本文關(guān)鍵詞：納豆激酶檢測體系的建立及其跨膜轉(zhuǎn)運途徑初探，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立納豆激酶(nattokinase,NK)酶聯(lián)檢測體系,探討其跨膜轉(zhuǎn)運機制。方法采用雜交瘤技術(shù)篩選抗NK的單克隆抗體,競爭抑制法鑒定單抗識別的抗原表位,Western Blot測定單抗特異性,雙抗夾心ELISA法進行單抗靈敏度測定,Caco-2細胞模型探討NK跨膜轉(zhuǎn)運機制,生物信息學(xué)預(yù)測NK穿膜相關(guān)序列。結(jié)果篩選得到穩(wěn)定分泌抗體且特異性識別NK的雜交瘤細胞6株,其中3株單抗識別相近的抗原表位,其余單抗識別不同的抗原表位;6株單抗檢測NK的最小靈敏度分布為0.78~20.00ng/mL;Caco-2細胞模型顯示,胞吞作用不是NK跨膜轉(zhuǎn)運的主要途徑;生物信息學(xué)提示,NK中含有3段穿膜相關(guān)序列。結(jié)論基于NK單抗建立的酶聯(lián)檢測體系,可有效監(jiān)控NK跨膜轉(zhuǎn)運過程,NK可能是依據(jù)蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)構(gòu)域直接介導(dǎo)而實現(xiàn)其腸道吸收轉(zhuǎn)運。
【作者單位】： 成都醫(yī)學(xué)院科研實驗中心;成都醫(yī)學(xué)院生物醫(yī)學(xué)系;成都醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 納豆激酶 單克隆抗體 跨膜轉(zhuǎn)運 蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)構(gòu)域
【基金】：四川省教育廳項目(No:13ZB0220) 四川省科技廳項目(No:2015JY0205) 四川省衛(wèi)生廳項目(No:130302,130298) 成都醫(yī)學(xué)院科研基金(No:CYZ11-005) 國家級大學(xué)生創(chuàng)新項目(No:201313705007,201313705003,201413705005)
【分類號】：R927
【正文快照】： 藥物在體內(nèi)的生物利用度與藥物胃腸粘膜通透性相關(guān)聯(lián),蛋白質(zhì)、肽類等大分子藥物因其膜透過性不甚理想,影響其生物利用度,限制了該類藥物的應(yīng)用[1]。此外,很多具有應(yīng)用前景的藥物受到人體內(nèi)各種天然屏障(如血腦屏障)的限制也難以到達靶器官或靶細胞發(fā)揮藥效,可見藥物的跨膜轉(zhuǎn)運

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本文編號：441274