目的:食管癌是一種常見的消化道惡性腫瘤,我國尤其河南省食管癌發(fā)病率和死亡率均較高。目前臨床上用于治療食管癌的藥物包括:5-氟尿嘧啶、阿霉素等,但其毒副作用較強且易于誘導(dǎo)食管癌細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性。因此,尋求新的更具選擇性的小分子化合物對食管癌的治療具有重要意義。近年來研究發(fā)現(xiàn)一些酰腙類化合物具有良好的抗腫瘤治療潛力,已成為抗腫瘤小分子化合物研究中的熱點之一。因此本課題組前期合成了20個酰腙類衍生物,通過MTT法篩選出化合物6p對食管癌細(xì)胞有較強的細(xì)胞毒作用,并進一步研究其作用機制。方法:MTT法檢測20個酰腙類化合物對食管癌EC9706和EC109、肝癌SMMC-7721、前列腺癌PC3、乳腺癌MCF7、胃癌MGC803細(xì)胞生存率的影響;克隆形成并結(jié)晶紫染色檢測化合物6p對食管癌細(xì)胞EC9706和EC109克隆形成能力的影響;PI染色并流式細(xì)胞儀檢測化合物6p對上述食管癌細(xì)胞細(xì)胞周期的影響;Hoechst33342染色并熒光顯微鏡觀察檢測化合物6p對食管癌細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化;Annexin-V/FITC和PI染色并流式細(xì)胞儀定量檢測化合物6p對食管癌細(xì)胞凋亡的影響,并利用Caspase抑制... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

2化合物6p對EC9706和EC109細(xì)胞生存率的影響

24圖注 2.3.3 化合物 6p 對 EC9706 和 EC109 細(xì)胞克隆形成的影響：0.5μM、1μM 和 2μ物 6p 作用于 EC9706和 EC109 細(xì)胞 7天后，采用結(jié)晶紫進行染色，顯微鏡觀察克隆況，實驗獨立重復(fù)三次，與對照組相比， ***P<0.0012.3.4 化合物 6p 使 EC9706 和 EC109 細(xì)胞周期阻滯于 G0/G1 期為了深入地研究化合物抑制增殖的原因，我們采用了流式細(xì)胞儀檢物對細(xì)胞周期的影響。分別用 1μM、2μM 和 4μM 化合物 6p 處理食管EC9706 和 EC109 24h 后，細(xì)胞周期發(fā)生明顯的變化。結(jié)果如圖 2.3.4 所著化合物濃度的增加，細(xì)胞 G0/G1 的比例明顯增加，G2/M 期的比例明在 EC9706 細(xì)胞中，隨著濃度的增加，G0/G1 期的比例分別為 57.44%、圖 2.3.3 化合物 6p 對 EC9706 和 EC109 細(xì)胞克隆形成的影響

25圖注 2.3.4 化合物 6p 對 EC9706 和 EC109 細(xì)胞周期的影響：A.1μM、2μM 和 4μM 6p 處理EC9706 和 EC109 細(xì)胞 24 h 后，用 PI 染色，采用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期的變化；B.統(tǒng)計學(xué)分析化合物 6p 對 EC9706 和 EC109 細(xì)胞周期的影響。實驗獨立重復(fù)三次，與對照組相比，**P<0.01，***P<0.0012.3.5 化合物 6p 增加細(xì)胞內(nèi)周期相關(guān)蛋白 P27 的表達量為了研究化合物誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯的機制，我們檢測了周期相關(guān)蛋白 P27的表達量。分別用 1μM、2μM 和 4μM 化合物 6p 作用于 EC9706 和 EC109 細(xì)胞圖 2.3.4 化合物 6p 對 EC9706 和 EC109 細(xì)胞周期的影響


本文編號：3501111