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兩株極地海洋真菌次級代謝產(chǎn)物的研究

發(fā)布時(shí)間:2024-06-01 09:25
  地球的兩極具有獨(dú)特的氣候及地理特征,賦予了極地微生物特殊的生物學(xué)特性[1]。極地微生物資源的開發(fā)和應(yīng)用日益受到國內(nèi)外科研人員的廣泛關(guān)注。有關(guān)極地微生物的藥用資源開發(fā)與活性化學(xué)成分研究,也引起了當(dāng)下天然產(chǎn)物研究者的廣泛興趣[2]。在前期研究中,本課題組從多株極地微生物樣品中篩選了兩株具有多種細(xì)胞毒活性的極地海洋真菌Aspergillus sp.S-3-62和Geomyces sp.3-1。基于此背景,本文展開了對這兩株真菌的發(fā)酵產(chǎn)物的化學(xué)成分研究。首先對菌株Aspergillus sp.S-3-62進(jìn)行了發(fā)酵培養(yǎng)基的初步優(yōu)化。采用OSMAC策略,在相同的培養(yǎng)條件下,選取5種不同培養(yǎng)基,通過比較發(fā)酵終點(diǎn)p H值、菌絲體干重、發(fā)酵液的總提物重量、總提物組分分布(TLC和HPLC-UV)得出最佳發(fā)酵條件為:采用改良察氏液體培養(yǎng)基,溫度24?C,接種量10%,轉(zhuǎn)速120 r/min,振蕩培養(yǎng)8 d。菌株Aspergillus sp.S-3-62按優(yōu)化后的條件規(guī)模發(fā)酵350 L,發(fā)酵結(jié)束后將發(fā)酵液高速離心,分別獲得菌絲體和菌液,菌液部分用等體積乙酸丁酯萃取3次,40℃減壓濃縮后獲得42 g浸膏;將...

【文章頁數(shù)】:63 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1左:菌株Aspergillussp.S-3-62右:菌株Geomycessp.3-1

圖1-1左:菌株Aspergillussp.S-3-62右:菌株Geomycessp.3-1

章菌株發(fā)酵條件初步優(yōu)化及規(guī)模組篩選了兩株具有一定抗腫瘤活性的極地真菌Aspergillusp.3-1。本章評估了極地真菌Aspergillussp.S-3-62在不同培養(yǎng)產(chǎn)物的能力。通過比較不同發(fā)酵條件下粗浸膏質(zhì)量,pH值及分布(HPLC-UV)等,最終確定了菌....


圖1-2左:Aspergillussp.S-3-62的粗提物原始培養(yǎng)基A的HPLC圖右:Aspergillussp.S-3-62的粗提物改良察氏培養(yǎng)基的HPLC圖

圖1-2左:Aspergillussp.S-3-62的粗提物原始培養(yǎng)基A的HPLC圖右:Aspergillussp.S-3-62的粗提物改良察氏培養(yǎng)基的HPLC圖

E3.3645.56.19上表中,從生物量、發(fā)酵終點(diǎn)pH和浸膏量的角度看出A,D,E號培養(yǎng)基較B,C為優(yōu),因此優(yōu)先挑選A、D、E號培養(yǎng)基進(jìn)入到下一輪優(yōu)化。第二輪優(yōu)化主要考察了用不同的水配制培養(yǎng)基對發(fā)酵的影響,結(jié)果見表1-4。表1-4第二輪發(fā)酵優(yōu)化結(jié)果Ta....


圖2-1Aspergillussp.S-3-62次級代謝產(chǎn)物分離純化流程圖

圖2-1Aspergillussp.S-3-62次級代謝產(chǎn)物分離純化流程圖

sp.3-1的粗提物浸膏9.3g。2、次級代謝產(chǎn)物分離純化(1)菌株Aspergillussp.S-3-62次級代謝產(chǎn)物分離純化粗提物浸膏首先用石油醚-乙醇體系進(jìn)行正相硅膠柱的分離,總共得到了六個(gè)部分(Fr.-1~Fr.-6),F(xiàn)r.-6組分首先通過C-18....


圖2-2Geomycessp.3-1次級代謝產(chǎn)物分離純化流程圖

圖2-2Geomycessp.3-1次級代謝產(chǎn)物分離純化流程圖

兩株極地海洋真菌次級代謝產(chǎn)物的研究制備得到化合物8(4.6mg)和化合物9(3.6mg);收集甲醇:水(85:15)部分,再經(jīng)HPLC制備得到化合物13(11.4mg)和化合物14(5.4mg);收集甲醇:水(95:5)部分,經(jīng)HPLC制備可得到化合物....



本文編號:3985689

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