油酸通過誘導凋亡和自噬抑制舌鱗癌細胞增殖機制的研究
發(fā)布時間：2020-04-18 02:47
【摘要】：目的:油酸是中藥鴉膽子油的主要成分之一,被報道對多種腫瘤具有明顯的抗癌作用。本課題旨在探究油酸(OA)對舌鱗癌細胞(TSCC)增殖的作用機制。方法:我們通過CCK8、Edu實驗及建立舌鱗癌裸鼠移植瘤模型從體外、體內(nèi)兩方面觀察OA對TSCC增殖的作用;同時利用流式細胞儀檢測OA作用后TSCC細胞周期的變化;再應用Annexin V-FITC細胞凋亡實驗、TUNEL實驗、透射電鏡觀察OA作用后TSCC凋亡和自噬;Western Blot、免疫組化實驗進一步驗證相關蛋白的變化。結果:1.體內(nèi)外實驗均證實OA能夠有效的抑制TSCC的增殖且具有時間和劑量依賴性;2.OA作用后CyclinD1表達降低,TSCC周期停滯在G0/G1期;3.細胞凋亡結果顯示:與對照組相比,OA處理后凋亡細胞增多,Bcl-2的表達量降低,p53和cleaved-capase-3的表達升高,表明OA能夠誘導TSCC凋亡;4.自噬結果顯示:與對照組相比,加入OA后TSCC細胞中可觀察到自噬溶酶體,p62的表達量降低,LC3-I/LC3-II比值減小,表明OA可以誘導TSCC發(fā)生自噬;5.與對照組相比,OA降低TSCC中p-Akt,p-mTOR,p-S6K,p-4E-BP1和p-ERK1/2的表達,表明OA抑制TSCC中Akt/mTOR信號通路。結論:OA抑制TSCC增殖的機制可能是通過抑制Akt/mTOR通路誘導其自噬和凋亡。因此OA可能可以作為一種潛在的抑制舌鱗癌增殖的抗癌藥物。
【圖文】：
第 3 章 實驗結果第 3 章 實驗結果3.1 油酸抑制舌鱗癌細胞的增殖我們通過 CCK8 實驗觀察 OA 對舌鱗癌細胞（CAL27，UM1）增殖的作用。如圖 3.1 所示：隨著 OA 濃度的增高，OA 對舌鱗癌細胞抑制率逐漸增高；在同一濃度下，，隨著作用時間的延長，OA 對舌鱗癌細胞抑制率也逐漸增高，表明OA 在體外可以抑制舌鱗癌細胞的增殖，并呈時間和劑量依賴性。表 3.1 結果顯示：OA 作用舌鱗癌細胞 CAL27 和 UM1 的半抑制濃度（half maximal inhibitoryconcentration，IC50）值分別是 291~228μM 和 159~78μM。表 3.2 結果顯示：OA作用于舌鱗癌細胞后，舌鱗癌細胞的倍增時間延長。CAL27 倍增時間從 69.1h延長到 126.8h，UM1 倍增時間從 67h 延長到 90.7h，細胞增殖速度減慢。從 CCK8實驗結果得出 OA 可以抑制舌鱗癌細胞的增殖且呈時間和劑量依賴性。
16圖 3.2 Edu 實驗驗證油酸抑制舌鱗癌細胞的增殖（a）：紅色箭頭指示增殖的舌鱗癌細胞，如圖示紅色熒光逐漸減少表示舌鱗癌細胞增殖受到抑制。（b）：統(tǒng)計學分析隨著 OA 濃度的逐漸增高，舌鱗癌細胞增殖率逐漸下降（*p<0.05,**p<0.01, ***p<0.001 ）。3.2 油酸對舌鱗癌細胞周期的影響為了進一步探討 OA 對舌鱗癌細胞周期的影響，如圖 3.3 a 所示：隨著 OA濃度的不斷增加，舌鱗癌細胞增殖被抑制，大部分細胞停滯在 G0/G1 期。圖 3.3b-c 顯示：CAL27 細胞 G0/G1 期的占比從 50.28±0.78%增加到 62.21±3.38%，G2/M期占比從17.87±1.57%減少到5.41±0.56%，UM1細胞的G0/G1期的占比從45.36±1.50%增加到 62.88±0.59%，G2/M 期占比從 9.43±0.95%減少到 2.26±0.30%，兩株細胞S期的占比均無明顯變化。表明OA可以將舌鱗癌細胞周期阻滯在G0/G1。
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R285
