家蠅抗菌肽AMP-17抗白色念珠菌機制研究
發(fā)布時間:2025-01-09 05:08
目的:在前期證實AMP-17具有抗真菌活性基礎(chǔ)上,以白色念珠菌為指示菌,進一步從胞內(nèi)和胞外作用兩個層面探究AMP-17的抗真菌機理。方法:1.對真菌形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響:采用光學顯微鏡、掃描電鏡、透射電鏡觀察MIC濃度的抗菌肽AMP-17作用不同時間后對白色念珠菌菌體形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。2.對真菌細胞壁的影響:采用結(jié)晶紫染色法檢測AMP-17作用后白色念珠菌細胞壁完整率的變化。3.對真菌細胞膜的影響:以熒光染料DPH為探針,檢測AMP-17作用后白色念珠菌細胞膜流動性和有序性的變化;以熒光染料PI為探針,檢測AMP-17對白色念珠菌細胞膜通透性的影響;測定AMP-17作用后白色念珠菌細胞內(nèi)甘油含量變化,進而反應(yīng)胞內(nèi)滲透壓的改變。4.對真菌細胞壁、細胞膜合成相關(guān)基因表達量的影響:采用qRT-PCR法檢測AMP-17作用后白色念珠菌FKS2、ERG1、ERG5、ERG6、ERG11、MET6基因表達量的變化。5.對真菌細胞周期的影響:以PI為探針,流式細胞儀檢測AMP-17干預(yù)后,白色念珠菌細胞周期的變化。6.對真菌細胞內(nèi)活性氧的影響:以DCFH-DA為探針,多功能酶標儀及激光共聚焦顯微鏡檢測AMP-...
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號:4025198
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【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1-2光學顯微鏡觀察AMP-17對白色念珠菌形態(tài)的影響
Note:control:a、b(×1000);AMP-17groupfor8h:c、d(×1000);AMP-17groupfor16h:e、f(×1000);圖1-2光學顯微鏡觀察AMP-17對白色念珠菌形態(tài)的影響Fig.1-2Observationfort....
圖1-3AMP-17作用于白色念珠菌的掃描電鏡觀察
注:正常組:a、b(×2000);抗菌肽AMP-17作用8h組:c、d(×2000);抗菌肽AMP-17作用16h組:e、f(×2000);Note:control:a、b(×2000);AMP-17groupfor8h:c、d(×2000);AMP-17....
圖2-2抗菌肽AMP-17對白色念珠菌細胞周期影響
圖2-2抗菌肽AMP-17對白色念珠菌細胞周期影響Fig.2-2CellcycleanalysisofC.albicansassayedbyflowcytometry.(A–D)Aatafinalconcentrationof0,20....
圖2-3抗菌肽AMP-17對白色念珠菌胞內(nèi)ROS的影響(1200×)
注:*與對照組比較P<0.05;**與對照組比較P<0.01。*ComparedwithNegativecontrolP<0.05;**ComparedwithNegativecontrolP<0.01.圖2-3抗菌肽AMP-17對白色念珠菌胞內(nèi)....
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