目的研究胰高血糖素樣肽-1類似物利拉魯肽對原代大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞（CMECs）增殖和遷移的影響及其機制。方法使用雙酶消化法體外分離培養(yǎng)SD大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞,差速貼壁法進(jìn)行純化,CD31和Ⅷ因子抗體進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定。采用不同濃度利拉魯肽（0¹000 nmol/L）干預(yù)1代細(xì)胞,MTT繪制細(xì)胞生長曲線,Western blot檢測利拉魯肽對PI3K/Akt和MAPK/ERK通路的激活作用,Brd U熒光標(biāo)記法和劃痕實驗觀察藥物作用下細(xì)胞增殖和遷移能力,并使用相應(yīng)的通路阻斷劑LY294002和PD98059來進(jìn)一步證實。結(jié)果體外分離原代CMECs,CD31及Ⅷ因子免疫熒光染色示雙陽性率大于95%,MTT示細(xì)胞于種植48 h后進(jìn)入對數(shù)生長期,利拉魯肽以濃度依賴方式促進(jìn)CMECs的體外增殖,100 nmol/L為其最適生長濃度（P<0.05）。予以100 nmol/L利拉魯肽預(yù)干預(yù)細(xì)胞24 h后,Western blot顯示胞內(nèi)Akt和ERK磷酸化水平與正常細(xì)胞組相比有明顯升高（P<0.05）,加入相應(yīng)通路阻斷劑LY294002和PD98059... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2015,35(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1材料和方法
    1.1試劑和儀器
    1.2實驗方法
2結(jié)果
    2.1微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)的形態(tài)學(xué)觀察
    2.2微血管內(nèi)皮細(xì)胞的鑒定
    2.3不同濃度利拉魯肽對細(xì)胞增殖能力影響
    2.4利拉魯肽對內(nèi)皮細(xì)胞PI3K/Akt和MAPK/ERK通路的影響
    2.5利拉魯肽對細(xì)胞增殖能力影響
    2.6利拉魯肽對細(xì)胞遷移能力影響
3討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]類表皮生長因子域7通過ERK信號通路促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移及血管生成[J]. 曹玉凈,呂秋霞.  中華病理學(xué)雜志. 2015 (04)



本文編號：3593412