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鎘對BV2小膠質(zhì)細(xì)胞的毒性作用和機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2024-03-01 20:17
  鎘是一種環(huán)境中廣泛存在的有毒重金屬,可造成肝臟、腎臟、肺臟、脾臟等多種臟器的損傷并引發(fā)多種細(xì)胞的細(xì)胞凋亡和細(xì)胞新陳代謝紊亂,同時(shí)多種疾病的致病因素之一。小膠質(zhì)細(xì)胞是大腦內(nèi)的免疫細(xì)胞,在病理?xiàng)l件下小膠質(zhì)細(xì)胞被迅速激活并泌炎癥相關(guān)的細(xì)胞因子參與炎癥反應(yīng)并介導(dǎo)細(xì)胞凋亡或修復(fù)損傷細(xì)胞,吞噬壞死的細(xì)胞及其細(xì)胞碎片。鎘通過吸入、飲食等多種方式進(jìn)入人體并影響中樞神經(jīng)系統(tǒng),但對鎘對小膠質(zhì)細(xì)胞的影響還不清楚,本研究用培養(yǎng)的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞研究了鎘對小膠質(zhì)細(xì)胞的毒性作用及其機(jī)制。為研究鎘對小膠質(zhì)細(xì)胞的毒性作用,本研究對培養(yǎng)的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞活力、凋亡水平、遷移能力、吞噬能力、炎癥相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)、自噬水平進(jìn)行了檢測。首先使用MTT法檢測小膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞活力,以流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微成像檢測小膠質(zhì)細(xì)胞凋亡水平。研究發(fā)現(xiàn),氯化鎘顯著降低了體外培養(yǎng)的小膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞活力并引發(fā)了細(xì)胞凋亡。為進(jìn)一步研究鎘對小膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞功能方面的影響,本研究通過細(xì)胞劃痕試驗(yàn)檢測小膠質(zhì)細(xì)胞遷移能力,使用熒光顯微成像檢測吞噬能力,通過q-PCR檢測小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)水平。結(jié)果表明,氯化鎘顯著降低了小膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞遷...

【文章頁數(shù)】:58 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 鎘
        1.1.1 重金屬鎘簡介
        1.1.2 鎘的危害
        1.1.3 鎘與免疫
    1.2 小膠質(zhì)細(xì)胞
        1.2.1 小膠質(zhì)細(xì)胞簡介
        1.2.2 小膠質(zhì)細(xì)胞來源
        1.2.3 小膠質(zhì)細(xì)胞功能
        1.2.4 小膠質(zhì)細(xì)胞與疾病
    1.3 鎘與小膠質(zhì)細(xì)胞
    1.4 自噬
        1.4.1 自噬簡介
        1.4.2 自噬與免疫
        1.4.3 自噬與中樞神經(jīng)系統(tǒng)
        1.4.4 自噬與小膠質(zhì)細(xì)胞
        1.4.5 自噬與鎘
    1.5 鎘、小膠質(zhì)細(xì)胞以及自噬三者的關(guān)系
    1.6 研究目的與意義
第二章 材料和方法
    2.1 BV2小膠質(zhì)細(xì)胞來源
    2.2 實(shí)驗(yàn)器材
    2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.4 主要試劑及其配制
    2.5 實(shí)驗(yàn)方法
        2.5.1 BV2小膠質(zhì)細(xì)胞的復(fù)蘇
        2.5.2 BV2小膠質(zhì)細(xì)胞的傳代
        2.5.3 BV2小膠質(zhì)細(xì)胞的接種
        2.5.4 MTT法檢測BV2小膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞活力
        2.5.5 細(xì)胞凋亡檢測
        2.5.6 Westernblotting檢測細(xì)胞蛋白表達(dá)水平
        2.5.7 細(xì)胞遷移能力檢測
        2.5.8 細(xì)胞吞噬能力檢測
        2.5.9 Q-PCR檢測炎癥相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)
    2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 不同劑量鎘對BV2小膠質(zhì)細(xì)胞活力的影響
    3.2 不同劑量鎘對BV2小膠質(zhì)細(xì)胞凋亡情況的影響
    3.3 鎘對BV2小膠質(zhì)細(xì)胞核形態(tài)的影響
    3.4 不同劑量鎘對BV2小膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞遷移能力的影響
    3.5 鎘對BV2小膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞吞噬能力的影響
    3.6 鎘對小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥相關(guān)細(xì)胞因子分泌的影響
    3.7 不同劑量鎘對BV2小膠質(zhì)細(xì)胞自噬的影響
    3.8 雷帕霉素對鎘引起的小膠質(zhì)細(xì)胞自噬抑制的影響
    3.9 雷帕霉素對鎘引起的小膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響
第四章 討論
    4.1 鎘抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞活力
    4.2 鎘引發(fā)小膠質(zhì)細(xì)胞的凋亡
    4.3 鎘抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的正常細(xì)胞功能
    4.4 鎘抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的自噬
    4.5 鎘可能通過抑制小膠質(zhì)細(xì)胞自噬影響細(xì)胞凋亡水平
第五章 結(jié)論
    5.1 本研究主要結(jié)論
    5.2 研究展望
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間研究成果
附錄 縮略詞表
致謝



本文編號:3915777

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