【摘要】：吉林省是紅景天的主要生產(chǎn)地之一,紅景天是草本藥用植物,已有大量實(shí)驗(yàn)證明,其具有抗氧化、抗疲勞、抗腫瘤等作用。近年來,因前列腺患者的顯著性增多,前列腺癌早期癥狀不明顯,大部分晚期才能得到確診等原因,對(duì)前列腺癌的研究成為重點(diǎn)。前列腺癌的早期治療主要通過手術(shù)治療,到后期因前列腺癌對(duì)藥物產(chǎn)生耐藥性,雄激素依賴性轉(zhuǎn)變?yōu)樾奂に胤且蕾囆?最后只能進(jìn)行去勢(shì)和化療治療。近年來,因天然藥用植物資源豐富,本身對(duì)人體無毒、無副作用等特點(diǎn),在腫瘤的研究中越來越受重視。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,FDA批準(zhǔn)的60%以上的抗癌藥物來自于天然化合物,其中包括藥用植物。因此本試驗(yàn)用人前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞,研究了輻照紅景天提取物對(duì)前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞增殖和凋亡的作用機(jī)制。本試驗(yàn)中首先將紅景天送到四川原子能研究院進(jìn)行了輻照處理,用輻照劑量分別為5、10、20、30 kGy的60 Co-γ射線進(jìn)行了輻照處理。之后用輻照紅景天提取物在體外細(xì)胞試驗(yàn)中,采用CCK-8法檢測(cè)輻照紅景天提取物對(duì)前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞活力的影響,用倒置顯微鏡觀察20 kGy輻照紅景天提取物作用后前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞形態(tài)的變化,通過細(xì)胞劃痕試驗(yàn)檢測(cè)了前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞的遷移能力。進(jìn)一步通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)了20 kGy輻照紅景天提取物對(duì)2種前列腺癌細(xì)胞周期分布和凋亡的影響,用Western blot檢測(cè)20 kGy輻照紅景天提取物作用后前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞內(nèi)有關(guān)抗凋亡蛋白PCNA和Bcl-2的表達(dá)情況。試驗(yàn)結(jié)果表明,經(jīng)輻照后的紅景天提取物與未輻照紅景天提取物分別作用前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞48 h后,均能抑制2種前列腺癌細(xì)胞的增殖,且輻照后的紅景天提取物抑制效果強(qiáng)于未輻照組,其中20 kGy輻照紅景天提取物的抑制率最高。通過CCK-8試驗(yàn)得出對(duì)于PC3細(xì)胞,20 kGy輻照劑量組的最適低、中、高濃度分別為300、600、900μg/mL,LNCaP細(xì)胞的最適低、中、高濃度分別為200、400、800μg/mL。細(xì)胞劃痕試驗(yàn)結(jié)果得出,與對(duì)照組相比較,20 kGy輻照紅景天提取物低、中、高濃度組均抑制前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞的遷移,并呈劑量依賴性,其中對(duì)前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞,900 μg/mL和800μg/mL組的抑制遷移效果最好。采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞周期和凋亡的結(jié)果表明,20 kGy輻照紅景天提取物作用前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞48 h后,與對(duì)照組相比較,均可對(duì)PC3和LNCaP細(xì)胞產(chǎn)生阻滯作用,且隨著20 kGy輻照紅景天提取物濃度的增加,2種前列腺癌細(xì)胞的凋亡率呈上升趨勢(shì)。Western blot檢測(cè)得出,與對(duì)照組相比較,20 kGy輻照紅景天提取物使前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞中的抗凋亡蛋白PCNA和Bcl-2下調(diào),且呈劑量依賴性。綜上,與未輻照組相比輻照紅景天提取物抑制前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞增殖效果明顯好于未輻照組。其可能是通過阻滯前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞的周期,下調(diào)有關(guān)抗凋亡蛋白PCNA和Bcl-2來抑制前列腺癌PC3和LNCaP細(xì)胞的增殖。
【圖文】：

Ｔａｂｌｅ邋４邋ｙｉｅｌｄ邋ｏｆ邋Ｒｈｏｄｉｏｌａ邋ｓａｃｈａｌｍｅｎｓｉｓ邋ｅｘｔｒａｃｔ逡逑輻照劑量（ｋＧｙ）邐紅景天粉質(zhì)量（ｇ）邐紅景天提取物質(zhì)量（ｇ）邐提取物得率（％）逡逑未輻照邐２０．０４士０．０５邐６．１６±０．０８邐３０．７４３逡逑５邐１９．９８±０．０７邐６．５０±０．０７邐３２．５３邋３逡逑１０邐１９．９７土０＿０７邐６．０８士０．０９邐３０．４５３逡逑２０邐２０．０５±０．０９邐６．３９±0．0７邐３１．８７ａ逡逑３０邐２０．０５土０．０８邐６．１９±０．０６邐３０．８７ａ逡逑注：同一行凡有不同字母即為差異顯著（尸＜０．０５），反之亦然。逡逑由表４可知，本試驗(yàn)中未輻照、５、１０、２０、３０邋ｋＧｙ輻照紅景天經(jīng)過乙醇提取后的紅逡逑景天提取物得率分別為３０．７４％、３２．５３％、３０．４５％、３１．８７％、３０．８７％，且不同輻照劑量之逡逑間無顯著性差異（Ｐ＞0．0５）。逡逑３．２輻照紅景天提取物對(duì)ＰＣ３和ＬＮＣａＰ細(xì)胞增殖抑制的作用逡逑用ＣＣＫ－８法分析輻照紅景天提取物對(duì)ＰＣ３和ＬＮＣａＰ細(xì)胞增殖作用的影響，并采用統(tǒng)逡逑計(jì)分析方法處理得到的結(jié)果。逡逑Ａ邐Ｂ逡逑

邐延邊大學(xué)碩士學(xué)位論文首先分別用相同濃度１０００邋Ｈｇ／ｍＬ的不同輻照劑量紅景天提取物作用前列腺癌ＰＣ３ＬＮＣａＰ細(xì)胞４８邋ｈ，從而篩選出抑制效果最好的輻照劑量組，結(jié)果如圖１所示。在前列ＰＣ３和ＬＮＣａＰ細(xì)胞中，與未輻照組相比較，輻照紅景天提取物組顯著抑制前列腺癌Ｐ和ＬＮＣａＰ細(xì)胞的活性，其中２０邋ｋＧｙ輻照紅景天提取物組的抑制率最高，未輻照與輻之間存在顯著性差異（Ｐ＜０．０５），，而不同輻照劑量組之間沒有顯著性差異（＾＞０．０５）。由據(jù)產(chǎn)品的需要，提高輻照劑量會(huì)提高產(chǎn)品質(zhì)量，且最高抑制率出現(xiàn)現(xiàn)在２０邋ｋＧｙ輻照劑量因此選擇２０邋ｋＧｙ進(jìn)行后續(xù)的試驗(yàn)。逡逑Ａ邐Ｂ逡逑
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2626384