本文關(guān)鍵詞：普羅布考對(duì)PAN致足細(xì)胞損傷模型中mTOR及氧化應(yīng)激水平影響

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【摘要】：目的觀察普羅布考對(duì)氨基核苷嘌呤霉素(PAN)致小鼠永生化足細(xì)胞損傷模型哺乳類(lèi)動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及氧化應(yīng)激水平的影響,探討普羅布考的腎臟保護(hù)作用機(jī)制。方法 PAN刺激體外培養(yǎng)的足細(xì)胞24h,建立足細(xì)胞損傷模型。采用CCK-8方法檢測(cè)不同濃度普羅布考作用下PAN損傷足細(xì)胞的細(xì)胞存活率。將足細(xì)胞隨機(jī)分為正常組、PAN組(PAN 50mg/L)、普羅布考組(PAN 50mg/L+普羅布考40μmol/L),予以相應(yīng)藥物刺激24h。采用熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)DCFH-DA熒光探針標(biāo)記的足細(xì)胞中活性氧(ROS)水平的變化。采用熒光顯微鏡檢測(cè)DCFH-DA熒光探針標(biāo)記的足細(xì)胞熒光強(qiáng)度的變化。采用Western-blot方法檢測(cè)各組足細(xì)胞mTOR蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 CCK-8方法檢測(cè)結(jié)果顯示,PAN造成足細(xì)胞損傷后加入濃度為20、40、100μmol/L普羅布考均使足細(xì)胞活性上升,與0μmol/L普羅布考組比較,差異有顯著性(F=1 959.00,P0.05),其濃度為40μmol/L時(shí)作用最明顯。熒光顯微鏡檢測(cè)結(jié)果顯示,PAN組足細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度增強(qiáng)。DCF熒光強(qiáng)度檢測(cè)結(jié)果顯示,PAN組細(xì)胞內(nèi)ROS生成明顯升高,與正常組比較,差異有顯著性(F=33 525.19,P0.05);普羅布考組ROS生成明顯減少,與PAN組比較,差異有顯著性(P0.05)。Western-blot方法檢測(cè)結(jié)果顯示,PAN可使mTOR表達(dá)水平明顯升高,與正常組比較,差異有顯著性(F=179.55,P0.05);普羅布考40μmol/L共處理細(xì)胞后,mTOR表達(dá)水平下降,與PAN組比較,差異有顯著性(P0.05)。結(jié)論普羅布考可通過(guò)下調(diào)PAN導(dǎo)致的mTOR激活,降低ROS生成,減輕氧化應(yīng)激水平,從而抑制足細(xì)胞損傷。
【作者單位】： 青島大學(xué)附屬醫(yī)院腎病內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 普羅布考 嘌呤霉素 足細(xì)胞 他克莫司結(jié)合蛋白質(zhì)類(lèi) 氧化性應(yīng)激
【基金】：青島市科技局課題(11-2-3-1-(2)-nsh)
【分類(lèi)號(hào)】：R965
【正文快照】： 普羅布考具有抗氧化、抗炎、穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣硬化斑塊、改善血管內(nèi)皮功能、抑制內(nèi)膜增生及預(yù)防術(shù)后狹窄等作用。與心血管疾病相似,氧化應(yīng)激在終末期腎病中同樣發(fā)揮著重要的作用�；钚匝�(ROS)主要來(lái)源于浸潤(rùn)的中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和腎臟的固有細(xì)胞,ROS可以通過(guò)一系列作用機(jī)制導(dǎo)致

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本文編號(hào)：990506