本文關(guān)鍵詞：重組人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體突變體質(zhì)控方法與質(zhì)量標準的建立

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【摘要】：目的建立重組人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體突變體的質(zhì)控方法和質(zhì)量標準。方法利用乳腺癌細胞MDA-MB-231增殖抑制試驗測定重組人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體突變體的生物學(xué)活性;RP-HPLC和SECHPLC測定其純度;胰酶酶切,HPLC測定其肽圖;熒光定量PCR檢測E.coli宿主DNA殘留量;ELISA法測定宿主蛋白殘留量;Edman降解法進行N-末端序列測定;水平等電聚焦電泳法測定等電點;其余檢測項目按《中國藥典》三部(2010版)規(guī)定進行。同時對通常在原液中進行檢定的宿主DNA殘留、菌體蛋白殘留、N-末端序列測定進行初步的方法驗證,考察其在成品中進行檢測的可行性。結(jié)果經(jīng)初步驗證,在成品中進行宿主DNA殘留、菌體蛋白殘留、N-末端序列測定具有可行性,用建立的方法對重組人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體突變體成品進行檢定,各項指標均符合《人用重組DNA制品質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則》和《中國藥典》三部(2010版)的要求。結(jié)論建立的質(zhì)控方法和質(zhì)量標準具有保證產(chǎn)品安全、有效、質(zhì)量可控的特點,可用于該類產(chǎn)品的常規(guī)檢定。同時只對成品進行質(zhì)控的方法和質(zhì)量標準對同類產(chǎn)品的質(zhì)量控制具有借鑒意義。
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院重組藥物室;
【關(guān)鍵詞】： 重組人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體突變體 質(zhì)量控制 生物學(xué)活性
【基金】：863計劃項目(2012AA020805) 國家科技重大專項項目(2012ZX09304010)
【分類號】：R927
【正文快照】： 腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(tumor necrosisfactor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)是腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)超家族成員之一,其c DNA編碼全長為281個氨基酸的前體蛋白,其中第114~281位氨基酸為其可溶性片段。TRAIL能夠選擇性誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡,

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本文編號：961591