目的:建立測定人肝微粒體孵育體系中氯吡格雷及其活性代謝產(chǎn)物（AM）和非活性代謝產(chǎn)物（CCAM）藥物濃度的檢測方法,并將其應(yīng)用于氯吡格雷的體外代謝研究。方法:AM含有巰基,需用衍生化試劑2-溴-3’-甲氧基苯乙酮（MPB）將肝微粒體孵育體系中的AM衍生化成MP-AM進行測定。分別采用蛋白沉淀法和液液萃取法處理人肝微粒體孵育體系樣品,測定氯吡格雷原藥及MP-AM和CCAM藥物濃度。氯吡格雷原藥濃度的測定在HPLC儀上進行,采用Accurasil C18色譜柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流動相為甲醇-水（磷酸調(diào)p H 2.85）（22∶78）,流速1 m L·min-1,檢測波長235 nm;MP-AM和CCAM的濃度測定在UPLC-MS/MS儀上進行,采用Thermo C18色譜柱（100 mm×2.1 mm,5μm）,流動相為乙腈（含0.1%甲酸）-水（含0.1%甲酸）（9∶1）,流速200μL·min-1,正離子模式多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）掃描分析,離子通道分別為MP-AM m/z503.6→353.8,CCAM m/z 307.7→197.8,內(nèi)標(biāo)氯雷他定m/z 382.8→... 

【文章來源】：藥物分析雜志. 2015,35(10)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1儀器和試藥
2研究對象
3色譜及質(zhì)譜條件
4工作液配制
5溫孵方法
6孵育樣品處理
    6. 1氯吡格雷原藥濃度測定
    6. 2氯吡格雷代謝產(chǎn)物濃度測定
7方法學(xué)考察
    7. 1方法專屬性
    7. 2線性范圍和最低定量限
    7. 3精密度和準(zhǔn)確度考察
    7. 4回收率考察
    7. 5基質(zhì)效應(yīng)考察
    7. 6穩(wěn)定性試驗考察
8氯吡格雷的酶促動力學(xué)應(yīng)用及結(jié)果
9討論
    9. 1孵育條件優(yōu)化
    9. 2小結(jié)



本文編號：3544299