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破傷風(fēng)梭菌無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基發(fā)酵及純化工藝的探索

發(fā)布時(shí)間:2017-09-14 07:20

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【摘要】:目的:開發(fā)優(yōu)化破傷風(fēng)梭菌無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基;摸索層析法純化破傷風(fēng)毒素的工藝。方法:分別用蛋白胨和酵母浸出物替代培養(yǎng)基中動(dòng)物源性成分作為氮源。2 L發(fā)酵罐發(fā)酵比較菌體生長(zhǎng)密度和產(chǎn)毒量;發(fā)酵液經(jīng)離心,切向流過濾回收,通過柱層析方法對(duì)發(fā)酵回收液進(jìn)行純化。柱層析時(shí)比較不同洗脫條件下毒素回收率。結(jié)果:蛋白胨可更好的供菌體生長(zhǎng),但產(chǎn)毒量較低;酵母浸出物可作為氮源供菌體生長(zhǎng),菌體濃度相對(duì)較低,但最高產(chǎn)毒量可達(dá)52 Lf·m L-1;陰離子柱層析純化可使破傷風(fēng)毒素純度大幅提高,毒素回收率在80%左右。結(jié)論:無(wú)動(dòng)物源培養(yǎng)基發(fā)酵破傷風(fēng)梭菌有高產(chǎn)毒量,陰離子柱層析可作為破傷風(fēng)毒素純化方法。
【作者單位】: 天津科技大學(xué);天津康希諾生物技術(shù)有限公司天津市呼吸道細(xì)菌重組及結(jié)合疫苗企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】破傷風(fēng)梭菌 無(wú)動(dòng)物源 酵母浸出物 蛋白胨 陰離子交換層析
【基金】:國(guó)家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)(2015ZX09102009)
【分類號(hào)】:R915
【正文快照】: 及結(jié)合疫苗企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津300457)破傷風(fēng)梭菌在厭氧條件下可產(chǎn)生破傷風(fēng)痙攣毒素(以下簡(jiǎn)稱破傷風(fēng)毒素),在沒有經(jīng)過免疫的人群中依然有高感染率和高死亡率[1]。破傷風(fēng)毒素為蛋白質(zhì),理論相對(duì)分子質(zhì)量為158 000[2]。從我國(guó)2008-2009年調(diào)查情況來(lái)看,新生兒破傷風(fēng)發(fā)病率呈逐年

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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本文編號(hào):848643

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