【摘要】：目的:老齡化是大多數(shù)慢性病的主要危險因素之一,過去一個世紀,社會經(jīng)濟發(fā)展顯著,醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)進步,人類的壽命一直在穩(wěn)步增加,致使世界老年人口急劇增長,而衰老引起的肝臟形態(tài)和分子學的改變,影響高齡患者的肝臟功能和肝臟的藥物代謝,增加各種肝臟疾病的風險,作為不良預后因素,導致死亡率上升,因此,更多地了解老化的分子機制,制定可以阻止老化誘發(fā)的肝臟疾病進展的治療策略尤為重要。實驗通過吸入臭氧造成大鼠衰老模型,通過生化指標、病理切片、蛋白質(zhì)組學研究探究衰老大鼠肝臟損傷情況以及中藥復方希望液對衰老大鼠肝損傷的保護作用。方法:48只雄性SD大鼠,隨機分為6組,每組8只�？瞻捉M吸入新鮮空氣10h/d×45d,灌胃(ig)飲用水;造模組吸入臭氧(1.2±0. 2 ppm) 10h/d×45d,其中模型組每日灌胃飲用水,各給藥組同步灌胃維生素E (13. 5mg/kg)與希望Ⅰ號液(45, 90,180 mg/kg)治療。造模45天取材,取大鼠肝臟。檢測肝臟組織勻漿丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)含量;HE染色觀察組織細胞形態(tài);蛋白質(zhì)組學方法檢測差異蛋白并對具有顯著差異的蛋白質(zhì)進行相關生物過程、分子功能、細胞成分和生物信號通路的聚類分析。結果:模型組大鼠較空白組肝臟組織勻漿MDA含量升高(P0. 01 ),CAT、SOD和GSH-Px含量降低(P0. 01);肝細胞數(shù)量減少,細胞體積和細胞核卻代償性增大,大小不一,排列稀松,部分肝細胞胞漿出現(xiàn)脂肪樣變性,肝細胞核染色質(zhì)濃縮;與肝臟結構、代謝、功能及調(diào)控有關的多條通路相關蛋白發(fā)生顯著差異變化,與空白組相比,模型組149個差異蛋白顯著上調(diào),126個差異蛋白顯著下調(diào)。給予希望液后,較模型組MDA含量降低(P0.01),CAT、SOD和GSH-Px含量升高(P0.01),組織形態(tài)觀察明顯脂肪樣變性,細胞排列致密,肝血竇體積回升,肝細胞排列規(guī)則,少有淋巴細胞聚集,與模型組相比,希望液組172個差異蛋白顯著上調(diào),140個差異蛋白顯著下調(diào),與肝臟結構、代謝、功能及調(diào)控有關的多條通路相關蛋白顯著回調(diào)。結論:臭氧可破壞大鼠肝臟組織結構,誘發(fā)多通道蛋白差異性改變,影響分子表達,希望液能夠回調(diào)吸入臭氧致衰老大鼠肝損傷引起的SOD、GSH-Px、CAT含量下降及MDA含量上升,修復肝臟組織結構和形態(tài)變化,并通過調(diào)節(jié)與肝臟組織結構、功能、代謝等相關的多條通路,阻止氧化應激,建立內(nèi)環(huán)境新穩(wěn)態(tài),對于臭氧引起衰老大鼠的肝臟損傷具有保護作用。
【圖文】：

染色質(zhì)濃縮；陽性藥組部分肝細胞排列欠規(guī)則，肝細胞出現(xiàn)腫脹，肝細胞細胞核仍居中，逡逑少有淋巴細胞聚集；希望液低、中、高劑量組上述情況減輕，無明顯脂肪樣變性，，細胞逡逑排列致密，肝血竇體積回升，肝細胞排列規(guī)則，少有淋巴細胞聚集，結果見圖１。逡逑形態(tài)計量結果顯示，與空白組比較，模型組肝細胞體積比升高（Ｐ＜0．邋０１）；與模型逡逑組相比，維生素Ｅ組和希望液低、中、高劑量組肝細胞體積比回降（Ｐ＜０．邋０１），結果見逡逑表２。逡逑１７逡逑

其中模型組與空白組相比顯著變化的蛋白共２７５個，利用ＫＥＧＧ共富集出通逡逑路１４條，主要有蛋白質(zhì)消化和吸收、胰腺分泌、視黃醇代謝、藥物代謝－細胞色素Ｐ４５０、逡逑代謝途徑、酪氨酸代謝、核糖體，見圖２。逡逑ＫＥＧＧ－ＰＡＴＨＷＡＹ逡逑Ｐｅｎｔｏｓｅ邋ａｎｄ邋ｇｌｕｃｕｒｏｎａｔｅ邋ｉｎｔｅｒ邋ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎｓ邋ｗｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍ逡逑Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ邋ｏｆ邋ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃｓ邋ｂｙ邋ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ邋Ｐ４５０邋ｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍ逡逑Ａｓ邋ｃｏ邋ｒｂａｒｅ邋ａｎ邋ｄ邋ａｌ邋ｒａｔｅ邋ｍｅｔａ邋ｂ邋ｏｌ邋ｅ邋ｒｒ：邋■■■■■■■■■■■■■逡逑Ｒｉｂｏｓｏｍｅ邋ｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍ逡逑Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ邋ｐａｔｈｗａｙ－邋ｍｍｍｍｍｍａｍｍｍｍａｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍ逡逑Ｒｅｔｉｎｏｌ邋ｍｅｔｄｂｏｌｅｒｒ邋ｗｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍｍ逡逑Ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ邋ａｎｄ邋ａｂｓｏｒｐｔｉｏｒ邋廠丨…■■邋邐：邐１邐■邋■邋１邋■邐■邋邐邋｜邐邐邐邋）逡逑０邐１邐２邐３邐４邐５逡逑－ｌｏｇ邋Ｐ－ｖａｌｕｅ逡逑圖２模型組比空白組顯著變化蛋白ＫＥＧＧ信號通路富集逡逑對差異蛋白進行分析，發(fā)現(xiàn)差異蛋白主要涉及肝細胞的形態(tài)，代謝，機能及其核受體逡逑調(diào)控，富聚于多條通路。模型組肝細胞損害的蛋白組學特征，即實驗方案中，與空白組比逡逑較，模型組動物，即大鼠吸入臭氧后的肝損傷特征。逡逑３．邋３．邋１．邋３．邋１模型組與空白組相比肝細胞結構相關蛋白的主要變化逡逑嘌呤代謝途徑：參考ＫＥＧＧ嘌呤代謝途徑
【學位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

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本文編號：2606960