本文關(guān)鍵詞：新型載體前藥透明質(zhì)酸苯丁酸酯的合成、表征及活性研究

  更多相關(guān)文章： 載體 前體藥物 透明質(zhì)酸 苯丁酸 含量測定 腫瘤細(xì)胞抑制

【摘要】：癌癥治療常因藥物缺乏腫瘤細(xì)胞特異識別能力,對人體正常組織傷害較大。腫瘤靶向給藥體系的研究正是為了提高藥物作用的靶向性,增強(qiáng)藥效,降低毒副作用。透明質(zhì)酸(Hyaluronic Acid, HA)是一種天然的糖胺聚糖,具有高度黏彈性、可塑性、非免疫原性、良好的生物相容性及可降解性等優(yōu)良特性,現(xiàn)已成為藥物遞送研究的熱點(diǎn)。HA既可以作為藥物的大分子載體,又可與多種細(xì)胞表面受體特異性結(jié)合,其中最主要的受體CD44高表達(dá)于腫瘤細(xì)胞表面。利用該特性,HA可靶向遞送抗腫瘤藥物至腫瘤組織和細(xì)胞內(nèi),提高藥物對腫瘤細(xì)胞作用的有效性,減少用藥劑量,降低不良反應(yīng)。除此之外,HA作為載體能夠利用腫瘤組織的高通透性及滯留性,聚集在腫瘤組織中,增強(qiáng)靶向性。苯丁酸(Phenylbutyrate Acid, PBA)是芳香脂肪酸結(jié)構(gòu)化合物,可較為方便地與透明質(zhì)酸雙糖單位上羥基發(fā)生酯化反應(yīng),適合作為模型藥連接至HA。PBA對腫瘤細(xì)胞株具有廣譜誘導(dǎo)能力,可通過多種調(diào)控方式促使腫瘤細(xì)胞向正常細(xì)胞分化成熟,促進(jìn)白細(xì)胞聚集,改變腫瘤的免疫原性。PBA與載體結(jié)合形成載體前藥,有利于PBA在靶點(diǎn)周圍聚集,在體內(nèi)逐漸釋放,達(dá)到緩釋及靶向給藥作用。本文選用透明質(zhì)酸作為藥物載體,與抗腫瘤藥物苯丁酸酯化結(jié)合,設(shè)計(jì)成新型載體前藥透明質(zhì)酸苯丁酸酯(HA-PB),主要研究結(jié)果如下。1.本論文首次介紹了新型載體前藥透明質(zhì)酸苯丁酸酯的合成路線,將苯丁酸活化后連接到透明質(zhì)酸6位羥基上,改變反應(yīng)條件得到系列酯化產(chǎn)物,最終優(yōu)化反應(yīng)條件得到具有良好水溶性的140404、140426、140428批次HA-PB.2.通過紅外、核磁、紫外對HA-PB進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征。在紅外圖譜中,HA-PB在1735 cm-1處出現(xiàn)新的酯鍵吸收峰,表明反應(yīng)有酯鍵生成；核磁結(jié)果中,對140404、140426、140428批次HA-PB的核磁化學(xué)位移歸屬,確定由PB引入的苯環(huán)區(qū)域在低場δ7.29 ppm出現(xiàn),并分別對圖中PB苯環(huán)和HA酰胺甲基積分,計(jì)算得到三個(gè)產(chǎn)物的酯化度分別為13.2%、21.8%和34.4%。3.建立HPLC方法對合成產(chǎn)物HA-PB進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)分析。通過保留時(shí)間對照法對有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行定性,并分別作出有關(guān)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,對每個(gè)有關(guān)物質(zhì)成分進(jìn)行定量分析,計(jì)算出HA-PB的純度均99.0%。然后通過加堿降解法,充分測定HA-PB中PB含量,計(jì)算產(chǎn)物酯化度為17.1%、21.8%、30.3%,與核磁法測出結(jié)果基本一致,具有較高可信度。4.設(shè)置正常組、陰性對照組、陽性對照組、實(shí)驗(yàn)組,觀察加藥培養(yǎng)液作用于小鼠黑色素瘤細(xì)胞(B16)后,細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,初步觀察發(fā)現(xiàn)抑制能力與酯化度大小成正比關(guān)系。通過MTT比色法考察HA-PB對小鼠黑色素瘤細(xì)胞(B16)的體外抑制活性。結(jié)果表明,140404、140426、140428批次HA-PB對B16細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為0.199、0.013、0.017 mmol/L(PB當(dāng)量),均低于PB的IC50值1.277 mmol/L。初步判斷HA-PB的癌細(xì)胞抑制作用較原藥PB有了增強(qiáng)。
【關(guān)鍵詞】：載體 前體藥物 透明質(zhì)酸 苯丁酸 含量測定 腫瘤細(xì)胞抑制
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R914.5
【目錄】：

