本文關(guān)鍵詞：高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定微生物酶法產(chǎn)L-丙氨酰-L-谷氨酰胺反應(yīng)體系中5種物質(zhì)及其樣品處理方法對(duì)色譜峰的影響分析

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【摘要】：建立了同時(shí)測(cè)定微生物酶法產(chǎn)L-丙氨酰-L-谷氨酰胺反應(yīng)體系中5種物質(zhì)(L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、L-谷氨酰胺、L-丙氨酸甲酯、L-谷氨酸、L-丙氨酰-L-丙氨酸)的高效液相色譜分析方法�？疾炝藰悠诽幚碇写嬖诘陌l(fā)酵液、磷酸、三氯乙酸對(duì)色譜峰的影響,建立了一種對(duì)色譜峰無干擾的樣品處理方法。選用鄰苯二甲醛(OPA)為衍生劑,以在線衍生的方式實(shí)現(xiàn)了標(biāo)準(zhǔn)品或樣品的柱前自動(dòng)衍生。選用C18色譜柱進(jìn)行分離,柱溫40℃,以12.5 mmol/L磷酸鹽緩沖液(88%,pH 7.4)與12%乙腈為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫,流速為1 m L/min,在λex=338 nm,λ_(em)=450 nm下進(jìn)行熒光檢測(cè),外標(biāo)法定量。結(jié)果顯示,該色譜條件下5種物質(zhì)的測(cè)定線性范圍廣,相關(guān)系數(shù)均大于0.999 4。低、中、高3組加標(biāo)水平下的回收率為93.5%~104.9%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)小于7%。1日內(nèi)間隔2 h進(jìn)行6次進(jìn)樣,5種物質(zhì)保留時(shí)間的RSD均小于0.12%,峰面積RSD均小于1.2%。該方法操作簡單,分離度與靈敏度高,定量精確,重復(fù)性好。
【作者單位】： 江南大學(xué)生物工程學(xué)院工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室糖化學(xué)與生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 高效液相色譜法 柱前自動(dòng)化衍生 L-丙氨酰-L-谷氨酰胺反應(yīng)體系 樣品處理方法
【基金】：國家自然科學(xué)基金(30970058,21176106) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK2012554)
【分類號(hào)】：R927;O657.72
【正文快照】： L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-Alanyl-L-glutamine,L-Ala-L-Gln)是一種由L-丙氨酸與L-谷氨酰胺兩種氨基酸縮合形成的二肽,簡稱丙谷二肽。作為一種條件必需氨基酸[1],L-谷氨酰胺(L-Gln)在醫(yī)藥臨床領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,可作為糖異生和尿素合成的原料[2]、神經(jīng)遞質(zhì)的前體[3],可促進(jìn)損傷組織的

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本文編號(hào)：870603