目的探索木香烴內(nèi)酯對白血病耐藥細胞系K562/A02阿霉素耐藥的逆轉(zhuǎn)作用。方法將木香烴內(nèi)酯與K562/A02細胞共培養(yǎng)72 h后,采用MTT法檢測木香烴內(nèi)酯對細胞生長的抑制作用。不同濃度木香烴內(nèi)酯處理K562/A02細胞24 h后,采用Annexin V和PI雙染法檢測木香烴內(nèi)酯對細胞的凋亡。不同濃度木香烴內(nèi)酯與阿霉素共培養(yǎng)72 h后采用MTT法檢測木香烴內(nèi)酯對K562/A02細胞的耐藥逆轉(zhuǎn)情況。采用流式細胞儀檢測木香烴內(nèi)酯處理24 h之后K562/A02細胞阿霉素蓄積以及細胞膜表面P-糖蛋白（P-gp）的表達。結(jié)果木香烴內(nèi)酯對K562/A02細胞的生長具有明顯抑制作用,呈顯著的劑量相關(guān)性。與對照組比較,2.5⁵0μmol/L木香烴內(nèi)酯組K562/A02細胞存活率顯著降低（P<0.05、0.01、0.001）。隨著木香烴內(nèi)酯濃度的增加,凋亡細胞的比例明顯增加。與對照組比較,不同濃度木香烴內(nèi)酯組細胞凋亡比例顯著升高（P<0.05、0.01、0.001）。加入5μmol/L木香烴內(nèi)酯后,使K562/A02細胞對阿霉素的敏感性提高12倍。木香烴內(nèi)酯處理后K5... 

【文章來源】：現(xiàn)代藥物與臨床. 2016,31(06)

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【部分圖文】：

不同濃度木香烴內(nèi)酯對K562/A02細胞凋亡的影響

fcostunolideonK562/A02cell與對照組比較，2.5～50μmol/L木香烴內(nèi)酯組K562/A02細胞存活率顯著降低（P＜0.05、0.01、0.001）。木香烴內(nèi)酯對K562/A02細胞的IC50為5.61μmol/L，且在最高濃度50μmol/L時，細胞的存活率最低，見表1。3.2木香烴內(nèi)酯誘導K562/A02細胞凋亡不同濃度木香烴內(nèi)酯處理K562/A02細胞24h后，細胞出現(xiàn)明顯凋亡。根據(jù)細胞凋亡的狀態(tài)可以把細胞分為兩類，AnnexinV＋為凋亡細胞，AnnexinV-/PI-組為活細胞。根據(jù)實驗結(jié)果可知，隨著木香烴內(nèi)酯濃度的增加，凋亡細胞的比例明顯增加，見圖2。表1木香烴內(nèi)酯對K562/A02細胞存活率的影響（x±s，n=3）Table1EffectofcostunolideonsurvivalratesofK562/A02cell(x±s,n=3)組別濃度/(μmol·L1)細胞存活率/%對照—99.96±0.86木香烴內(nèi)酯0.25104.51±6.670.586.36±6.291.080.28±14.222.581.93±0.64*553.86±0.32**1026.48±1.54***2024.89±0.45***5019.89±1.61***與對照組比較：*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001*P<0.05**P<0.01***P<0.001vsthecontrolgroup圖2不同濃度木香烴內(nèi)酯對K562/A02細胞凋亡的影響Fig.2EffectsofvariousconcentrationsofcostunolideonapoptosisofK562/A02cells對照組細胞凋亡比例為（6.03±0.83）%，木香烴內(nèi)酯濃度在2.5、5、10μmol/L時細胞凋亡比例分別為（15.10±1.73）%、（29.13±3.61）%、（91.07±1.91）%。與對照組比較，不同濃度木香烴內(nèi)酯組細胞凋亡比例顯著升高（P＜0.05、0.01、0.001）。同時木香烴內(nèi)酯處理之后活細胞的比例明顯下降，見圖3。105104103102102103104105102103104105AnnexinV-FITCAnnexinV-FITC

為5、2.5μmol/L。每個濃度設(shè)置3個復孔。放入37℃孵箱中24h后，將細胞吸入流式管中，1500r/min離心8min后棄上清，沉淀用100μLPBS重懸，標記5μLP-gp-PE，室溫孵育30min后，離心棄上清，用500μLPBS重懸，流式細胞儀檢測P-gp的熒光強度值。2.6統(tǒng)計分析采用GraphPadPrism5軟件進行配對t檢驗，檢驗對照組和實驗組的差異。3結(jié)果3.1木香烴內(nèi)酯對K562/A02細胞生長的抑制作用木香烴內(nèi)酯處理72h后，K562/A02細胞的生長受到明顯抑制，在低于50μmol/L的濃度范圍內(nèi)，K562/A02細胞生長的抑制具有顯著的劑量相關(guān)性，見圖1。圖1木香烴內(nèi)酯對K562/A02細胞的抑制作用Fig.1InhibitionofcostunolideonK562/A02cell與對照組比較，2.5～50μmol/L木香烴內(nèi)酯組K562/A02細胞存活率顯著降低（P＜0.05、0.01、0.001）。木香烴內(nèi)酯對K562/A02細胞的IC50為5.61μmol/L，且在最高濃度50μmol/L時，細胞的存活率最低，見表1。3.2木香烴內(nèi)酯誘導K562/A02細胞凋亡不同濃度木香烴內(nèi)酯處理K562/A02細胞24h后，細胞出現(xiàn)明顯凋亡。根據(jù)細胞凋亡的狀態(tài)可以把細胞分為兩類，AnnexinV＋為凋亡細胞，AnnexinV-/PI-組為活細胞。根據(jù)實驗結(jié)果可知，隨著木香烴內(nèi)酯濃度的增加，凋亡細胞的比例明顯增加，見圖2。表1木香烴內(nèi)酯對K562/A02細胞存活率的影響（x±s，n=3）Table1EffectofcostunolideonsurvivalratesofK562/A02cell(x±s,n=3)組別濃度/(μmol·L1)細胞存活率/%對照—99.96±0.86木香烴內(nèi)酯0.25104.51±6.670.586.36±6.291.080.28±14.222.581.93±0.64*553.86±0.32**1026.48±1.54***2024.89±0.45***5019.89±1.61***與對照組比較：*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001*P<0.05**P

【參考文獻】：
期刊論文
[1]中藥逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥性的研究進展[J]. 劉海曄.  中草藥. 2015(07)



本文編號：3586052