目的研究miR-29a通過調(diào)控絲裂原活化蛋白激酶（Mitogen-Activated Protein Kinase,MAPK）信號通路抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的機(jī)制。方法體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）,待細(xì)胞生長至對數(shù)期時將細(xì)胞分為miR-29a mimic組（轉(zhuǎn)染miR-29a mimic）和miR-29a NC組（轉(zhuǎn)染miR-29a NC）。培養(yǎng)24 h后,用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（Quantitative Real-time PCR）檢測血管內(nèi)皮細(xì)胞中miR-29a的表達(dá),以噻唑藍(lán)（MTT）法檢測血管內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞活力,以5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷（5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU）染色檢測血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖情況,以流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的周期,以蛋白質(zhì)印跡法（Western Blot）檢測細(xì)胞中B淋巴細(xì)胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2相關(guān)蛋白（Bcl-2-associated X protein,Bax）、細(xì)胞周期蛋白激酶（Cyclin-Dependent Kinase 4,CDK 4）、細(xì)胞周期蛋白激酶（... 

【文章來源】：中國臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(18)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 方法
        2.1 內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2 以qRT-PCR檢測人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中miR-29a的表達(dá)[5]
        2.3 以MTT法檢測人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞活力[6]
        2.4 以流式細(xì)胞術(shù)檢測人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞周期[7]
        2.5 以蛋白質(zhì)印跡法檢測人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中蛋白的表達(dá)[8]
    3 統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié) 果
    1 miR-29a mimic轉(zhuǎn)染的驗證
    2 miR-29a mimic對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞活力、增殖及細(xì)胞周期的影響
    3 miR-29a mimic對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞凋亡情況和細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    4 miR-29a mimic對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中MAPK信號通路的影響
討 論



本文編號：3464968