本文關(guān)鍵詞：CYP2C8及CYP3A4細(xì)胞表達(dá)體系的構(gòu)建及其在小分子激酶藥物對(duì)紫衫醇代謝途徑抑制研究中的應(yīng)用

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【摘要】：構(gòu)建CYP2C8及其3種突變體細(xì)胞表達(dá)體系,以紫杉醇為底物研究CYP2C8基因多態(tài)性對(duì)其酶活性的影響,以及構(gòu)建CYP2C8和CYP3A4共轉(zhuǎn)染細(xì)胞體系研究小分子激酶抑制劑對(duì)紫杉醇代謝途徑的抑制。根據(jù)基因文庫分別合成CYP3A4以及CYP2C8及其3種突變體CYP2C8*2(805AT)、CYP2C8*3(416GA,1196AG)、CYP2C8*4(792CG)的基因編碼片段,將其連接到PEGFP-N1表達(dá)質(zhì)粒,測序驗(yàn)證。將CYP2C8野生型及其突變體分別轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞,24 h后加入紫杉醇進(jìn)行孵育,通過建立好的LC-MS/MS方法對(duì)代謝物進(jìn)行定量分析。同時(shí),也將野生型CYP2C8和CYP3A4質(zhì)粒按一定的濃度比轉(zhuǎn)入Hep G2細(xì)胞構(gòu)建共表達(dá)體系。并篩選出合適的質(zhì)粒濃度比轉(zhuǎn)染細(xì)胞,在加入紫杉醇孵育時(shí),同時(shí)加入小分子激酶抑制劑,考察小分子激酶抑制劑對(duì)紫杉醇代謝途徑的抑制作用。結(jié)果表明,CYP2C8*4代謝酶對(duì)紫杉醇的代謝能力存在明顯差異,其中CYP2C8*2和CYP2C8*3代謝活性分別是野生型的81%(P0.05)和87%(P0.05),而CYP2C8*4則是野生型的65%(P0.01)。尼洛替尼完全抑制了紫杉醇的代謝,阿法替尼對(duì)紫杉醇的兩條代謝途徑抑制達(dá)30%,而伊馬替尼選擇性抑制了CYPD3A4的活性。不同基因型CYP2C8對(duì)紫杉醇的代謝存在差異,可能是導(dǎo)致臨床療效不同的原因。小分子激酶抑制劑在與紫杉醇聯(lián)合使用時(shí),對(duì)紫杉醇代謝的抑制各不相同。
【作者單位】： 蘇州大學(xué)藥學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 紫杉醇 代謝酶 基因多態(tài)性 小分子激酶抑制劑 藥物相互作用
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81473278)
【分類號(hào)】：R96
【正文快照】： CYP2C8是CYP2C家族中最晚發(fā)現(xiàn)的一個(gè)成員,大量的實(shí)驗(yàn)研究CYP酶的多態(tài)性,以及它們與個(gè)大約占CYP2C家族的26%。CYP2C8主要分布在肝體化差異的關(guān)系在紫杉醇的藥效和毒性中起到的作臟,占肝CYP代謝酶總量的7%;其在肝臟外的組用[13]。例如,CYP2C8*3與高效的臨床反應(yīng)以及神織中也存在

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1 黃明;;利福平誘導(dǎo)異煙肼釋放肼——用異煙肼及利福平治療結(jié)核一個(gè)可能引起肝炎的原因[J];國外醫(yī)學(xué).呼吸系統(tǒng)分冊(cè);1987年02期

2 蔡悠悠;夏媛媛;谷元;劉昌孝;司端運(yùn);;3-乙�；�-11-羰基-β-乳香酸在大鼠體內(nèi)的代謝途徑研究[J];中草藥;2013年17期

3 ;[J];;年期

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本文編號(hào)：654115