本文關(guān)鍵詞：納豆激酶檢測(cè)體系的建立及其跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)途徑初探，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立納豆激酶(nattokinase,NK)酶聯(lián)檢測(cè)體系,探討其跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。方法采用雜交瘤技術(shù)篩選抗NK的單克隆抗體,競(jìng)爭(zhēng)抑制法鑒定單抗識(shí)別的抗原表位,Western Blot測(cè)定單抗特異性,雙抗夾心ELISA法進(jìn)行單抗靈敏度測(cè)定,Caco-2細(xì)胞模型探討NK跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制,生物信息學(xué)預(yù)測(cè)NK穿膜相關(guān)序列。結(jié)果篩選得到穩(wěn)定分泌抗體且特異性識(shí)別NK的雜交瘤細(xì)胞6株,其中3株單抗識(shí)別相近的抗原表位,其余單抗識(shí)別不同的抗原表位;6株單抗檢測(cè)NK的最小靈敏度分布為0.78~20.00ng/mL;Caco-2細(xì)胞模型顯示,胞吞作用不是NK跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的主要途徑;生物信息學(xué)提示,NK中含有3段穿膜相關(guān)序列。結(jié)論基于NK單抗建立的酶聯(lián)檢測(cè)體系,可有效監(jiān)控NK跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)過程,NK可能是依據(jù)蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)構(gòu)域直接介導(dǎo)而實(shí)現(xiàn)其腸道吸收轉(zhuǎn)運(yùn)。
【作者單位】： 成都醫(yī)學(xué)院科研實(shí)驗(yàn)中心;成都醫(yī)學(xué)院生物醫(yī)學(xué)系;成都醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 納豆激酶 單克隆抗體 跨膜轉(zhuǎn)運(yùn) 蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)構(gòu)域
【基金】：四川省教育廳項(xiàng)目(No:13ZB0220) 四川省科技廳項(xiàng)目(No:2015JY0205) 四川省衛(wèi)生廳項(xiàng)目(No:130302,130298) 成都醫(yī)學(xué)院科研基金(No:CYZ11-005) 國(guó)家級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新項(xiàng)目(No:201313705007,201313705003,201413705005)
【分類號(hào)】：R927
【正文快照】： 藥物在體內(nèi)的生物利用度與藥物胃腸粘膜通透性相關(guān)聯(lián),蛋白質(zhì)、肽類等大分子藥物因其膜透過性不甚理想,影響其生物利用度,限制了該類藥物的應(yīng)用[1]。此外,很多具有應(yīng)用前景的藥物受到人體內(nèi)各種天然屏障(如血腦屏障)的限制也難以到達(dá)靶器官或靶細(xì)胞發(fā)揮藥效,可見藥物的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 岑小波,王瑞淑,王莉,王航;成骨細(xì)胞跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)鋅特性及其機(jī)制的初步研究[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2001年01期

2 夏承來;廖端芳;;依澤替米貝及其靶點(diǎn)和膽固醇跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊(cè);2006年05期

3 趙珊珊;張強(qiáng);李靜;周艷秋;單文衛(wèi);管潔;張藜莉;趙平;;香豆素6膠束的制備及在單層上皮細(xì)胞攝取和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)研究[J];中國(guó)藥學(xué)雜志;2014年10期

4 李鳳英;何京;鐘海軍;;細(xì)胞穿透肽的研究進(jìn)展[J];中國(guó)新藥雜志;2013年15期

5 程曉華;熊玉卿;;熊果酸在Caco-2細(xì)胞單層模型中的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2009年08期

6 亓宏;巫冠中;;藥物跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)細(xì)胞模型影響因素及應(yīng)用[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年25期

7 劉宇;劉洪臣;吳霞;鄂玲玲;冷斌;;人牙周膜成纖維細(xì)胞對(duì)頭孢噻肟鈉的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)[J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2009年06期

8 顏苗;方平飛;李煥德;徐萍;鄭媚;張金嬌;;甘草次酸18位差向異構(gòu)體對(duì)P-gp底物羅丹明123在Caco-2細(xì)胞上跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的影響[J];中國(guó)藥學(xué)雜志;2012年19期

9 王斌,陳敏珠,徐叔云;白芍總甙對(duì)大鼠腹腔巨噬細(xì)胞Ca~(2+)跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的影響[J];中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;1997年03期

10 賈愛娟;譚樹華;;雙精氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)(Tat)系統(tǒng)及其在大腸桿菌分泌表達(dá)重組蛋白中的應(yīng)用[J];藥物生物技術(shù);2012年05期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 邱峰;鄭姣妮;龍瀟鴻;邱宗蔭;;蛻皮甾酮在Caco-2細(xì)胞模型中的攝取、跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)及外排研究[A];2008年中國(guó)藥學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨第八屆中國(guó)藥師周論文集[C];2008年

2 秦小清;曲恒燕;劉澤源;;中國(guó)健康人群OATP1B1基因多態(tài)性與匹伐他汀鈣片代謝的關(guān)系[A];第十二次全國(guó)臨床藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議會(huì)議論文集[C];2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 鄧?yán)?功能化膽酸二聚體的合成及陰陽離子同向跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)活性[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

2 張晨宇;小檗堿及8－羥基二氫小檗堿在小腸吸收機(jī)制的比較研究[D];華中科技大學(xué);2011年

3 張慶顥;頭孢妥侖跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)吸收機(jī)制的體內(nèi)外研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2008年

4 劉治芳;鹽酸西莫替尼對(duì)小腸上皮細(xì)胞跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)影響研究[D];中南大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：納豆激酶檢測(cè)體系的建立及其跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)途徑初探，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：441274