目的:在前期證實AMP-17具有抗真菌活性基礎(chǔ)上,以白色念珠菌為指示菌,進一步從胞內(nèi)和胞外作用兩個層面探究AMP-17的抗真菌機理。方法:1.對真菌形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響:采用光學(xué)顯微鏡、掃描電鏡、透射電鏡觀察MIC濃度的抗菌肽AMP-17作用不同時間后對白色念珠菌菌體形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。2.對真菌細(xì)胞壁的影響:采用結(jié)晶紫染色法檢測AMP-17作用后白色念珠菌細(xì)胞壁完整率的變化。3.對真菌細(xì)胞膜的影響:以熒光染料DPH為探針,檢測AMP-17作用后白色念珠菌細(xì)胞膜流動性和有序性的變化;以熒光染料PI為探針,檢測AMP-17對白色念珠菌細(xì)胞膜通透性的影響;測定AMP-17作用后白色念珠菌細(xì)胞內(nèi)甘油含量變化,進而反應(yīng)胞內(nèi)滲透壓的改變。4.對真菌細(xì)胞壁、細(xì)胞膜合成相關(guān)基因表達(dá)量的影響:采用qRT-PCR法檢測AMP-17作用后白色念珠菌FKS2、ERG1、ERG5、ERG6、ERG11、MET6基因表達(dá)量的變化。5.對真菌細(xì)胞周期的影響:以PI為探針,流式細(xì)胞儀檢測AMP-17干預(yù)后,白色念珠菌細(xì)胞周期的變化。6.對真菌細(xì)胞內(nèi)活性氧的影響:以DCFH-DA為探針,多功能酶標(biāo)儀及激光共聚焦顯微鏡檢測AMP-...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-2光學(xué)顯微鏡觀察AMP-17對白色念珠菌形態(tài)的影響

Note：control：a、b(×1000）；AMP-17groupfor8h：c、d(×1000）；AMP-17groupfor16h：e、f(×1000）；圖1-2光學(xué)顯微鏡觀察AMP-17對白色念珠菌形態(tài)的影響Fig.1-2Observationfort....

圖1-3AMP-17作用于白色念珠菌的掃描電鏡觀察

注：正常組：a、b(×2000）；抗菌肽AMP-17作用8h組：c、d(×2000）；抗菌肽AMP-17作用16h組：e、f(×2000）；Note：control：a、b(×2000）；AMP-17groupfor8h：c、d(×2000）；AMP-17....

圖2-2抗菌肽AMP-17對白色念珠菌細(xì)胞周期影響

圖2-2抗菌肽AMP-17對白色念珠菌細(xì)胞周期影響Fig.2-2CellcycleanalysisofC.albicansassayedbyflowcytometry.(A–D)Aatafinalconcentrationof0,20....

圖2-3抗菌肽AMP-17對白色念珠菌胞內(nèi)ROS的影響（1200×）

注：*與對照組比較P＜0.05；**與對照組比較P＜0.01。*ComparedwithNegativecontrolP＜0.05；**ComparedwithNegativecontrolP＜0.01.圖2-3抗菌肽AMP-17對白色念珠菌胞內(nèi)....

本文編號：4025198