可知，中草藥被腸道消化后可分解成非碳水化合物及碳水化合物兩類物中，非碳水化合物類的小分子物質(zhì)可直接或是腸道微生物代謝后被腸上皮細(xì)胞吸后作用于靶器官；碳水化合物需經(jīng)腸道微生物發(fā)酵成 SCFAs，然后被腸上皮細(xì)胞吸揮其作用。另外可以看出，不僅腸道微生物對(duì)中草藥的消化吸收有促進(jìn)作用，中草腸道微生物也有一定的調(diào)節(jié)作用，主要可概括為兩大作用：抑生功能和促生功能。藥能抑制病原菌對(duì)腸黏膜的吸附和細(xì)胞的侵染，也能抑制條件致病菌（cherichiacoli、HelicobacterPylori、Enterococcus 及 Campylobacterjejuni 等）在腸道植與繁殖。另外，包括中草藥在內(nèi)的天然產(chǎn)物被胃腸消化后可形成有益于微生物生因子，促進(jìn)乳酸菌（Lactobacillus）、雙歧桿菌（Bifidobacterium）、擬桿菌（Bacteroide益生菌的生長(zhǎng)繁殖[54]。目前的研究發(fā)現(xiàn)，貫葉金絲桃、巴戟天、柴胡、茶、酸棗仁等天然產(chǎn)物具有較強(qiáng)

第一章 緒論外，臨床研究結(jié)果顯示抑郁癥患者的腸道菌群發(fā)生紊亂，主要表現(xiàn)為 α 多樣性及毛螺旋菌科的豐度顯著降低，而厚壁菌門與擬桿菌門的比例、擬桿菌目和梭菌屬的豐度顯著升高等[38, 85, 92-94]。綜上可知，，腸道疾病和精神性疾病的并發(fā)率較高，說明腸道一定程度的影響著腦神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育，而腦神經(jīng)系統(tǒng)受損也影響著腸道平衡，即腸道和腦之間存在雙向信息交流系統(tǒng)（“腸-腦”軸）。
【學(xué)位授予單位】：華南理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陸鑫;林黑著;李卓佳;袁豐華;楊其彬;;復(fù)方中草藥對(duì)尖吻鱸血液生理生化指標(biāo)的影響[J];大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年03期

2 Xun-hui ZHUO;Hong-chao SUN;Bin HUANG;Hai-jie YU;Ying SHAN;Ai-fang DU;;小鼠模型中研究復(fù)方中草藥抗弓形蟲感染的作用（英文）[J];Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology);2017年06期

3 李玉華;;復(fù)方中草藥對(duì)南美白對(duì)蝦的影響[J];基層農(nóng)技推廣;2015年10期

4 梁擁軍;孫向軍;孫硯勝;蘇建通;史東杰;馬峻峰;;復(fù)方中草藥對(duì)寶石鱸抗氧化能力及免疫功能的影響[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年15期

5 何芳;易康樂;周望平;羅陽(yáng);浣成;孫鏖;;復(fù)方中草藥噴霧劑體外滲透試驗(yàn)的研究[J];中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志;2019年06期

6 張游宇;李維;李雪松;任麗群;楊齊心;龔俞;;復(fù)方中草藥對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能和經(jīng)濟(jì)效益的影響試驗(yàn)[J];貴州畜牧獸醫(yī);2018年02期

7 吳小明;;魚類病毒性出血病的復(fù)方中草藥防治方法[J];吉林農(nóng)業(yè);2011年04期

8 孫裔雷;王荻;劉紅柏;;復(fù)方中草藥對(duì)施氏鱘非特異性免疫功能的影響[J];中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào);2015年08期

9 陸志款;;一種復(fù)方中草藥對(duì)紅笛鯛腸道菌群的影響[J];江西水產(chǎn)科技;2013年03期

10 廖梅;湯德元;龔俞;王彬;徐健;黃濤;胡忠;;復(fù)方中草藥散劑的毒性作用研究[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2010年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 廖梅;湯德元;龔俞;王彬;徐健;黃濤;胡忠;;復(fù)方中草藥散劑的毒性作用研究[A];紀(jì)念中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)中獸醫(yī)學(xué)分會(huì)成立30周年中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)中獸醫(yī)學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)、華東區(qū)第十九次中獸醫(yī)科研協(xié)作與學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

