鎘（Cadmium,Cd）是一種被廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中的有毒重金屬,對發(fā)展中國家以及高度工業(yè)化的國家公共衛(wèi)生造成了嚴(yán)重危害。之前的研究表明,Cd可以通過食物鏈、職業(yè)暴露和香煙煙霧而富集,最終蓄積在血液,腦,腎臟和肝臟以及生殖器官中,包括卵巢,睪丸和胎盤。尤其是懷孕期間婦女更容易受到Cd毒性的影響,因為Cd更容易積聚在胎盤中,導(dǎo)致一系列與胎盤相關(guān)的疾病,如先兆子癇、胎兒生長受限和流產(chǎn)等。因此,本研究以人的胎盤滋養(yǎng)層（HTR-8/SVneo）細(xì)胞為研究模型,探究Cd誘導(dǎo)人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞損傷及凋亡的分子機制,為研究Cd引起哺乳動物流產(chǎn)的致病機理提供理論基礎(chǔ)。實驗結(jié)果如下:1.MTT實驗結(jié)果表明,CdCl₂可以降低HTR-8/SVneo細(xì)胞活力,抑制細(xì)胞生長,并且具有時間和劑量依賴性關(guān)系。通過光學(xué)顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)HTR-8/SVneo細(xì)胞經(jīng)CdCl₂處理后,隨著CdCl₂濃度的增大和處理時間的延長,細(xì)胞形態(tài)有明顯的變圓皺縮現(xiàn)象。DCFH-DA熒光染色和流式細(xì)胞術(shù)檢測均表明,CdCl₂處理可以誘導(dǎo)HTR-8/S... 

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 綜述
    1 Cd的污染現(xiàn)狀及對人體的危害
        1.1 Cd的污染現(xiàn)狀
        1.2 Cd對人體的危害
        1.3 Cd的生殖毒性
        1.4 Cd對胎盤的影響
        1.5 Cd對滋養(yǎng)層細(xì)胞的影響
    2 Cd的毒性機制研究
        2.1 Cd與活性氧
        2.2 Cd與抗氧化系統(tǒng)
        2.3 Cd與脂質(zhì)過氧化
        2.4 Cd與線粒體損傷
        2.5 Cd與 DNA損傷
        2.6 Cd與細(xì)胞周期
        2.7 Cd與細(xì)胞凋亡
    3 NAC的研究進展
    4 本學(xué)位論文的研究內(nèi)容及研究意義
第二章 鎘對HTR-8/SVneo細(xì)胞活性及抗氧化系統(tǒng)的影響
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 細(xì)胞系
            1.1.2 主要試劑
            1.1.3 主要儀器
        1.2 實驗方法
            1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            1.2.2 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
            1.2.3 MTT實驗檢測細(xì)胞活性
            1.2.4 光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化
            1.2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)ROS含量
            1.2.6 SOD、CAT、GSH-Px活性及MDA含量檢測
            1.2.7 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果
        2.1 CdCl_2對HTR-8/SVneo細(xì)胞活性的影響
        2.2 CdCl_2對HTR-8/SVneo細(xì)胞形態(tài)的影響
        2.3 CdCl_2對HTR-8/SVneo細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響
        2.4 CdCl_2對HTR-8/SVneo細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶活性的影響
        2.5 CdCl_2對HTR-8/SVneo細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化水平的影響
    3 討論
第三章 鎘通過氧化應(yīng)激誘導(dǎo)HTR-8/SVneo細(xì)胞凋亡
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 細(xì)胞系
            1.1.2 主要試劑
            1.1.3 主要儀器
        1.2 實驗方法
            1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            1.2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測線粒體膜電位(ΔΨm)
            1.2.3 堿性彗星實驗檢測DNA損傷
            1.2.4 免疫熒光檢測γ-H2AX
            1.2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期分布
            1.2.6 Hoechst33342染色
            1.2.7 AO/EB染色
            1.2.8 Annexin-V FITC/PI雙染檢測細(xì)胞凋亡率
            1.2.9 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA片段化
            1.2.10 Western blot檢測蛋白表達(dá)水平
            1.2.11 透射電子顯微鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化
            1.2.12 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果
        2.1 CdCl_2引起HTR-8/SVneo細(xì)胞線粒體損傷
        2.2 CdCl_2引起HTR-8/SVneo細(xì)胞DNA損傷
        2.3 CdCl_2引起HTR-8/SVneo細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期
        2.4 CdCl_2誘導(dǎo)HTR-8/SVneo細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測
        2.5 CdCl_2誘導(dǎo)HTR-8/SVneo細(xì)胞凋亡
    3 討論
第四章 鎘特異性誘導(dǎo)小鼠胎盤中滋養(yǎng)層細(xì)胞發(fā)生氧化損傷
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 實驗動物
            1.1.2 主要試劑
            1.1.3 主要儀器
        1.2 實驗方法
            1.2.1 動物染毒及取材
            1.2.2 石蠟切片及HE染色
            1.2.3 免疫熒光
            1.2.4 數(shù)據(jù)分析
    2 結(jié)果
        2.1 CdCl_2降低小鼠胎盤質(zhì)量和直徑
        2.2 CdCl_2引起小鼠胎盤組織病理學(xué)損傷
        2.3 CdCl_2引起小鼠胎盤中滋養(yǎng)層細(xì)胞DNA損傷
        2.4 CdCl_2引起小鼠胎盤中滋養(yǎng)層細(xì)胞凋亡
    3 討論
參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡況及聯(lián)系方式


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]鎘對華溪蟹的損傷與低分子量殼聚糖的防護作用[D]. 周妍英.山西大學(xué) 2011
[2]鎘對華溪蟹的免疫毒性效應(yīng)[D]. 秦圣娟.山西大學(xué) 2011
[3]鎘對南方鲇抗氧化酶系統(tǒng)和脂質(zhì)過氧化作用的影響[D]. 皇甫加清.西南大學(xué) 2011



本文編號：3652103