目的:采用基于16S核糖體的序列分析,對(duì)無菌檢查藥品檢出菌進(jìn)行溯源,確保無菌檢查結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。方法:采用ABI 3730測(cè)序儀和基質(zhì)輔助激光解離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS),對(duì)本實(shí)驗(yàn)室無菌檢查區(qū)收集的42株環(huán)境菌及無菌檢查不合格樣品中分離純化的1株檢出菌進(jìn)行鑒定分型,建立系統(tǒng)進(jìn)化樹;在實(shí)驗(yàn)環(huán)境符合要求的條件下對(duì)不合格樣品嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)進(jìn)行再分析,并對(duì)再分析陽(yáng)性培養(yǎng)物中陽(yáng)性菌分離鑒定。結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)室無菌檢查區(qū)內(nèi)共分離環(huán)境菌42株,以革蘭陽(yáng)性球菌(29株,占69.4%)和革蘭陰性桿菌(8株,占19.0%)為主,其中表皮葡萄球菌8株(19.0%),沃氏葡萄球菌7株(16.7%),藤黃微球菌5株(11.9%),奧斯陸莫拉菌、解脲葡萄球菌及蠟狀芽胞桿菌各3株(均占7.1%)。無菌檢查樣品中檢出菌鑒定為1株紡錘形賴氨酸芽孢桿菌(Lysinibacillus fusiformis),在無菌保障條件都符合要求的情況下,不合格樣品再分析檢出該菌而本實(shí)驗(yàn)室潔凈環(huán)境菌中未發(fā)現(xiàn)該菌。結(jié)論:無菌樣品檢出的紡錘形賴氨酸芽孢桿菌來自樣品本身而非環(huán)境帶入。

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試劑及儀器
    1.2 DNA提取及16S rRNA擴(kuò)增
    1.3 環(huán)境菌收集
    1.4 注射用多西他賽的無菌檢查
    1.5 MALDI-TOF MS法鑒定微生物
    1.6 16S rRNA測(cè)序及分析
    1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
2 結(jié)果
    2.1 瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)16S rRNA擴(kuò)增產(chǎn)物
    2.2 無菌檢查區(qū)環(huán)境菌鑒定分型結(jié)果
    2.3 系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
    2.4 無菌檢查不合格樣品中微生物鑒定
    2.5 檢出菌的溯源分析
3 討論



本文編號(hào)：3978378