2 張傳強(qiáng);謝淑玲;阿木古楞;哈斯蘇榮;;復(fù)方中草藥對(duì)慢性氟中毒大鼠的抗氟作用及其機(jī)理研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)藥理毒理學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)討論會(huì)論文與摘要集[C];2006年

3 方珍珍;王慶奎;陳成勛;郭永軍;邢克智;;復(fù)方中草藥對(duì)半滑舌鰨和盾纖毛蟲的急性毒性研究[A];2014年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2014年

4 曹日亮;于紀(jì)賓;車向榮;任杰;王紅妍;趙志杰;;中草藥添加劑對(duì)豬生長(zhǎng)性能的影響[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)分會(huì)第十一次全國(guó)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

5 林紫薇;湯菊芬;吳灶和;魯義善;簡(jiǎn)紀(jì)常;;復(fù)方中草藥應(yīng)用于養(yǎng)殖羅非魚的安全性評(píng)價(jià)[A];2016年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2016年

6 鄒永新;劉思伽;;復(fù)方中草藥“抗囊疫”防治番鴨“花肝病”的效果觀察[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)禽病學(xué)分會(huì)第十四次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

7 陳琦;沈素芳;劉佩紅;崔立;姜法銘;華修國(guó);;復(fù)方中草藥對(duì)熱應(yīng)激大鼠激素變化的影響[A];紀(jì)念《元亨療馬集》付梓400周年中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)中獸醫(yī)學(xué)分會(huì)2008年學(xué)術(shù)年會(huì)華東區(qū)第十八次中獸醫(yī)科研協(xié)作與學(xué)術(shù)研討會(huì)暨獸藥發(fā)展論壇論文集[C];2008年

8 楊晉青;曹日亮;梁興龍;王紅妍;車向榮;任杰;于紀(jì)賓;趙志杰;;中草藥添加劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和腸道菌群的影響[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)分會(huì)第十一次全國(guó)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

9 車向榮;曹日亮;于紀(jì)賓;任杰;王紅妍;趙志杰;;中草藥添加劑對(duì)豬胴體性狀及相關(guān)基因表達(dá)的影響[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)分會(huì)第十一次全國(guó)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

10 湯菊芬;吳灶和;簡(jiǎn)紀(jì)常;;復(fù)方中草藥對(duì)羅非魚生長(zhǎng)性能、免疫功能及腸道菌群的影響[A];2008年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 徐曉嵐;淺析牙得安復(fù)方中草藥牙粉治療牙周病的臨床療效[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 屈婉;探究復(fù)方中草藥對(duì)模型大鼠抑郁癥狀的改善及其對(duì)糞便菌群的影響[D];華南理工大學(xué);2019年

2 陳亞洲;復(fù)方中草藥對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能及腸道屏障功能的影響[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 張召興;復(fù)方中草藥超微粉防治雞致病性大腸桿菌病的研究[D];河北科技師范學(xué)院;2017年

4 李萬通;新型復(fù)方中草藥漱口液的研制及其安全性研究[D];青島大學(xué);2017年

5 曾圣宏;復(fù)方中草藥對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能和肉品質(zhì)的影響[D];華南農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

6 杜海江;自擬復(fù)方中草藥超微粉對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、豬瘟免疫效果、抗氧化性、血液生化指標(biāo)等的影響[D];福建農(nóng)林大學(xué);2016年

7 馬維波;復(fù)方中草藥對(duì)香魚部分免疫生化指標(biāo)的影響[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

8 林紫薇;一種復(fù)方中草藥在小鼠及羅非魚中的安全性評(píng)價(jià)[D];廣東海洋大學(xué);2017年

9 王鵬;復(fù)方中草藥對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能、腸道酶活和免疫功能的影響[D];福建農(nóng)林大學(xué);2012年

10 張莉;白頭翁、黃柏及其復(fù)方提取物對(duì)小鼠腹瀉的防治作用及安全性[D];浙江大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2634249