目的:評估麝香酮（muscone）對多柔比星（doxorubicin,DOX）誘導(dǎo)的心毒性作用的影響,并探討其可能機制。方法:成年雄性C57BL/6小鼠24只,隨機分為4組:生理鹽水組（control組,4只）、生理鹽水+麝香酮組（muscone組,4只）、多柔比星+生理鹽水組（DOX組,8只）和多柔比星+麝香酮組（DOX+muscone組,8只）,藥物處理后飼養(yǎng)5周,于藥物處理前、藥物處理后第2周、第5周心超檢測左室射血分?jǐn)?shù)（left ventricular ejection fraction,LVEF）,第6周處死小鼠分離心臟組織,通過免疫組織化學(xué)染色、實時定量聚合酶鏈反應(yīng)（quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR）檢測Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3的表達水平。H9C2細(xì)胞分4組（control組、muscone組、DOX組、DOX+muscone組）,藥物處理24 h,Western blot檢測Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved-caspase-3的表達水平。結(jié)果... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2020,40(05)北大核心CSCD

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麝香酮對多柔比星誘導(dǎo)的H9C2細(xì)胞活力及凋亡的影響

多柔比星是臨床常見化療藥物，對部分腫瘤極為有效，包括乳腺癌等，但其心毒性限制了其在臨床的應(yīng)用。許多分子（主要是調(diào)節(jié)多柔比星代謝、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡、自噬和壞死相關(guān)分子）導(dǎo)致其心毒性[8]。凋亡作為主要機制之一歷來是多柔比星心毒性治療方面的研究熱點。在本研究中，分析實驗數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)麝香酮可以抑制多柔比星誘導(dǎo)的小鼠心肌損害。進一步研究表明麝香酮可以通過抑制多柔比星誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡從而改善小鼠心功能。同時，體外研究表明麝香酮可以抑制多柔比星誘導(dǎo)H9C2細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達。圖3 麝香酮對多柔比星誘導(dǎo)的小鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響

圖2 麝香酮對多柔比星誘導(dǎo)的小鼠心功能的影響凋亡主要有3條經(jīng)典信號通路：外源途徑、內(nèi)源（線粒體）途徑、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑[9]，而Bcl家族主要參與線粒體途徑調(diào)控。多柔比星化療導(dǎo)致氧化應(yīng)激增加、細(xì)胞凋亡和線粒體功能障礙[10]，從而激活腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK），對多種下游靶點如c-Jun氨基端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）、P53、mtorc1的調(diào)節(jié)，從而促進其下游機制的進行，引起心肌細(xì)胞凋亡[11-12]。本研究發(fā)現(xiàn)，麝香酮抑制了多柔比星誘導(dǎo)的Bcl-2減少，及Bax、cleaved-caspase3的升高。而Bcl-2家族（包括抗凋亡因子Bcl-2、BclXL、Bcl-W、mcl1和促凋亡因子Bax、Bak1等）在P53影響下調(diào)節(jié)線粒體外膜通透，使線粒體膜間隙中的可溶性蛋白（如細(xì)胞色素c）彌散到細(xì)胞胞漿中。細(xì)胞色素c導(dǎo)致凋亡蛋白酶活化因子1(apoptotic protease activating factor-1,APAF1）寡聚形成caspase活化復(fù)合物（凋亡小體）。這結(jié)合促進了啟動子caspase-9的激活，進而激活了caspase-3和caspase-7，這些caspase-3和caspase-7可裂解多種底物，從而誘發(fā)凋亡表型[13]。此外，當(dāng)P53表達被抑制時，可使心臟組織Bax和caspase-3表達下調(diào)[14]。麝香酮有可能是通過P53、AMPK相關(guān)通路對多柔比星誘導(dǎo)的Bcl-2、Bax表達產(chǎn)生影響，其機制還需進一步論證。已有文獻報道，Bcl-2、Bcl-XL參與了與Beclin-1的相互作用，影響細(xì)胞的自噬與凋亡[15]。Beclin-1具有Bcl-2同源性（Bcl-2 homology,BH)3結(jié)構(gòu)域，其BH3結(jié)構(gòu)域可與BH3受體結(jié)合，抑制抗凋亡的Bcl-2蛋白，如Bcl-2和Bcl-XL，或激活促凋亡的Bcl-2家族成員，如Bax和Bak。另一方面，Beclin-1作為Ⅲ類磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）復(fù)合物的組成部分，在自噬小體形成中起關(guān)鍵作用[16],Bcl-2與Beclin-1的結(jié)合會降低Beclin-1激活自噬的能力[17]。麝香酮與多柔比星誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬、自噬與凋亡的相關(guān)作用及其機制也有待進一步研究。


本文編號：3475046