目的肥胖是由機(jī)體能量代謝失衡引起的全球性健康問題,極大地降低了人類的生活質(zhì)量和壽命。殼寡糖(chitooligosaccharides,COS)是由殼聚糖水解而來的低聚寡糖,具有水溶性較好、更好的生物相容性、無毒副作用的特征,在減肥領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景。殼聚糖酶水解法是環(huán)保而高效的獲得COS的方法。然而,目前COS多由非殼聚糖酶法水解殼聚糖而來,而且目前報道的殼聚糖酶大多數(shù)穩(wěn)定性和熱恢復(fù)性不好,這些極大地限制了其應(yīng)用。因此,尋找新的具有優(yōu)良特性的殼聚糖酶并用于制備具有抗肥胖活性的COS至關(guān)重要。方法從黃海沉積物中篩選出產(chǎn)殼聚糖酶的海洋細(xì)菌,擴(kuò)增其16S rDNA進(jìn)行序列比對。在含殼聚糖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)該菌,對產(chǎn)生的殼聚糖酶進(jìn)行純化,得到殼聚糖酶并對其酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行表征。研究該酶水解制備COS的最適條件,在5升發(fā)酵罐中建立了COS的制備工藝,分析COS的組成。用COS喂養(yǎng)高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖KM小鼠,收集小鼠血清進(jìn)行脂質(zhì)分析,留取小鼠的肝臟和附睪脂肪進(jìn)行組織切片的分析,研究COS的抗肥胖活性。結(jié)果序列的比對顯示所得菌株與假交替單胞菌屬(Pseudoalteromonas sp.)的序列相似性...

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
第一部分 殼聚糖酶的分離純化和性質(zhì)研究
    材料與方法
        1 儀器與試劑
        2 試劑、培養(yǎng)基的配制
        3 產(chǎn)殼聚糖酶菌株的篩選及鑒定
        4 殼聚糖酶活性的測定
        5 殼聚糖酶的表達(dá)、純化
        6 殼聚糖酶濃度的測定
        7 殼聚糖酶的性質(zhì)鑒定
    結(jié)果
        1 產(chǎn)殼聚糖酶菌株的篩選及鑒定
        2 殼聚糖酶活性測定
        3 酶的分離純化結(jié)果
        4 酶濃度測定結(jié)果
        5 殼聚糖酶的性質(zhì)鑒定
    討論
第二部分 殼寡糖的制備及鑒定
    材料與方法
        1 儀器與試劑
        2 殼聚糖水解的條件優(yōu)化
        3 COS的酶法制備
        4 COS的含量測定
        5 COS的薄層色譜(TLC)和電噴霧質(zhì)譜(ESI-MS)分析
    結(jié)果
        1 殼聚糖水解的條件優(yōu)化
        2 COS的含量測定
        3 COS的 TLC和 ESI-MS檢測
    討論
第三部分 殼寡糖的抗肥胖活性
    材料與方法
        1 儀器與試劑
        2 實(shí)驗(yàn)動物及分組
        3 血清脂質(zhì)分析
        4 組織學(xué)分析
        5 數(shù)據(jù)分析
    結(jié)果
        1 COS降低小鼠的體重
        2 COS降低小鼠血清TC和TG
        3 COS具有肝臟保護(hù)作用
        4 COS降低附睪脂肪組織的重量
    討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝



本文編號：3884025