本論文系統(tǒng)地對兩株具有產(chǎn)生安莎抗生素潛力的鏈霉菌Streptomyces sp.LZ35和S010的突變株進行了發(fā)酵產(chǎn)物的分離、純化和結構鑒定的研究。該研究采用一系列常規(guī)的、實驗室通用的分離純化技術,對代謝產(chǎn)物進行分析分離,共純化鑒定88個化合物,并應用UV、MS、NMR和X-單晶衍射技術確定了它們的結構,其中新化合物54個,同時對部分化合物的生物活性也進行了研究。對突變株SR201namlOE的燕麥瓊脂培養(yǎng)基的100 L平板發(fā)酵產(chǎn)物進行分離和結構鑒定,共得到28個化合物（1-28）,包括6個新型8酮萘安莎類化合物neoansamycins D-I（10-15）、4 個大環(huán)內(nèi)醋類化合物 meridamycins A-D（2-5）和 2個二萜cyclooctatin系列化合物（7和8）�；衔�10-15的分離鑒定進一步證明nas基因簇是新型8酮萘安莎的生物合成基因簇,為下一步研究該類化合物具體的生物合成途徑奠定基礎。為研究新骨架雜合萜quinolinecarboxamides類化合物單萜環(huán)化部分的形成過程并獲得中間體進行體外酶活實驗,本課題組時鵬博士研究生在突變株LZ35△gdmAI△n... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：204 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖３．１３．化合物２６－２８的ＣＯＳＹ和ＨＭＢＣ部分相關信號??．．ｌ－ｌ

ＬＺ３５菌株基因組測序結果，通過數(shù)據(jù)比較分析，在染色體上定位了??ｑｕｉｎｏｌｉｎｅｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ生物合成基因簇（ｇｗ／），見圖３．１４。根據(jù)分離得到的??ｑｕｉｎｏｌｉｎｅｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅｓ類化合物的結構，我們推測其生物合成途徑如圖３．１５。??我們推測菌株ＬＺ３５的Ｃ－甲基轉(zhuǎn)移酶催化ｑｕｉｎｏｌｉｎｅｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅｓ類化合物單??萜環(huán)化部分的生物合成，為分離得到生物合成中間體（圖３．１５紅框中的化合物）??并進行體外酶活實驗，本課題組時鵬博士研宄生在構建的敲除八種主成分??（ｈｙｇｒｏｃｉｎｓ、ｅｌａｉｏｐｈｙｌｉｎｓ、ｎｉｇｅｒｉｃｉｎｓ、ｇｅｌｄａｎａｍｙｃｉｎｓ、ｇａｌｂｏｎｏｌｉｄｅｓ、ａｚａｌｏｍｙｃｉｎｓ、??ｃｕｅｖａｅｎｅｓ?和?ｅｃｈｏｓｉｄｅｓ）的突變株??△ｅｃ／Ｌ４?（簡稱ＬＺ３５Ａ８）的基礎上，通過抗性替換對ＬＺ３５中的其中一個甲基轉(zhuǎn)移??酶（ｍｅｔｈｙｌ?ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）基因?ｇｗ／５?進行敲除，獲得突變株??△Ｚ／ｇｄＡｇｆｌ／△瓜（簡稱?ＬＺ３５Ａ８ＡＭ７），命名為?ＳＰ３０２。??ｑｕＩＡ?Ｂ?Ｃ?Ｄ?Ｅ?Ｆ?Ｇ?Ｈ?Ｉ?Ｊ??１?ｋｂ??｜?ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ?■?ＣＹＰ?｜?Ｎ－ｏｘｉｄａｓｅ?｜?ｐｒｅｎｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ??ａ

（ｐａｒａ－ａｍｉｎｏｂｅｎｚａｔｅ／ｐａｒａ－ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚａｔｅ）和單蔽（ｍｏｎｏｔｅｒｐｅｎｅ）三部分組成。根據(jù)??ＬＺ３５菌株基因組測序結果，通過數(shù)據(jù)比較分析，在染色體上定位了??ｑｕｉｎｏｌｉｎｅｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ生物合成基因簇（ｇｗ／），見圖３．１４。根據(jù)分離得到的??ｑｕｉｎｏｌｉｎｅｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅｓ類化合物的結構，我們推測其生物合成途徑如圖３．１５。??我們推測菌株ＬＺ３５的Ｃ－甲基轉(zhuǎn)移酶催化ｑｕｉｎｏｌｉｎｅｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅｓ類化合物單??萜環(huán)化部分的生物合成，為分離得到生物合成中間體（圖３．１５紅框中的化合物）??并進行體外酶活實驗，本課題組時鵬博士研宄生在構建的敲除八種主成分??（ｈｙｇｒｏｃｉｎｓ、ｅｌａｉｏｐｈｙｌｉｎｓ、ｎｉｇｅｒｉｃｉｎｓ、ｇｅｌｄａｎａｍｙｃｉｎｓ、ｇａｌｂｏｎｏｌｉｄｅｓ、ａｚａｌｏｍｙｃｉｎｓ、??ｃｕｅｖａｅｎｅｓ?和?ｅｃｈｏｓｉｄｅｓ）的突變株??△ｅｃ／Ｌ４?（簡稱ＬＺ３５Ａ８）的基礎上，通過抗性替換對ＬＺ３５中的其中一個甲基轉(zhuǎn)移??酶（ｍｅｔｈｙｌ?ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）基因?ｇｗ／５?進行敲除，獲得突變株??△Ｚ／ｇｄＡｇｆｌ／△瓜（簡稱?ＬＺ３５Ａ８ＡＭ７），命名為?ＳＰ３０２。??ｑｕＩＡ?Ｂ?Ｃ?Ｄ?Ｅ?Ｆ?Ｇ?Ｈ?Ｉ?Ｊ??１?ｋｂ??｜?ｍｅ

【參考文獻】：
期刊論文
[1]微生物共培養(yǎng)在新活性化合物挖掘中的研究進展[J]. 趙曦,解云英,白利平.  微生物學通報. 2017(10)
[2]基因組挖掘技術在海洋放線菌天然產(chǎn)物研究開發(fā)中的應用及展望[J]. 陳亮宇,王玉梅,趙心清.  微生物學通報. 2013(10)
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[5]Hsp90抑制劑的研究進展[J]. 孟帥,山廣志,李卓榮.  中國抗生素雜志. 2011(04)
[6]農(nóng)用抗生素的新資源——海洋微生物[J]. 田黎,陳杰,何運轉(zhuǎn),田玲.  中國生物防治. 2003(03)
[7]海洋微生物活性代謝產(chǎn)物化學[J]. 林永成,周世寧,樂長高.  大學化學. 1996(06)

博士論文
[1]八株土壤放線菌次級代謝產(chǎn)物的研究[D]. 張治強.山東大學 2017
[2]鏈霉菌LZ35菌株中沉默新安莎基因簇的激活和hygrocin生物合成研究[D]. 李善仁.廈門大學 2013

碩士論文
[1]三株海洋放線菌次級代謝產(chǎn)物的研究[D]. 張娟利.山東大學 2015
[2]一株海洋芽孢桿菌代謝產(chǎn)物的研究[D]. 王洪強.寧波大學 2013
[3]混合物中多種噻唑烷酮類小分子探針的構效關系及協(xié)同作用研究[D]. 張瑩.山東大學 2008



本文編號：3465749