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黑虎掌菌子實體粗多糖制備及其生物活性研究

發(fā)布時間:2020-03-26 05:56
【摘要】:黑虎掌菌,學名棗翹鱗肉齒菌(Sarcodon imbricatus(l.ex Fr.)Karst),在我國歷史上被稱為國寶珍品。本文主要針對四川和云南兩產(chǎn)地的黑虎掌菌粗多糖提取得率及其生物活性進行研究與比較。首先,熱水浸提法提取黑虎掌菌子實體粗多糖(Sarcodon imbricatus polysaccharides,SP,其中YSP-云南;SSP-四川),響應面法建立多糖提取得率(Y)與提取溫度(X1)、提取時間(X2)以及水料比(X3)之間的二次多項式回歸方程。實驗結(jié)果顯示,最優(yōu)提取條件為YSP:提取時間為3.1 h,提取溫度為91℃,水料比為60:1,多糖得率為16.75%;SSP:提取時間為3.1 h,提取溫度為93℃,水料比為58:1,多糖得率為13.93%,明顯高于目前已報道的黑虎掌菌粗多糖最高提取率11%。以黑虎掌菌子實體乙酸乙酯相、正丁醇相及多糖相作樣品,黑曲霉菌、銅綠假單胞桿菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌以及地桿菌作供試菌,抑菌圈法檢測各相的抑菌活性。結(jié)果顯示:四川黑虎掌菌乙酸乙酯相對枯草芽孢桿菌、地桿菌、大腸桿菌及金黃色葡萄球菌均有一定的抑菌活性,且枯草芽孢桿菌的抑菌效果最為明顯(抑菌圈直徑12 mm),而正丁醇相和多糖相均無明顯的抑菌效果;云南黑虎掌菌乙酸乙酯相對地桿菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌及銅綠假單胞桿菌有抑菌活性,且地桿菌的抑菌抑菌效果最為顯著(抑菌圈直徑14mm),同樣正丁醇相和多糖相無明顯的抑菌效果。以YSP與SSP為樣品,Vc為陽性對照,羥基、DPPH以及超氧陰離子自由基清除率為檢測指標,評價兩個產(chǎn)地黑虎掌菌粗多糖體外抗氧化活性。結(jié)果顯示:黑虎掌菌粗多糖的抗氧化活性表現(xiàn)出一種濃度依賴性。其中SSP的DPPH、超氧陰離子及羥基自由基最高清除率分別為:86.14%、71.78%和99.98%,均高于對應的YSP清除率76.54%、58.52%和99.93%,且兩者的羥基自由基清除率均高于Vc(87.97%),但DPPH自由基和超氧陰離子清除率均低于Vc(94.71%和99.57%)。而對四川黑虎掌菌進行不同方法提取,所得SSP(水提)與SSP-1(酶提),比較其抗氧化活性,結(jié)果顯示:SSP-1的抗氧化各指標均高于SSP,而且SSP-1的DPPH自由基最高清除率(99.91%)高于Vc(94.71%)。以體外生物活性檢測結(jié)果為基礎(chǔ),研究SSP的小鼠體內(nèi)抗氧化及增強免疫力活性。建立小鼠免疫抑制模型,黃芪多糖(AP)作陽性對照,檢測血清及肝勻漿中MDA、SOD、GSH-Px和T-AOC水平,推斷SSP體內(nèi)抗氧化能力。同時以小鼠免疫器官指數(shù)、足后趾遲發(fā)性變態(tài)反應(DTH)、血清中免疫球蛋白和IL-2的生成水平及氧化因子水平為指標,評價SSP免疫力活性;結(jié)果顯示:SSP通過增加血清中免疫球蛋白和免疫因子水平,增強胸腺和脾臟的器官指標,并中和氧化應激反應,提高環(huán)磷酰胺誘導免疫抑制小鼠的免疫力。
【學位授予單位】:吉林大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R284;R285

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本文編號:2601045

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