目的探討維生素D(vitamin D,VitD)對過氧化氫(hydrogen peroxide,H₂O₂)誘導(dǎo)小鼠胰島β細(xì)胞株MIN6細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用及機(jī)制。方法 VitD預(yù)處理后,用H₂O₂處理MIN6細(xì)胞,分別運用CCK-8法、Hoechst 33258熒光染色法、流式細(xì)胞術(shù)檢測MIN6細(xì)胞增殖、形態(tài)及凋亡百分率。Western blot檢測增殖與凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2、Caspase-3以及Cleaved caspase-3的表達(dá)。結(jié)果 H₂O₂呈時間和劑量依賴性抑制MIN6細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,降低Bcl-2表達(dá)、增加Bax及Cleaved caspase-3表達(dá),Bcl-2/Bax比值降低,Cleaved caspase-3/caspase-3比值增加;當(dāng)用VitD預(yù)處理后,Bcl-2表達(dá)增加,Bax、Cleaved caspase-3表達(dá)降低,Bcl-2/Bax比值增加,Cleaved caspase-3/caspase-3比值降低...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗試劑
    1.2 實驗儀器
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
    1.4 CCK-8法檢測細(xì)胞活力
    1.5 Hoechst 33258檢測細(xì)胞凋亡
    1.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率
    1.7 Western blot
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 H2O2降低MIN6細(xì)胞活力
    2.2 VitD減少H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡
    2.3 Hoechst 33258染色觀察MIN6細(xì)胞核形態(tài)
    2.4 流式細(xì)胞術(shù)觀察MIN6細(xì)胞凋亡百分率
    2.5 H2O2單獨與用VitD預(yù)處理后對凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
3 討論



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