目的觀察二甲雙胍對內(nèi)皮細(xì)胞自噬的影響,并探討其可能的調(diào)控機(jī)制。方法以不同濃度二甲雙胍（0、2.5、5、10、20、40 mmol/L）處理人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）24 h,并以5 mmol/L二甲雙胍分別處理細(xì)胞24、48、72 h,用CCK-8法檢測細(xì)胞存活率;藥物處理細(xì)胞分4組:對照組（ctl）、二甲雙胍組（Met）、TGFβ1組（TGF）、二甲雙胍+TGFβ1處理組（M+T）,透射電鏡觀察各組細(xì)胞中自噬體的形成;免疫熒光和Western Blot檢測自噬相關(guān)分子LC3Ⅱ、Beclin-1的表達(dá)。在原分組基礎(chǔ)上進(jìn)一步加入Hippo信號通路抑制劑XMU-MP-1和Hippo信號轉(zhuǎn)錄因子YAP阻斷劑維替泊芬處理,包括XMU-MP-1處理組（XMU）,二甲雙胍+XMU-MP-1處理組（M+X）、維替泊芬組（Ver）、維替泊芬+TGFβ1共處理組（V+T）、維替泊芬+XMU-MP-1共處理組（V+X）,Western Blot檢測LC3Ⅱ、YAP、pYAP及其靶蛋白CTGF的表達(dá)。結(jié)果 CCK-8結(jié)果表明,... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)和處理
    1.3 CCK-8(Cell Counting Kit-8)檢測
    1.4 透射電鏡檢測
    1.5 細(xì)胞免疫熒光
    1.6 Western blot檢測
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 二甲雙胍對HUVEC存活率的影響
    2.2 二甲雙胍抑制TGFβ1誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)自噬體形成
    2.3 二甲雙胍下調(diào)TGFβ1誘導(dǎo)的自噬相關(guān)分子表達(dá)
    2.4 二甲雙胍阻遏TGFβ1誘導(dǎo)的YAP激活
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