癌癥已經(jīng)成為我國最主要的公共衛(wèi)生問題,威脅人們的生命健康,同時也極大加重社會的負(fù)擔(dān),尋找更好的治療癌癥的方法始終是科研人員的重點(diǎn)話題。靶向藥物是目前臨床效果相對較好、患者接受度相對較高的一種癌癥治療方法。隨著研究人員對腫瘤微環(huán)境和腫瘤異質(zhì)性的深入了解,腫瘤的靶向治療技術(shù)逐漸從靶向組織器官水平,將藥物富集在腫瘤部位轉(zhuǎn)向靶向腫瘤細(xì)胞中的相關(guān)致病蛋白和影響腫瘤微環(huán)境的蛋白,從基因和蛋白水平開發(fā)新的腫瘤治療藥物和方法。根據(jù)泛素調(diào)控蛋白質(zhì)降解過程這一機(jī)制,形成一種新興的新藥開發(fā)技術(shù):蛋白降解靶向嵌合體(Proteolysis-targeting Chimeras,PROTACs)技術(shù)。蛋白降解靶向嵌合體(PROTACs)是一種包含三個部分的異源雙功能分子:一端與靶蛋白結(jié)合,另一端募集E3連接酶,中間起連接作用的連接鏈。嵌合體分子同時結(jié)合靶蛋白和泛素連接酶E3,誘導(dǎo)形成目標(biāo)蛋白/PROTACs/E3三元復(fù)合物,導(dǎo)致靶蛋白的泛素化和之后的降解。PROTACs技術(shù)是一種快速、可逆的蛋白敲除方法,與泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(Ubiquitin-Proteasomes System,UPS)聯(lián)合作用實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)水...

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 研究背景
    1.2 蛋白降解靶向嵌合體(PROTACs)研究進(jìn)展
        1.2.1 肽類蛋白降解靶向嵌合體
        1.2.2 小分子蛋白降解靶向嵌合體
        1.2.3 蛋白降解靶向嵌合體優(yōu)點(diǎn)
        1.2.4 蛋白降解靶向嵌合體應(yīng)用
    1.3 課題設(shè)計
第2章 靶向PLK1/BRD4 蛋白的PROTACs-HBL化合物合成
    2.1 試劑和儀器
        2.1.1 試劑
        2.1.2 儀器
    2.2 化合物合成
        2.2.1 BI2536 中間體合成
        2.2.2 PROTACs-HBL合成
    2.3 結(jié)果和分析
    2.4 本章小結(jié)
第3章 PROTACs-HBL化合物與細(xì)胞作用的研究
    3.1 材料與儀器
        3.1.1 細(xì)胞株
        3.1.2 材料
        3.1.3 儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.2 CCK8 法檢測細(xì)胞增殖
        3.2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡
        3.2.4 PI染色法檢測細(xì)胞周期
        3.2.5 Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
        3.2.6 Western-blot法檢測蛋白表達(dá)情況
        3.2.7 RT-PCR檢測基因m RNA水平變化
    3.3 統(tǒng)計方法
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 目標(biāo)化合物對細(xì)胞增殖的影響
        3.4.2 HBL-1對MV4-11 細(xì)胞凋亡的影響
        3.4.3 HBL-1對MV4-11 細(xì)胞周期的影響
        3.4.4 HBL-1對MV4-11 細(xì)胞遷移的影響
    3.5 本章小結(jié)
第4章 HBL-1對PLK1、BRD4和c-Myc蛋白作用的研究
    4.1 材料和儀器
        4.1.1 細(xì)胞株
        4.1.2 材料
        4.1.3 儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 化合物在體外對蛋白表達(dá)的影響
        4.2.2 MV4-11 荷瘤小鼠模型建立和給藥方法
    4.3 統(tǒng)計方法
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 HBL-1 濃度對體外白血病細(xì)胞中PLKl、BRD4 蛋白表達(dá)的影響
        4.4.2 HBL-1 作用時間對體外白血病細(xì)胞中PLKl、BRD4、c-Myc蛋白表達(dá)的影響
        4.4.3 HBL-1 對蛋白作用機(jī)制的研究
        4.4.4 HBL-1對MV4-11 荷瘤小鼠體內(nèi)PLK1、BRD4、c-Myc蛋白表達(dá)的影響
    4.5 本章小結(jié)
第5章 討論
第6章 結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)
    6.1 結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附圖
作者簡介及在學(xué)期間科研成果
致謝



本文編號：3873982