皮膚衰老是機(jī)體衰老最直接的外在表現(xiàn),是由內(nèi)源性變化和外源性損傷共同引起的自然過程。皮膚細(xì)胞衰老后,各項(xiàng)生理機(jī)能將發(fā)生改變,如線粒體功能紊亂、活性氧（Reactive oxygen species,ROS）含量增加、炎癥反應(yīng)增強(qiáng)、I型膠原蛋白（Collagen I,COL-1）)表達(dá)減少,最終導(dǎo)致皮膚松弛、皺紋加深、老年斑形成等現(xiàn)象,嚴(yán)重影響了人體的美觀和健康,因此如何延緩皮膚衰老已經(jīng)成為抗衰老領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。近年來,生物短肽類抗衰老制劑因其不良反應(yīng)少、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)得到了人們的廣泛關(guān)注,但由于分子量較大、生物利用率不高等原因限制了其應(yīng)用。另外,人們在多種模式生物的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),抑制AKT/mTOR通路可以延長模式生物的壽命,但其能否調(diào)控皮膚衰老仍有待進(jìn)一步探索。本論文以清除ROS積累為出發(fā)點(diǎn),以降低抗衰老短肽分子量和促進(jìn)膠原蛋白合成為研究思路進(jìn)行分子設(shè)計(jì),目的是設(shè)計(jì)一種安全穩(wěn)定、分子量小的抗皮膚衰老短肽。首先從本實(shí)驗(yàn)室前期天然活性肽庫中選取四條最初的抗氧化模板肽,通過氨基酸序列刪減、點(diǎn)突變等常用分子改造手段設(shè)計(jì)優(yōu)化得到九條改造肽。然后經(jīng)過一系列活性實(shí)驗(yàn)檢測,最終篩選得到促膠原蛋白表達(dá)能力... 

【文章來源】：大連理工大學(xué)遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 皮膚衰老概述
        1.1.1 細(xì)胞衰老
        1.1.2 皮膚衰老
        1.1.3 氧化應(yīng)激與皮膚衰老
        1.1.4 皮膚氧化損傷及衰老相關(guān)研究模型的建立
    1.2 AKT/mTOR信號通路
    1.3 mTOR通路與衰老的關(guān)系假設(shè)
        1.3.1 自噬
        1.3.2 線粒體功能
        1.3.3 炎癥
    1.4 化妝品抗皮膚衰老研究進(jìn)展
        1.4.1 常見化妝品抗衰老方式及成分
        1.4.2 活性肽在抗皮膚衰老領(lǐng)域的進(jìn)展
    1.5 研究意義
2 抗皮膚衰老短肽的分子設(shè)計(jì)及篩選
    2.1 引言
    2.2 材料與儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 抗皮膚衰老改造肽的分子設(shè)計(jì)
        2.3.2 改造短肽抗氧化活性檢測
        2.3.3 改造短肽抗炎能力檢測
        2.3.4 改造短肽對COL-1 啟動(dòng)子影響檢測
        2.3.5 改造短肽細(xì)胞毒性檢測
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 改造短肽的序列及理化參數(shù)
        2.4.2 改造短肽抗氧化能力結(jié)果與分析
        2.4.3 改造短肽抗炎能力結(jié)果與分析
        2.4.4 改造短肽對COL-1 報(bào)告基因影響
        2.4.5 改造短肽細(xì)胞毒性結(jié)果與分析
    2.5 本章小結(jié)
3 抗衰老短肽PSN對皮膚的保護(hù)作用
    3.1 引言
    3.2 材料與儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 PSN預(yù)防皮膚衰老能力檢測
        3.3.2 PSN修復(fù)皮膚衰老能力檢測
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
        3.4.1 PSN對衰老皮膚的預(yù)防保護(hù)作用
        3.4.2 PSN對衰老皮膚的修復(fù)作用
    3.5 本章小結(jié)
4 抗皮膚衰老短肽PSN的作用機(jī)制
    4.1 引言
    4.2 材料與儀器
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 細(xì)胞衰老模型的構(gòu)建及驗(yàn)證
        4.3.2 細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶活性測定
        4.3.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
        4.3.4 線粒體膜電位檢測
        4.3.5 胞內(nèi)ROS檢測
        4.3.6 人皮膚成纖維細(xì)胞全蛋白提取
        4.3.7 蛋白定量
        4.3.8 Western Blotting檢測相關(guān)蛋白
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
        4.4.1 細(xì)胞衰老模型的構(gòu)建及驗(yàn)證
        4.4.2 PSN對衰老細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的影響
        4.4.3 PSN對衰老細(xì)胞SA-β-Gal相關(guān)活性的影響
        4.4.4 PSN對衰老細(xì)胞線粒體功能的影響
        4.4.5 PSN對 HFF-1 細(xì)胞衰老標(biāo)志蛋白p16 的影響
        4.4.6 PSN對 HFF-1 細(xì)胞I型膠原蛋白合成的影響
        4.4.7 AKT/m TOR通路在PSN抗皮膚衰老中的分子機(jī)制探究
    4.5 本章小結(jié)
5 抗皮膚衰老短肽PSN毒理安全與穩(wěn)定性評價(jià)
    5.1 引言
    5.2 材料與儀器
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1 短肽細(xì)胞毒性檢測
        5.3.2 短肽溶血活性檢測
        5.3.3 短肽穩(wěn)定性檢測
        5.3.4 短肽免疫原性檢測
    5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
        5.4.1 PSN的細(xì)胞毒性和溶血性結(jié)果與分析
        5.4.2 PSN的免疫原性結(jié)果與分析
        5.4.3 PSN的穩(wěn)定性結(jié)果與分析
    5.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄 短肽PSN合成檢測結(jié)果
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3590111