本文編號：2631624
【圖文】：
第 3 章 實驗結果第 3 章 實驗結果3.1 油酸抑制舌鱗癌細胞的增殖我們通過 CCK8 實驗觀察 OA 對舌鱗癌細胞（CAL27，UM1）增殖的作用。如圖 3.1 所示：隨著 OA 濃度的增高，OA 對舌鱗癌細胞抑制率逐漸增高；在同一濃度下，，隨著作用時間的延長，OA 對舌鱗癌細胞抑制率也逐漸增高，表明OA 在體外可以抑制舌鱗癌細胞的增殖，并呈時間和劑量依賴性。表 3.1 結果顯示：OA 作用舌鱗癌細胞 CAL27 和 UM1 的半抑制濃度（half maximal inhibitoryconcentration，IC50）值分別是 291~228μM 和 159~78μM。表 3.2 結果顯示：OA作用于舌鱗癌細胞后，舌鱗癌細胞的倍增時間延長。CAL27 倍增時間從 69.1h延長到 126.8h，UM1 倍增時間從 67h 延長到 90.7h，細胞增殖速度減慢。從 CCK8實驗結果得出 OA 可以抑制舌鱗癌細胞的增殖且呈時間和劑量依賴性。
16圖 3.2 Edu 實驗驗證油酸抑制舌鱗癌細胞的增殖（a）：紅色箭頭指示增殖的舌鱗癌細胞，如圖示紅色熒光逐漸減少表示舌鱗癌細胞增殖受到抑制。（b）：統(tǒng)計學分析隨著 OA 濃度的逐漸增高，舌鱗癌細胞增殖率逐漸下降（*p<0.05,**p<0.01, ***p<0.001 ）。3.2 油酸對舌鱗癌細胞周期的影響為了進一步探討 OA 對舌鱗癌細胞周期的影響，如圖 3.3 a 所示：隨著 OA濃度的不斷增加，舌鱗癌細胞增殖被抑制，大部分細胞停滯在 G0/G1 期。圖 3.3b-c 顯示：CAL27 細胞 G0/G1 期的占比從 50.28±0.78%增加到 62.21±3.38%，G2/M期占比從17.87±1.57%減少到5.41±0.56%，UM1細胞的G0/G1期的占比從45.36±1.50%增加到 62.88±0.59%，G2/M 期占比從 9.43±0.95%減少到 2.26±0.30%，兩株細胞S期的占比均無明顯變化。表明OA可以將舌鱗癌細胞周期阻滯在G0/G1。
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R285
【參考文獻】
相關期刊論文 前4條
1 Yoko Murayama;Kenji Oritani;Shusaku Tsutsui;;Novel CD9-targeted therapies in gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2015年11期
2 鐘來平;孫堅;郭偉;涂文勇;竺涵光;季彤;胡永杰;李軍;葉為民;徐立群;何悅;楊雯君;王延安;任國欣;殷秋明;蔡以理;楊溪;張陳平;張志愿;;256例局部晚期口腔癌的生存分析[J];中國腫瘤臨床;2015年04期
3 張陳平;鐘來平;張志愿;;晚期口腔鱗癌多學科綜合序列治療[J];實用腫瘤雜志;2015年01期
4 GE Jiao;LIU Yan;LI Qiang;GUO Xia;GU Ling;MA Zhi Gui;ZHU Yi Ping;;Resveratrol Induces Apoptosis and Autophagy in T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia Cells by Inhibiting Akt/mTOR and Activating p38-MAPK[J];Biomedical and Environmental Sciences;2013年11期
本文編號：2631624
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/zhongyaolw/2631624.html
最近更新
教材專著
