本文關(guān)鍵詞：天青蛋白基因在酮古龍酸菌中的克隆與表達(dá)

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【摘要】：目的克隆來源于脫氮副球菌的天青蛋白基因(pden1359),并在酮古龍酸菌(Ketogulonicigenium sp.)Rif-B-003中表達(dá)。方法利用酶切酶連的方法構(gòu)建重組質(zhì)粒pBBR1 MCS-2-pden1359,并以接合轉(zhuǎn)移的方法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到菌株Rif-B-003中。采用雙酶切、PCR驗(yàn)證獲得陽性重組菌Rif-B-003/pBBR1 MCS-2-pden1359,SDS-PAGE檢測Pden1359的蛋白表達(dá),分光光度法檢測菌體內(nèi)過氧化氫和超氧陰離子濃度。結(jié)果成功構(gòu)建重組質(zhì)粒pBBR1 MCS-2-pden1359并導(dǎo)入菌株RifB-003中獲得重組菌Rif-B-003/pBBR1 MCS-2-pden1359,重組菌體SDS-PAGE顯示在目的蛋白處有表達(dá)條帶。在發(fā)酵各個(gè)時(shí)期,重組菌株比對照菌株Rif-B-003體內(nèi)過氧化氫濃度均降低,最多降低1.05×10-8umol·cfu~(-1)(16.21%),超氧陰離子濃度也降低,最多降低8.52×10~(-1)1umol·cfu~(-1)(13.98%)。結(jié)論來源于脫氮副球菌的天青蛋白基因pden1359在酮古龍酸菌Rif-B-003中成功表達(dá),可以降低菌體內(nèi)活性氧水平。
【作者單位】： 沈陽藥科大學(xué)生命科學(xué)與生物制藥學(xué)院;東北制藥集團(tuán)公司;
【關(guān)鍵詞】： 脫氮副球菌 天青蛋白基因 酮古龍酸菌 -酮基-L-古龍酸
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31370125)
【分類號】：R977.2
【正文快照】： 維生素C(L-抗壞血酸,vitamin C)是一種水溶性維生素,既是營養(yǎng)強(qiáng)化劑,又可以作為功能性的抗氧化劑�！熬S生素C二步發(fā)酵法”是我國獨(dú)創(chuàng)的生產(chǎn)工藝,包括2個(gè)步驟:第一步為醇糖轉(zhuǎn)化,是在氧化葡萄糖酸桿菌(Gluconobacter oxy-dans)的作用下將D-山梨醇氧化為L-山梨糖,其轉(zhuǎn)化機(jī)制和相，

本文編號：597297