• 摘要10-12
• ABSTRACT12-15
• 符號說明15-17
• 第1章 緒論17-27
• 1.1 引言17
• 1.2 透明質(zhì)酸17-22
• 1.2.1 透明質(zhì)酸結(jié)構(gòu)特性17-18
• 1.2.2 透明質(zhì)酸及其衍生物作為藥物載體的研究進(jìn)展18-19
• 1.2.3 透明質(zhì)酸與CD44受體19-21
• 1.2.4 以透明質(zhì)酸為載體的抗腫瘤前體藥物研究進(jìn)展21-22
• 1.3 苯丁酸22-25
• 1.3.1 苯丁酸結(jié)構(gòu)及抗腫瘤活性研究進(jìn)展22-24
• 1.3.2 苯丁酸抗腫瘤活性機(jī)制24-25
• 1.4 本論文研究內(nèi)容25-27
• 第2章 新型載體前藥透明質(zhì)酸苯丁酸酯合成27-32
• 2.1 材料與儀器27
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法27-29
• 2.2.1 透明質(zhì)酸苯丁酸酯合成路線設(shè)計(jì)27-29
• 2.2.2 透明質(zhì)酸十六烷基三甲基銨鹽(HA-CTA)的制備29
• 2.2.3 苯丁酸活化29
• 2.2.4 透明質(zhì)酸苯丁酸酯的合成29
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-31
• 2.3.1 合成產(chǎn)物29-30
• 2.3.2 性狀觀察30-31
• 2.4 討論31-32
• 第3章 透明質(zhì)酸苯丁酸酯結(jié)構(gòu)表征及酯化度確定32-47
• 3.1 材料與儀器32
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法32-33
• 3.2.1 外光譜(FT-IR)表征32
• 3.2.2 核磁共振氫譜表征及酯化度確定32
• 3.2.3 紫外吸光度法表征及產(chǎn)物中苯丁酸含量測定32-33
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-45
• 3.3.1 紅外光譜(FT-IR)表征結(jié)果33-35
• 3.3.2 核磁共振氫譜(~1H-NMR)表征及酯化度確定35-39
• 3.3.3 紫外吸光度法(UV)表征結(jié)果39-45
• 3.4 討論45-47
• 第4章 HPLC法測定透明質(zhì)酸苯丁酸酯純度及酯化度47-62
• 4.1 材料與儀器47
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法47-49
• 4.2.1 色譜條件的建立47
• 4.2.2 供試品溶液的配制47-48
• 4.2.3 有關(guān)物質(zhì)定性方法48
• 4.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立48
• 4.2.5 HPLC法測定HA-PB純度48-49
• 4.2.6 HPLC法測定HA-PB酯化度49
• 4.2.7 方法學(xué)考察49
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果49-60
• 4.3.1 有關(guān)物質(zhì)定性結(jié)果50-52
• 4.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線建立結(jié)果52-55
• 4.3.3 HPLC法HA-PB純度測定結(jié)果55-56
• 4.3.4 HPLC法HA-PB酯化度測定結(jié)果56-57
• 4.3.5 方法學(xué)考察結(jié)果57-60
• 4.4 討論60-62
• 第5章 透明質(zhì)酸苯丁酸酯前藥體外抑癌活性的研究62-72
• 5.1 材料與儀器62-63
• 5.2 實(shí)驗(yàn)方法63-64
• 5.2.1 小鼠黑色素瘤細(xì)胞(B16)培養(yǎng)63
• 5.2.2 實(shí)驗(yàn)藥液的配制63-64
• 5.2.3 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察64
• 5.2.4 MTT法檢測抑制率64
• 5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果64-70
• 5.3.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察64-68
• 5.3.2 抑癌活性評價(jià)結(jié)果68-70
• 5.4 討論70-72
• 總結(jié)與展望72-74
• 參考文獻(xiàn)74-80
• 致謝80-81
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄81-82
• 學(xué)位論文評閱及答辯情況表82

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 施銘崗,黃強(qiáng),董軍,孫志方,蘭青;誘導(dǎo)分化劑與細(xì)胞毒化療藥聯(lián)合治療可移植性人腦膠質(zhì)瘤的實(shí)驗(yàn)研究[J];癌癥;2002年10期

2 畢勝;劉宏鳴;;谷氨酰胺在腫瘤細(xì)胞中的代謝及意義[J];海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年10期

3 孫李平;王曉宇;朱全剛;高申;;透明質(zhì)酸納米給藥載體的研究進(jìn)展[J];藥學(xué)服務(wù)與研究;2012年04期

，

本文編號：772773