本文關(guān)鍵詞：兩種海洋生物抗炎活性成分研究

  更多相關(guān)文章： 軟珊瑚 Sinularia flexibilis 海綿 Axinella sp. 抗炎

【摘要】：目的:為篩選出具有高效低毒、臨床應(yīng)用前景的先導(dǎo)化合物,本文對采自中國南海海洋生物軟珊瑚Sinularia flexibilis和海綿Axinella sp.的化學(xué)成分及其抗炎生物活性進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。方法:將采集的軟珊瑚Sinularia flexibilis進(jìn)行甲醇提取,海綿Axinella sp.進(jìn)行乙醇提取后,對軟珊瑚的二氯甲烷層萃取物和海綿的正丁醇萃取物進(jìn)行分離、純化和結(jié)構(gòu)解析。綜合利用半制備HPLC,減壓柱色譜,常壓柱色譜,凝膠柱色譜,制備薄層色譜等分離純化方法,從軟珊瑚Sinularia flexibilis樣品和海綿Axinella sp.樣品中獲得單體化合物。利用理化性質(zhì),并結(jié)合質(zhì)譜(MS)、核磁共振波譜(1H NMR、13C NMR、2D NMR)等現(xiàn)代波譜技術(shù),參考相關(guān)文獻(xiàn),確定化合物的平面結(jié)構(gòu)和立體構(gòu)型。對分離得到的單體化合物,在巨噬細(xì)胞(RAW 264.7)水平采用MTT法對抗炎活性進(jìn)行了初步評價。在非細(xì)胞毒劑量下,利用Griess法檢測各單體化合物對LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞釋放NO的抑制活性。用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA),測定LPS誘導(dǎo)下,部分化合物對抑制RAW264.7巨噬細(xì)胞分泌腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的水平的影響。結(jié)果:從軟珊瑚Sinularia flexibilis樣品中分離得到11個單體化合物,海綿Axinella sp.樣品獲得9個單體化合物,分別命名和鑒定為:sinulaflexiolide M(1),sinulaflexiolide N(2),sinulaflexiolide O(3),sinulaflexiolide P(4),sinulaflexiolide Q(5),sinulaflexiolide R(6),sinulaflexiolide I(7),sinulaflexiolide L(8),(-)14-deoxycrassin(9),dihydrosinularin(10),24-亞甲基膽甾醇(11),dibromophakellin(12),monobromophakellin(13),debromohymenialdisine(14),hymenialdisine(15),aldisin(16),3-bromoaldisin(17),尼克酰胺(18),胸腺嘧啶(19)及尿嘧啶(20)。經(jīng)確認(rèn),化合物1-6為未見文獻(xiàn)報道的新化合物,化合物1-10為西松烷型二萜類化合物,化合物12-17為吡咯生物堿類化合物。且化合物18-20首次從海綿Axinella sp.中分離得到。在非細(xì)胞毒劑量下,利用Griess法檢測各單體化合物對LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞釋放NO的抑制活性,結(jié)果顯示化合物1、2、3、4、7、8、10、12、14、15、19對NO的生成有一定的抑制作用,在10μM濃度下,抑制率分別為18.4%、14.46%、18.40%、13.14%、15.77%、14.66%、55.6%、10.84%、11.21%、13.46%、9.52%。采用ELISA法,測定在LPS誘導(dǎo)下,部分單體對RAW264.7細(xì)胞分泌TNF-α抑制水平的影響,檢測結(jié)果為化合物12、14對RAW264.7細(xì)胞分泌TNF-α有較弱的抑制活性,在10μM濃度下,抑制率分別為5.08%和0.70%。結(jié)論:該研究在一定程度上發(fā)展并豐富了中國南海軟珊瑚Sinularia flexibilis和海綿Axinella sp.的生物多樣性和化學(xué)多樣性,也為化學(xué)分類學(xué)提供了化合物基礎(chǔ),補(bǔ)充了我國南海軟珊瑚和海綿代謝產(chǎn)物的研究內(nèi)容,為海洋天然產(chǎn)物的研發(fā)提供了科學(xué)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：軟珊瑚 Sinularia flexibilis 海綿 Axinella sp. 抗炎
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R914
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語10-12
• 前言12-15
• 研究現(xiàn)狀、成果12-13
• 研究目的、方法13-15
• 一、軟珊瑚Sinularia flexibilis化學(xué)成分的分離和鑒定15-58
• 1.1 對象和方法15-19
• 1.1.1 實驗儀器15
• 1.1.2 實驗材料15-17
• 1.1.3 軟珊瑚Sinularia flexibilis提取分離過程17-19
• 1.2 結(jié)果19-57
• 1.2.1 軟珊瑚Sinularia flexibilis的化合物結(jié)構(gòu)19-20
• 1.2.2 軟珊瑚Sinularia flexibilis化合物的結(jié)構(gòu)解析和鑒定20-57
• 1.3 討論與小結(jié)57-58
• 二、海綿Axinella sp.化學(xué)成分的分離和鑒定58-67
• 2.1 對象和方法58-61
• 2.1.1 實驗儀器58
• 2.1.2 實驗材料58
• 2.1.3 海綿Axinella sp.提取分離過程58-61
• 2.2 結(jié)果61-66
• 2.2.1 海綿Axinella sp.的化合物結(jié)構(gòu)61-62
• 2.2.2 海綿Axinella sp.化合物的結(jié)構(gòu)解析和鑒定62-66
• 2.3 討論與小結(jié)66-67
• 三、軟珊瑚和海綿中化學(xué)成分的抗炎活性研究67-73
• 3.1 對象和方法67-69
• 3.1.1 實驗儀器67
• 3.1.2 實驗材料67-68
• 3.1.3 抗炎活性評價基本原理68
• 3.1.4 抗炎活性成分的篩選68-69
• 3.2 結(jié)果69-72
• 3.2.1 細(xì)胞毒性測定69-70
• 3.2.2 NO測定70-71
• 3.2.3 TNF-α測定71-72
• 3.3 討論與小結(jié)72-73
• 結(jié)論73-74
• 參考文獻(xiàn)74-77
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明77-78
• 綜述 西松烷二萜類成分的研究進(jìn)展78-100
• 綜述參考文獻(xiàn)92-100
• 致謝100-101
• 個人簡歷101

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本文編號：784399