發(fā)布時間：2022-01-15 06:41

　　皮膚衰老是機(jī)體衰老最直接的外在表現(xiàn),是由內(nèi)源性變化和外源性損傷共同引起的自然過程。皮膚細(xì)胞衰老后,各項生理機(jī)能將發(fā)生改變,如線粒體功能紊亂、活性氧（Reactive oxygen species,ROS）含量增加、炎癥反應(yīng)增強、I型膠原蛋白（Collagen I,COL-1）)表達(dá)減少,最終導(dǎo)致皮膚松弛、皺紋加深、老年斑形成等現(xiàn)象,嚴(yán)重影響了人體的美觀和健康,因此如何延緩皮膚衰老已經(jīng)成為抗衰老領(lǐng)域的研究熱點。近年來,生物短肽類抗衰老制劑因其不良反應(yīng)少、穩(wěn)定性好等優(yōu)點得到了人們的廣泛關(guān)注,但由于分子量較大、生物利用率不高等原因限制了其應(yīng)用。另外,人們在多種模式生物的實驗中發(fā)現(xiàn),抑制AKT/mTOR通路可以延長模式生物的壽命,但其能否調(diào)控皮膚衰老仍有待進(jìn)一步探索。本論文以清除ROS積累為出發(fā)點,以降低抗衰老短肽分子量和促進(jìn)膠原蛋白合成為研究思路進(jìn)行分子設(shè)計,目的是設(shè)計一種安全穩(wěn)定、分子量小的抗皮膚衰老短肽。首先從本實驗室前期天然活性肽庫中選取四條最初的抗氧化模板肽,通過氨基酸序列刪減、點突變等常用分子改造手段設(shè)計優(yōu)化得到九條改造肽。然后經(jīng)過一系列活性實驗檢測,最終篩選得到促膠原蛋白表達(dá)能力... 

【文章來源】：大連理工大學(xué)遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 皮膚衰老概述
        1.1.1 細(xì)胞衰老
        1.1.2 皮膚衰老
        1.1.3 氧化應(yīng)激與皮膚衰老
        1.1.4 皮膚氧化損傷及衰老相關(guān)研究模型的建立
    1.2 AKT/mTOR信號通路
    1.3 mTOR通路與衰老的關(guān)系假設(shè)
        1.3.1 自噬
        1.3.2 線粒體功能
        1.3.3 炎癥
    1.4 化妝品抗皮膚衰老研究進(jìn)展
        1.4.1 常見化妝品抗衰老方式及成分
        1.4.2 活性肽在抗皮膚衰老領(lǐng)域的進(jìn)展
    1.5 研究意義
2 抗皮膚衰老短肽的分子設(shè)計及篩選
    2.1 引言
    2.2 材料與儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 抗皮膚衰老改造肽的分子設(shè)計
        2.3.2 改造短肽抗氧化活性檢測
        2.3.3 改造短肽抗炎能力檢測
        2.3.4 改造短肽對COL-1 啟動子影響檢測
        2.3.5 改造短肽細(xì)胞毒性檢測
    2.4 實驗結(jié)果與討論
        2.4.1 改造短肽的序列及理化參數(shù)
        2.4.2 改造短肽抗氧化能力結(jié)果與分析
        2.4.3 改造短肽抗炎能力結(jié)果與分析
        2.4.4 改造短肽對COL-1 報告基因影響
        2.4.5 改造短肽細(xì)胞毒性結(jié)果與分析
    2.5 本章小結(jié)
3 抗衰老短肽PSN對皮膚的保護(hù)作用
    3.1 引言
    3.2 材料與儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 PSN預(yù)防皮膚衰老能力檢測
        3.3.2 PSN修復(fù)皮膚衰老能力檢測
    3.4 實驗結(jié)果分析
        3.4.1 PSN對衰老皮膚的預(yù)防保護(hù)作用
        3.4.2 PSN對衰老皮膚的修復(fù)作用
    3.5 本章小結(jié)
4 抗皮膚衰老短肽PSN的作用機(jī)制
    4.1 引言
    4.2 材料與儀器
    4.3 實驗方法
        4.3.1 細(xì)胞衰老模型的構(gòu)建及驗證
        4.3.2 細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶活性測定
        4.3.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗
        4.3.4 線粒體膜電位檢測
        4.3.5 胞內(nèi)ROS檢測
        4.3.6 人皮膚成纖維細(xì)胞全蛋白提取
        4.3.7 蛋白定量
        4.3.8 Western Blotting檢測相關(guān)蛋白
    4.4 實驗結(jié)果分析
        4.4.1 細(xì)胞衰老模型的構(gòu)建及驗證
        4.4.2 PSN對衰老細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的影響
        4.4.3 PSN對衰老細(xì)胞SA-β-Gal相關(guān)活性的影響
        4.4.4 PSN對衰老細(xì)胞線粒體功能的影響
        4.4.5 PSN對 HFF-1 細(xì)胞衰老標(biāo)志蛋白p16 的影響
        4.4.6 PSN對 HFF-1 細(xì)胞I型膠原蛋白合成的影響
        4.4.7 AKT/m TOR通路在PSN抗皮膚衰老中的分子機(jī)制探究
    4.5 本章小結(jié)
5 抗皮膚衰老短肽PSN毒理安全與穩(wěn)定性評價
    5.1 引言
    5.2 材料與儀器
    5.3 實驗方法
        5.3.1 短肽細(xì)胞毒性檢測
        5.3.2 短肽溶血活性檢測
        5.3.3 短肽穩(wěn)定性檢測
        5.3.4 短肽免疫原性檢測
    5.4 實驗結(jié)果分析
        5.4.1 PSN的細(xì)胞毒性和溶血性結(jié)果與分析
        5.4.2 PSN的免疫原性結(jié)果與分析
        5.4.3 PSN的穩(wěn)定性結(jié)果與分析
    5.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄 短肽PSN合成檢測結(jié)果
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3590111